實驗動物采血方法

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1、九、實驗動物采血方法　　實驗研究中，經(jīng)常要采集實驗動物的血液進(jìn)行常規(guī)檢查或某些生物化學(xué)分析，故必須掌握血液的正確采集、分離和保存的操作技術(shù)?！　〔裳椒ǖ倪x擇，主要決定于實驗的目的所需血量以及動物種類。凡用血量較少的檢驗如紅、白細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白的測定，血液涂片以及酶活性微量分析法等，可刺破組織取毛細(xì)血管的血。當(dāng)需血量較多時可作靜脈采血。靜脈采血時，若需反復(fù)多次，應(yīng)自遠(yuǎn)離心臟端開始，以免發(fā)生栓塞而影響整條靜脈。例如，研究毒物對肺功能的影響、血液酸堿平衡、水鹽代謝紊亂，需要比較動、動脈血氧分壓、二氧化碳分壓和血液pH值以及K+、Na+、CI-離子濃度，必須采

2、取動脈血液?！　〔裳獣r要注意：⑴采血場所有充足的光線；室溫夏季最好保持在25-28℃，冬季，15-20℃為宜；⑵采血用具有采用部位一般需要進(jìn)行消毒；⑶采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或試管內(nèi)需預(yù)先加入抗凝劑。現(xiàn)將采用血方法按動物和部位分別加以介紹?！　〔煌瑒游锊裳课慌c采血量的關(guān)系可參考表11-7。表11-7　不同動物采血部位與采血量的關(guān)系全屏顯示該表格采血量采血部位動物品種取少量血尾靜脈耳靜脈眼底靜脈叢舌下靜脈大鼠、小鼠兔、狗、貓、豬、山羊、綿羊兔、大鼠、小鼠兔腹壁靜脈冠、腳蹼皮下靜脈青蛙、蟾蜍雞、鴨、鵝取中量血后肢外側(cè)皮下

3、小隱靜脈前肢內(nèi)側(cè)皮下頭靜脈耳中央動脈頸靜脈心臟斷頭翼下靜脈頸動脈狗、猴、貓狗、猴、貓兔狗、貓、兔豚鼠、大鼠、小鼠大鼠、小鼠雞、鴨、鴿、鵝雞、鴨、鴿、鵝取大量血股動脈、頸動脈心臟頸靜脈摘眼球狗、猴、貓、兔狗、猴、貓、兔馬、牛、山羊、綿羊大鼠、小鼠　　常用實驗動物的最大安全采血量與最小的致死采用血量，見表11-8。表11-8　常用實驗動物的最大安全采血量與最小致死采血量全屏顯示該表格動物品種最大安全采血量（ml）最小致死采血量（ml）小　　鼠0.20.3大　　鼠12豚　　鼠510兔1040狼　　狗100500獵　　狗50200猴1560　　(一)小鼠、大鼠采血

4、法　　1.割(剪）尾采血　　當(dāng)所需血量很少時采用本法。固定動物并露出鼠尾。將尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的溫水中數(shù)分鐘，使尾部血管充盈。再將尾擦干，用銳器（刀或剪刀）割去尾尖0.3-0.5cm，讓血液自由滴入盛器或用血紅蛋白吸管吸取，采血結(jié)束，傷口消毒并壓迫止血。也可在尾部作一橫切口，割破尾動脈或靜脈，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3～0.5ml。　　2.鼠尾刺血法　　大鼠用血量不多時（僅做白細(xì)胞計數(shù)或血紅蛋白檢查），可采用本法。先將鼠尾用溫水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7號或8號注射

5、針頭，刺入鼠尾靜脈，拔出針頭時即有血滴出，一次可采集10～50mm3。如果長期反復(fù)取血，應(yīng)先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐漸向近心端穿刺。　　3.眼眶靜脈叢采血　采血者的左手拇食兩指從背部較緊地握住小鼠或大鼠的頸部（大鼠采血需帶上紗手套），應(yīng)防止動物窒息。當(dāng)取血時左手拇指及食指輕輕壓迫動物的頸部兩側(cè)，使眶后靜脈叢充血。右手持續(xù)接7號針頭的1ml注射器或長頸（3～4cm）硬質(zhì)玻璃滴管（毛細(xì)管內(nèi)徑0.5-1.0mm），使采血器與鼠面成45℃的夾角，由眼內(nèi)角刺入，針頭斜面先向眼球，刺入后再轉(zhuǎn)180度使斜面對著眼眶后界。刺入濃度，小鼠約2～3mm，大鼠約4～5mm。當(dāng)

6、感到有阻力時即停止推進(jìn)，同時，將針退出約0.1-0.5mm，邊退邊抽。若穿刺適當(dāng)血液能自然流入毛細(xì)管中，當(dāng)?shù)玫剿璧难亢螅闯ゼ佑陬i部的壓力，同時，將采血器拔出，以防止術(shù)后穿刺孔出血?！　∪艏夹g(shù)熟練，用本法短期內(nèi)可重復(fù)采血均無多大困難。左右兩眼輪換好。體重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml；體重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可適用于某些生物化學(xué)項目的檢驗?！　?.斷頭取血　　采血者的左手拇指和食指以背部較緊地握住大（?。┦蟮念i部皮膚，并作動物頭朝下傾的姿勢。右手用剪刀猛剪鼠頸，約1/2-4/5的頸部前剪斷，讓血自由滴入盛

7、器。小鼠可采用約0.8～1.2ml;大鼠約5-10ml?！　?.心臟采血　　鼠類的心臟較小，且心率較快，心臟采血比較困難，故少用。活體采血方法與豚鼠相同。若做開胸一次死亡采血，先將動物作深麻醉，打開胸腔，暴露心臟，用針頭刺入右心室，吸取血液。小鼠約0.5-0.6ml；大鼠約0.8-1.2ml。　　6.頸動靜脈采血　　先將動物仰位固定，切開頸部皮膚，分離皮下結(jié)締組織，使頸靜脈充分暴露，可用注射器吸出血液。在氣管兩側(cè)分離出頸動脈，離心端結(jié)扎，向心端剪口將血滴入試管內(nèi)。　　7.腹主動脈采血　　最好先將動物麻醉，仰臥固定在手術(shù)架上，從腹正中線皮膚切開腹腔，使腹主動

8、脈清楚暴露。用注射器吸出血液，防止溶血?；蛴脽o齒鑷子剝離結(jié)締組織，