氣相色譜定性和色譜柱效的測(cè)定

《氣相色譜定性和色譜柱效的測(cè)定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫(kù)。

1、實(shí)驗(yàn)五氣相色譜定性和色譜柱效的測(cè)定主講教師崔慶新一、目的要求了解氣相色譜儀的基本結(jié)構(gòu)，熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD）工作原理及操作技術(shù)；學(xué)會(huì)測(cè)定組分的保留時(shí)間、保留體積；計(jì)算相對(duì)保留值、色譜柱的理論塔板數(shù)、有效理論塔板數(shù)及相鄰組分的分離度。二、實(shí)驗(yàn)原理色譜法概述色譜法—混合物最有效的分離、分析方法。俄國(guó)植物學(xué)家茨維特在1906年使用的裝置：色譜原型裝置，如圖。色譜法是一種分離技術(shù)試樣混合物的分離過(guò)程—試樣中各組分兩相間不斷進(jìn)行的分配過(guò)程。其中的一相固定不動(dòng)－固定相另一相是攜帶試樣混合物流過(guò)此固定相的流體（氣體或液體），－流動(dòng)相色譜法分類1、按兩相狀態(tài)分色譜法分類2、

2、按固定相的固定形式分類色譜法柱色譜紙色譜薄層色譜色譜法分類3、根據(jù)應(yīng)用領(lǐng)域不同分色譜制備色譜半制備色譜色譜分析氣相色譜流動(dòng)相為氣體的色譜。氣體流動(dòng)相又稱為載氣分離分析對(duì)象：氣體或易揮發(fā)熱穩(wěn)定性高的液體、固體常用檢測(cè)器：熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD)氫火焰離子化檢測(cè)器（FID)電子捕獲檢測(cè)器（ECD）火焰光度檢測(cè)器（FPD)色譜基本概念色譜圖被分析試樣從進(jìn)樣開(kāi)始經(jīng)色譜柱分離，到各組分全部流過(guò)檢測(cè)器在此期間所記錄下來(lái)的響應(yīng)信號(hào)隨時(shí)間而變化的曲線（分布的圖像），稱為試樣的色譜流出曲線或色譜。色譜基本概念flash相對(duì)保留值r21組分2與組分1調(diào)整保留值之比：r21=t′R2

3、/t′R1=V′R2/V′R1理論塔板數(shù)：有效理論塔板數(shù)：分離度R相鄰兩組分的分離度R，等于這兩個(gè)組分保留時(shí)間之差與它們的峰寬之和一半的比值。R=0.8：兩峰的分離程度可達(dá)89%；R=1：分離程度98%；R=1.5：達(dá)99.7%（相鄰兩峰完全分離的標(biāo)準(zhǔn)）。熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD）結(jié)構(gòu)及工作原理熱導(dǎo)池?zé)崦粼ㄦu絲）惠斯登電橋線路利用被測(cè)組分氣體與載氣的熱導(dǎo)系數(shù)不同的原理實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。氣相色譜流程保留值定性加入已知純物質(zhì)增加峰高法色譜定性的依據(jù)在一定色譜條件下每一種物質(zhì)都有一個(gè)確定的保留值和它相對(duì)應(yīng)三、實(shí)驗(yàn)條件SP-6800A型氣相色譜儀，熱導(dǎo)池檢測(cè)器（TCD）;不銹

4、鋼填充柱：1米長(zhǎng)，內(nèi)徑3毫米，內(nèi)裝GDX-103(80～100目)；1微升微量進(jìn)樣器，氫氣（鋼瓶或氫氣發(fā)生器），皂膜流量計(jì)。試劑：純凈水，無(wú)水乙醇，乙酸乙酯，混合試樣。儀器條件：載氣（H2）輸入壓力0.25MPa柱前壓0.06MPa汽化室（INJ）溫度150℃，檢測(cè)室（AUX）溫度150℃，色譜柱室（OVEN）溫度150℃，橋電流150mA,衰減001。四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）開(kāi)機(jī)TCD基本結(jié)構(gòu)及操作演示1．通載氣（H2）至需要壓力，檢查各連接部分不得漏氣，旋下熱導(dǎo)放空螺帽。2．檢查氣路暢通后，開(kāi)主機(jī)電源，按要求設(shè)置各部溫度，核對(duì)無(wú)誤后點(diǎn)“加熱”，通過(guò)點(diǎn)“顯示”觀察

5、各部升溫情況。3．打開(kāi)電腦，點(diǎn)鼠標(biāo)左鍵雙擊“在線工作站”圖標(biāo)進(jìn)入色譜數(shù)據(jù)工作站，準(zhǔn)確進(jìn)入相應(yīng)“通道”。點(diǎn)“數(shù)據(jù)采集”，“查看基線”，“零點(diǎn)校正”，初設(shè)“電壓范圍”為-1～20mV,“時(shí)間范圍”為0～10min。4．待各部分溫度接近設(shè)定值，設(shè)橋電流150mA，同時(shí)點(diǎn)“橋流”和“衰減”。5．待基線基本平直，準(zhǔn)備進(jìn)樣。（二）進(jìn)樣分析1．先用微量進(jìn)樣器取空氣0.6～0.8uL,練習(xí)進(jìn)樣操作，并記錄空氣峰保留時(shí)間。2．先后分別取水、乙醇、乙酸乙酯0.1uL同時(shí)取空氣0.5～0.6uL注入儀器，同時(shí)啟動(dòng)“數(shù)據(jù)采集”，待所有組分全部流出并基線平直，“停止采集”，記錄空氣峰和

6、標(biāo)樣峰的保留時(shí)間。每樣取三組可用數(shù)據(jù)，取平均值。3．取試樣0.2uL加空氣0.6uL左右，注入色譜儀，待各組分全流出并基線平直，“停止采集”，保存數(shù)據(jù)文件，記錄各組分峰的保留時(shí)間。取三組可用數(shù)據(jù)，取平均值。4．從電腦桌面打開(kāi)“離線工作站”，編輯并打印分析報(bào)告。（三）測(cè)定載氣流速查看載氣流路中轉(zhuǎn)子流量計(jì)的轉(zhuǎn)子高度，通過(guò)轉(zhuǎn)子高度-流量曲線圖查的載氣流速。（四）關(guān)機(jī)實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將“橋流”設(shè)置為“000”，點(diǎn)擊“停止”便停止加熱，點(diǎn)“顯示”觀察柱溫（OVE）至接近室溫（30℃左右），旋上“熱導(dǎo)放空”密封螺帽，關(guān)掉主機(jī)電源開(kāi)關(guān)，停止供氣。退出電腦系統(tǒng)。1．各標(biāo)樣標(biāo)準(zhǔn)保留時(shí)

7、間。2．試樣中各組分定性結(jié)果及定性依據(jù)。3．乙醇對(duì)水的相對(duì)保留值。4．測(cè)量乙醇和乙酸乙酯的半峰寬，分別計(jì)算其理論塔板數(shù)和有效理論塔板數(shù)，并進(jìn)行比較。計(jì)算水-乙醇的分離度。五、結(jié)果報(bào)告與數(shù)據(jù)處理六、思考題1、色譜定性的依據(jù)是什么？主要方法有哪些？2、保留值受哪些因素的影響？如何正確測(cè)定保留值。柱色譜及色譜柱