醫(yī)學(xué)課件凝血因子檢查

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1、項(xiàng)目14凝血因子檢查模塊1內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的檢驗(yàn)基礎(chǔ)理論血液離開血管數(shù)分鐘后，血液就由流動(dòng)的溶膠狀態(tài)變成不能流動(dòng)的膠凍狀凝塊，這一過程稱為血液凝固（blood?coagulation）或血凝。在凝血過程中，血漿中的纖維蛋白源轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗艿难w維。血纖維交織成網(wǎng)，將很多血細(xì)胞網(wǎng)羅在內(nèi)，形成血凝塊。血液凝固后1-2小時(shí)，血凝塊又發(fā)生回縮，并釋出淡黃色的液體，稱為血清。血液離體，血細(xì)胞下沉。上層析出的黃色清亮液體是血清？還是血漿？血漿：離開血管的全血經(jīng)抗凝處理后，通過離心沉淀，所獲得的不含細(xì)胞成分的液體，即血

2、漿。血清：離體的血液凝固之后，經(jīng)血凝塊聚縮釋出的液體，即血清。血清與血漿的區(qū)別：主要在于血清不含纖維蛋白原。纖維蛋白原能轉(zhuǎn)換成纖維蛋白，具有凝血作用。血液凝固定義：血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)變成不能流動(dòng)的凝膠狀態(tài)的過程。方式：激活凝血系統(tǒng)，使血漿中纖維蛋白原纖維蛋白，形成纖維蛋白網(wǎng)加固血小板血栓（有效止血）。血管損傷暴露血管內(nèi)皮下膠原血小板激活（粘附、聚集、釋放）血小板止血栓血凝塊形成血管收縮凝血系統(tǒng)激活纖維蛋白形成（一）凝血因子(bloodclottingfactor)定義：血漿與組織中直接參與血液凝固

3、的物質(zhì)。種類：13種（其中FVI是FVa，實(shí)為12種)。因子凝血因子的特點(diǎn)①除Ca2+和磷脂外，其余凝血因子均為蛋白質(zhì)②除FIII（組織因子）外，其他凝血因子均存在于新鮮血漿中，F(xiàn)Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ在肝臟合成，需維生素K參與。③凝血因子以無活性酶原形式存在血液中，經(jīng)其他酶水解后暴露或形成活性中心，才有活性，這一過程稱凝血因子的激活。激活后，在該因子右下角標(biāo)上“a”④在凝血中起酶促作用的因子有FⅡ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ、XIII、前激肽釋放酶。⑤在凝血中被消耗的因子是Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、XIII；最不穩(wěn)定的是Ⅴ、Ⅷ

4、。a.凝血酶原激活物生成階段；b.凝血酶原的激活；c.纖維蛋白的生成（二）凝血的過程ⅩⅩaVa、Ca2+凝血酶原凝血酶纖維蛋白原纖維蛋白模塊1內(nèi)源性凝血系統(tǒng)的檢驗(yàn)內(nèi)源性凝血途徑定義：參與凝血的因子全部來自血液。表面激活：血液與帶負(fù)電荷的異物表面接觸而啟動(dòng)凝血的過程。凝血使動(dòng)因子為Ⅻ1、靜脈采血2、活化部分凝血活酶時(shí)間測定（APTT）【實(shí)驗(yàn)原理】在抗凝血中，加入足夠量的活化接觸因子激活劑（如白陶土）和部分凝血活酶（代替血小板的磷脂），再加入適量的鈣離子即可滿足內(nèi)源凝血的全部條件。從加入鈣離子到血漿凝固

5、所需的時(shí)間即稱為活化部分凝血活酶時(shí)間（activatedpartialthromboplastintime,APTT）。APTT的長短反映了血漿中內(nèi)源凝血系統(tǒng)凝血因子（Ⅻ、Ⅺ、Ⅸ、Ⅷ）、共同途徑中凝血酶原、纖維蛋白原和因子Ⅴ、Ⅹ的水平。本試驗(yàn)是目前最常用的檢查內(nèi)源凝血系統(tǒng)敏感的篩選試驗(yàn)。【試劑】1．受檢血漿以0.109mol/L枸櫞酸鈉溶液1:9抗凝，3000r/min，離心5～10min，獲貧血小板血漿。2．4%白陶土-腦磷脂懸液（同ACT）。3．0.025mol/L氯化鈣溶液?！静僮鞣椒ā?．受

6、檢血漿、白陶土-腦磷脂懸液各0.1ml，混勻，37οC水浴3min，其間輕輕振搖數(shù)次。2．加入0.025mol/L氯化鈣溶液0.1ml，立即啟動(dòng)秒表，不停振搖并觀察出現(xiàn)纖維蛋白絲的時(shí)間。重復(fù)2次，取平均值，同時(shí)作正常對照?！緟⒖贾怠磕行裕?7±3.3(31.5～43.5)s。女性：37.5±2.8(32～43)s。受檢者的測定值較正常對照延長超過10s以上才有病理意義?！举|(zhì)量控制】1．抗凝劑與血液的比例要準(zhǔn)確。2．標(biāo)本放置不宜超過3h，溫育時(shí)間不宜少于3min。3．分離血漿時(shí)，離心速度和時(shí)間要夠，務(wù)

7、必除去血小板，特別是用于肝素治療監(jiān)測時(shí)。4．若正常對照延長，應(yīng)重新配制試劑。5．APTT測定因所用的激活劑不同，以及部分凝血活酶來源及制備的不同，均可影響測定結(jié)果。6．用自動(dòng)血液凝固儀測定APTT，可提高檢測速度和結(jié)果精確性，但儀器本身也會(huì)產(chǎn)生一定誤差，1995年國際血栓與止血委員會(huì)（InternationalCommitteeofThrombosisandHaemostasis,ICTH）和ICSH已開始合作研究應(yīng)用APTT監(jiān)測肝素治療時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)化問題?！九R床意義】基本與凝血時(shí)間意義相同，但敏感性高

8、。目前所用的大多數(shù)APTT測定方法，凡當(dāng)血漿凝血因子低于正常水平的15%～30%即可異常。1．APTT延長（超過正常對照10s以上）主要用于發(fā)現(xiàn)輕型的血友病。雖可檢出因子Ⅷ：C水平低于25%甲型血友病，但對亞臨床血友?。ㄒ蜃英笥?5%）和血友病攜帶者敏感性欠佳。結(jié)果延長也見于因子Ⅸ（血友病乙）、Ⅺ和Ⅻ缺乏癥；血中抗凝物如凝血因子抑制物或肝素水平增高時(shí)；當(dāng)凝血酶原、纖維蛋白原及因子Ⅴ、Ⅹ缺乏時(shí)也可延長，但敏感性略差；其他尚有肝病、DIC、大量輸入庫存血等。2.APTT