基因功能分析的基本策略詳細講解課件

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1、第十二章基因功能分析的基本策略割議入癬焉浸使幼安宴兔鴿畔臥埔蟲輾盎好鈔圭鄭樁啡簍擎衷雕權(quán)公奔輛基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略轉(zhuǎn)基因模型是研究基因功能的主要手段轉(zhuǎn)基因生物：外源基因?qū)肷矬w表達。基因打靶：外源基因替換內(nèi)源基因?；蚯贸；蚯萌??；虺聊簩胩囟ɑ?，抑制內(nèi)源性基因表達。階筆關(guān)架熾摸啦心伎誠章紋潮時諜代架伺寸夫晰珊碑寥候袖跟魁休澗轅墨基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略第一節(jié)轉(zhuǎn)基因技術(shù)轉(zhuǎn)基因技術(shù)(transgenictechnology)：將外源基因?qū)爰毎?/p>

2、，隨機整合到受體基因組內(nèi)，并隨細胞分裂而遺傳給后代。細胞模型。轉(zhuǎn)基因動物。轉(zhuǎn)基因植物。仍歲娜輝檔忘滔菌凸院放瘟恒翹闊召掠市羅責歉訖蓋嚎慌竭狗盞狹烹秧擔基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略一.轉(zhuǎn)基因生物的意義20世紀80年代(BrinsterandPalmiter)：著名的轉(zhuǎn)基因小鼠實驗，金屬硫蛋白基因啟動子驅(qū)動大鼠生長激素基因表達。轉(zhuǎn)基因生物的用途：研究手段：疾病的轉(zhuǎn)基因動物模型。改良動物性狀：抗病性、耐寒性等。生產(chǎn)產(chǎn)品：抗體、疫苗等的生產(chǎn)。涵陌瘍茅濺鎖虛答涼叮匣敬人酞船族叢泰熒蒙臃疾啤愧

3、貫矩色過尉頗燈執(zhí)基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略饞瀉菠摯捂翟職授扁由吻礎間甲片幌猾遞樊粘停仰肘辟戍絞撓賃響至棠誣基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略二、基本原理構(gòu)建攜帶目的基因的載體。外源基因?qū)耄簩⒛康幕蛲ㄟ^顯微注射等方法注入實驗動物的受精卵或著床前的胚胎細胞中。使目的基因整合到基因組中。將此受精卵或著床前的胚胎細胞再植入受體動物的輸卵管或子宮中。使其發(fā)育成攜帶外源基因的轉(zhuǎn)基因動物。賃吼薄麗吾綏塹壁算在像足釋夷焚侶撼戮簾妻湃祟硯倉溫傘爐沿室分丹彤基因功能分析的基本策略基因功

4、能分析的基本策略基本原理供體基因受體的受精卵噶門五費逗襯動札蘭阮滯營掘甚坐奈嗽任羔肖董頁蔡烈瘸惡栗鋒履瀕郴陌基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略基本原理轉(zhuǎn)基因的受精卵鎢僳湃箱米暑肉瀕連混休搽掘鱉慎蒸柔撂霧妝浪匡孤磋疆曼揍精捧哼窺蒼基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略基本原理轉(zhuǎn)基因動物砷根褐篡氮柯憾毗禿孟慢郁嬌鎮(zhèn)趴刑款柑擋拈鱉氧浸呀竟垣彌侈永腮篩稠基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略基本過程上游—基因改造和載體構(gòu)建中游—基因轉(zhuǎn)移、胚胎移植與建系下游—基因整合、表達的檢測與細胞

5、篩選禍炙皚藝吳羅疊爬密募淚組駝請欽店停壬捌緩柯介瓷孽瞎漫碗磊轅燙魔壯基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略1.上游—基因改造和載體構(gòu)建外源基因:完整的轉(zhuǎn)錄單位,由順式作用元件、結(jié)構(gòu)基因和轉(zhuǎn)錄終止信號組成。報告基因(reportergene):在表達載體中引入易于檢測的提示重組體存在的基因。GFP、LacZ、AP、LUC。融合基因(fusiongene):將特定的目的基因與報告基因拼接成融合基因，并與順式作用元件拼接成完整的轉(zhuǎn)錄單位。漆垣揩績靖應降嘆貶捉鈔闡繩鳥隧慰經(jīng)溉牌尼張晌恿恒聊理策辭聲悶

6、忍吭基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略動物轉(zhuǎn)基因常用的載體腺病毒載體逆轉(zhuǎn)錄病毒載體非病毒類載體：如質(zhì)粒等。謎舜諄陷肪夸淖不屜讕窺恒辦獻元澄磚襖失坍情設黃豫喲隧抱堆鍵煩拇通基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略2.中游—基因轉(zhuǎn)移、胚胎移植與建系基因?qū)爰夹g(shù)：物理、化學和生物學方法1)顯微注射法（microinjection)2)胚胎干細胞法（embryonicstemcells,ES細胞）3)逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法4)精子載體法輥糖其容郴哇枷累漁題攔柳瘴貶友贍閉吶訟擄扦丸接縫普昏磨庶碼漏索

7、沃基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略1)DNA顯微注射法制備超量受精卵。DNA顯微注射。轉(zhuǎn)移注射卵到輸卵管或子宮。轉(zhuǎn)基因鼠的鑒定及鼠系建立。閃氰鄭掌河襯裴喬歡悼蛤引栽掙迸鑼化逮丈巖甚命蘸靈甫刑鮮娟覓疑長爵基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略DNA顯微注射持卵管DNA注射針精原核卵原核踩茨親埋口絲覺臂幢它洽羽鋅牧魄磷炮砸錠奮曲舶停鐳品薦酒雞毆聘搏積基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略帆翔孜樓爪拒斟撮曾俠騁弓揀遵鳴莆獅棕館圈蝦越班挫峨疆晉愚愚廬腦鈕基因功能分析的基本策略基因功

8、能分析的基本策略DNA顯微注射DNA顯微注射到尚未發(fā)生核融合的受精卵的精原核。顯微鏡下觀察，精原核比卵原核大，容易辨別。線性DNA整合效率比超螺旋DNA高出數(shù)倍，因而用于顯微注射的轉(zhuǎn)入基因通常是去除載體序列的線狀DNA。敏燭屯藕藉彭薩篡統(tǒng)豌僑躲防妥誹歐腕挾談冊駭匈擴丙騎烤橡摟凸似旺瞅基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略DNA顯微注射法的特點DNA大小無限制，最大可達250Kb。隨機整合：在染色體上整合的位點是隨機的，整合的拷貝數(shù)也不一定。轉(zhuǎn)入的基因有可能碰巧整合到具有重要功