紫蘇提取物抗氧化活性及酚性成分的研究

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1、紫蘇提取物抗氧化活性及酚性成分的研究作者：馮蓉潔，呂佩惠，盛振華，吳巧鳳【摘要】　　目的研究紫蘇體外抗氧化活性。方法在測定紫蘇各酚性成分含量基礎(chǔ)上，采用體外抗氧化實驗，研究其DPPH清除能力、總還原力和抗脂質(zhì)體氧化能力。結(jié)果75%乙醇和50%丙酮提取物具有良好的抗氧化活性；紫蘇提取物中總黃酮、原花色素含量與其抗氧化能力之間呈正相關(guān)。結(jié)論紫蘇有顯著的抗氧化活性，呈一定的量-效關(guān)系。其抗氧化活性可能與黃酮類化合物有關(guān)。紫蘇提取物可作為一種良好的天然抗氧化劑應用于臨床。【關(guān)鍵詞】紫蘇總黃酮原花色素抗氧化活性紫

2、蘇為唇形科紫蘇屬Perillafrutescens(L.)Britt.一年生草本植物，是傳統(tǒng)的藥食兩用中藥，在江浙各地均有種植，資源豐富，價格低廉。其主要含有紫蘇苷、原花色素、紫蘇素、木犀草素和芹黃素等多酚類化合物，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗衰老、清除和抑制自由基等作用［1］。有研究表明，紫蘇葉中含有豐富的黃酮類化合物，具有清除自由基、抗衰老作用；紫蘇的水溶性色素亦具有一定的抗氧化活性［2～3］。目前國內(nèi)外研究主要集中在紫蘇籽揮發(fā)油成分上，對紫蘇尤其是紫蘇的酚性成分研究較少。本文通過體外抗氧化實驗，確定紫蘇有效

3、部位抗氧化活性及酚性成分組成，為其臨床應用及各種成分的抗氧化藥理作用研究提供理論依據(jù)。1儀器及試劑儀器BS224S精密電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司),TU-1900雙光束紫外可見分光光度計，KQ-250DE數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。試劑和材料紫蘇采自浙江杭州，經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學資源鑒定教研室姚振生教授鑒定為唇形科紫蘇屬植物Perillafrutescens(L.)Britt.，粉碎后過40目篩。蘆丁、兒茶素、沒食子酸，均購自中國藥品生物制品檢定所；大豆卵磷脂、DPPH，均購自s

4、igma公司。其他試劑均為分析純。　2方法與結(jié)果.1供試品溶液的制備取g紫蘇藥材粉末，分別按表1加入20倍量提取溶劑，70℃水浴提取2次，1h/次，合并濾液，濃縮至干，臨用前配成所需濃度，作為供試品溶液。.2紫蘇酚性物質(zhì)的含量測定［4～6］采用FeCl3-K3Fe(CN)6比色法，以沒食子酸為標樣制作標準曲線，測定紫蘇中總酚酸含量；采用香草醛/硫酸比色法，以兒茶素為標樣制作標準曲線，測定其原花色素含量；采用堿式鋁鹽比色法，以蘆丁為標樣制作標準曲線，測定其總黃酮含量。.3抗氧化活性實驗［7～9］.清除自由

5、基活力取提取物適量，加入2μg/ml的DPPH甲醇溶液，快速混勻，30min后測定在51nm處的吸光度。計算DPPH清除率：清除率(%)=×100%?！　∑渲校跠PPH］t表示30min時體系的吸光度；［DPPH］t=0表示0時刻體系的吸光度。.還原力測定取提取物適量，加入磷酸緩沖液及1%鐵氰化鉀溶液，50℃保溫20min后，加入10%三氯乙酸，混勻后取，加入蒸餾水及%三氯化鐵。在700nm處測定反應液吸光度值。吸光度值越大，表示還原力越強。.脂質(zhì)體氧化法將大豆卵磷脂分散于去離子水中，20kHz超聲波處

6、理30min，周圍以冰水冷卻，制得大豆磷脂濃度為%的人工脂質(zhì)體。取20ml脂質(zhì)體，加入提取物，以10mmol乙酸銅20μl催化氧化反應，混勻后放置于回轉(zhuǎn)式恒溫水浴振蕩器上，于暗處37℃、100r/min進行開口氧化實驗，每隔一定時間測定共軛二烯氫過氧化物及丙二醛生成量。　　共軛二烯氫過氧化物(CD)的測定：取1ml氧化液，溶于ml甲醇，于23nm處測定其吸光度，以摩爾消光系數(shù)ε=XXL·mol-1·cm-1計算脂質(zhì)體體系中共軛二烯氫過氧化物的生成量?！　”┑臏y定：取氧化液，加入1mlMDA溶液，測定

7、在53nm處的吸光度，以摩爾消光系數(shù)ε=×10L·mol-1·cm-1計算丙二醛的生成量?！　】寡趸Ч靡种坡时硎荆阂种坡?%)=×100%　　結(jié)果見表1及圖1～4。表1紫蘇酚性物質(zhì)組成及抗氧化作用結(jié)果圖1紫蘇提取物的還原力圖2紫蘇提取物對DPPH的清除作用圖3丙二醛的生成　　由表1和圖1～4可知，紫蘇各提取物均具有較強的抗氧化活性，可提高自由基的清除率，促進Fe3+的還原和抑制卵磷脂氧化產(chǎn)物的生成。其中，75%乙醇提取物自由基的清除率最強，50%丙酮提取物的還原力最強，兩者均可顯著抑制自由基的產(chǎn)生，

8、延長CD生成的峰值時間，減少同期各時段MDA的生成量。圖4共軛二烯氫過氧化物的生成.4酚性物質(zhì)組成與抗氧化活性相關(guān)性分析以原花色素(X1)、總黃酮(X2)和總酚酸(X3)含量為橫坐標，還原力(Y)為縱坐標，采用軟件對表1結(jié)果進行線性關(guān)系考察，得方差分析結(jié)果(見表2)和回歸標準殘差正態(tài)P-P圖。表2方差分析表由表2和圖5可知，P圖5回歸標準殘差正態(tài)P-P圖表3回歸系數(shù)分析由表3可知，紫蘇酚性物質(zhì)含量對還原力的總體回歸方程為：Y=++?！　橄?/p>