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1、撒立安滅菌、消毒原理及效果一、消毒原理1967年,日本東京大學(xué)的本多建一教授和博士班學(xué)生藤島昭發(fā)現(xiàn),用光照射二氧化鈦電極可進(jìn)行水的電解反應(yīng)。這就是著名的“本多作用光反應(yīng),將空氣中的水或氧氣催化成氧化能力極強(qiáng)的羥基自由基(-OH)和超氧陰離子自由基(O2—)、活性氧(HO2—,H2O2)等具有極強(qiáng)氧化能力的光活性基團(tuán),這些光活性基團(tuán)的能量相當(dāng)于3600K(3300多℃)的高溫,具有很強(qiáng)的氧化性,一、消毒原理這些強(qiáng)氧化性基團(tuán)可強(qiáng)效分解各種具有不穩(wěn)定化學(xué)鍵的有機(jī)化合物和部分無機(jī)物,并可破壞細(xì)菌的細(xì)胞膜和凝固病毒的蛋白質(zhì)載體。在復(fù)雜的細(xì)菌細(xì)胞體系內(nèi),由光反應(yīng)作用所引起的致
2、死性的氧化反應(yīng)一旦發(fā)生,反應(yīng)對細(xì)胞的損傷作用在閉光條件下也會(huì)通Fenton反應(yīng)或自由基對脂類的過氧化連鎖反應(yīng)而得到延續(xù)。其中,大腸桿菌E.coli對光反應(yīng)作用表現(xiàn)出更高的敏感性。這與革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu),特別是細(xì)胞壁的成和厚度有很大關(guān)系。相比而言,在單一的紫外光作用下,抗菌效果并不明顯。這是因?yàn)樽贤夤鈱?xì)菌細(xì)胞的損傷并非持久性的納米二氧化鈦在光照射下,價(jià)帶電子被激發(fā)到導(dǎo)帶,形成了電子和空穴,與吸附于其表面的O2和H2O作用,生成超氧化物陰離子自由基O2-和羥基自由基-OH,其自由基具有很強(qiáng)的氧化分解能力,能破壞有機(jī)物中的C-C鍵、C-H鍵、C-N
3、鍵、C-O鍵、O-H鍵、N-H鍵,分解有機(jī)物為二氧化碳與水;同時(shí)破壞細(xì)菌的細(xì)胞膜固化病毒的蛋白質(zhì),從而殺死細(xì)菌、病毒。二、氧化離子的形成三、產(chǎn)生殺菌消毒需具備的條件①氧氣及水分子②納米二氧化鈦表面;③光照射④強(qiáng)吸附四、殺菌、消毒效果實(shí)驗(yàn)(二)一、實(shí)驗(yàn)步驟所需儀器及物品:振蕩器、培養(yǎng)箱、PCR儀、離心機(jī)干粉滅菌劑①撒立安-稀土·20nmTiO2蒙脫石、②普通TiO2蒙脫石、③某進(jìn)口干粉滅菌劑、標(biāo)準(zhǔn)菌株、2.1菌株培養(yǎng)???將菌落、沙門和金黃色葡萄球菌分別接種于相應(yīng)培養(yǎng)基,置于旋轉(zhuǎn)搖床37℃培養(yǎng),搖床轉(zhuǎn)速110?r/?min。?當(dāng)細(xì)菌生長處于對數(shù)期或穩(wěn)定生長期時(shí),取
4、培養(yǎng)的懸菌液10?mL于滅菌離心管內(nèi)以5000?r/?min離心5m?in,再以無菌蒸餾水(調(diào)節(jié)pH值為7.2)水洗離心兩次,最后稀釋成一定初始濃度的懸菌液備用。?細(xì)菌初始濃度以顯微計(jì)數(shù)法測得。四、殺菌、消毒效果實(shí)驗(yàn)(二)2.2滅菌試驗(yàn)。取初始濃度為N0=1.0×105cfu/ml的懸菌液?、N01=2.1×105cfu/ml沙門氏菌、N02=2.1×105cfu/ml金黃色葡萄球菌的懸菌液?各1mL于培養(yǎng)皿中。做1個(gè)對照,其它按照5g/m2的量均勻撒入干粉劑5g/m2,普通光下和紫外光下分別作用2小時(shí)后,注入5ml生理鹽水,混勻,取此懸菌液做3個(gè)稀釋度,注入營養(yǎng)
5、瓊脂,??移入37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。2.2.1滅菌性能評(píng)價(jià)1)不同光照下的滅菌效果滅菌性能以細(xì)菌殺滅率X=(N0-Nt)/N0?(初始細(xì)菌濃度N0-細(xì)菌存活率為殘余細(xì)菌濃度Nt之差與初始細(xì)菌濃度N0之比)來評(píng)價(jià)。平板菌落計(jì)數(shù)法測定。四、殺菌、消毒效果實(shí)驗(yàn)(對比試驗(yàn))序號(hào)滅菌劑加入滅菌劑前加入滅菌劑后滅菌率說明0對照2.1×1051.8×10515%1①2.1×1052.3×10489%2②2.1×1058.4×10460%3③2.1×1055.3×10475%表1.1紫外光照射下對致病菌殺滅效果①撒立安-稀土·20nmTiO2蒙脫石、②普通TiO2蒙脫石、③某進(jìn)口干
6、粉滅菌劑四、殺菌、消毒效果實(shí)驗(yàn)(對比試驗(yàn))表1.2紫外光照射下對細(xì)菌殺滅效果①撒立安-稀土·20nmTiO2蒙脫石、②普通TiO2蒙脫石、③某進(jìn)口干粉滅菌劑序號(hào)滅菌劑加入滅菌劑前加入滅菌劑后滅菌率說明0對照1.0×1059.4×10410%紫外燈殺菌效果1①1.0×1052.1×10398%紫外燈殺菌效果+光敏殺菌效果2②1.0×1051.0×10490%紫外燈殺菌效果+光敏殺菌效果3③1.0×1058.8×10415%四、殺菌、消毒效果實(shí)驗(yàn)(對比試驗(yàn))表1.3普通可見光照射下對細(xì)菌殺滅效果①撒立安-稀土·20nmTiO2蒙脫石、②普通TiO2蒙脫石、③某進(jìn)口干粉
7、滅菌劑序號(hào)滅菌劑加入滅菌劑前加入滅菌劑后滅菌率說明0對照1.0×1051.0×1050%1①1.0×1051.9×10399%2②1.0×1057.0×10432%3③1.0×1056.1×10442%四、殺菌、消毒效果實(shí)驗(yàn)(對比試驗(yàn))表1.4普通可見光照射下對致病細(xì)菌殺滅效果①撒立安-稀土·20nmTiO2蒙脫石、②普通TiO2蒙脫石、③某進(jìn)口干粉滅菌劑序號(hào)滅菌劑加入滅菌劑前加入滅菌劑后滅菌率說明0對照2.1×1051.9×10511%1①2.1×1051.5×10493%2②2.1×1058.1×10462%3③2.1×1055.7×10473%四、殺菌、消毒
8、效果對比實(shí)