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《抗肺癌合劑對lewis肺癌的抑制作用及vegf表達(dá)的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、抗肺癌合劑對Lewis肺癌的抑制作用及VEGF表達(dá)的影響林潔（山東臨沂羅莊中心醫(yī)院山東臨沂276017）【中圖分類號】R734.2【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1672-5085（2012）8-0044-02【摘要】目的研究抗肺癌合劑對Lewis肺癌的抑瘤作用及對腫瘤組織VEGF表達(dá)的影響。方法將接種成功后Lewis肺癌細(xì)胞的小鼠隨機(jī)分為模型組、抗肺癌合劑低、中、高劑量組、環(huán)磷酰胺組。處死后，測量瘤重、計算抑瘤率及腫瘤組織中血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)。結(jié)果抗肺癌合劑高劑量組和中劑量組與模型組有顯著性差異（P<0.05）;高劑量組和中劑量組與模型組有顯著性差異（
2、P<0.05）。結(jié)論抗肺癌合劑能降低Lewis肺癌小鼠腫瘤組織VEGF表達(dá)，抑制Lewis肺癌小鼠腫瘤生長。【關(guān)鍵詞】抗肺癌合劑肺癌抑瘤率血管內(nèi)皮生長因子肺癌是當(dāng)前世界各地最常見的惡性腫瘤之一，居各種惡性腫瘤的首位。有效治療肺癌，降低死亡率，減少病人痛苦，提高患者的生存質(zhì)量是醫(yī)學(xué)界急需解決的重要課題之一。中醫(yī)藥治療腫瘤是我國的特色和優(yōu)勢，抗肺癌合劑是中醫(yī)藥治療肺癌的特色復(fù)方。為進(jìn)一步探討其對肺癌的抑制作用和作用機(jī)制，木文通過實驗研究從實驗動物和分子角度進(jìn)行探討。1材料與方法1.1實驗動物SPF級C57BL/6近交系小鼠50只，雌雄各半，體重（18.64
3、±1.92）g,由山東省實驗動物中心提供；Lewis肺癌瘤源小鼠由中國中醫(yī)研宄院實驗動物中心提供。1.2藥品與儀器抗肺癌合劑（中藥制劑）水提取液，分為高劑量組（含生藥3g/mL）,中劑量組（含生藥1.5g/mL）、低劑量組（含生藥0.75g/mL）；配制濃度為2mg/ml的注射用環(huán)磷酰胺（CTX）。小鼠抗鼠血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）單克隆抗體、PowerVisionTMTwoStep免疫組化檢測試劑盒、ZLI-9O32濃縮型DAB試劑盒（北京中杉公司）。切片機(jī)；電子天平；LeicaQwinStd自動圖象分析系統(tǒng)；顯微鏡。1.3方法1.3.1動
4、物模型制作及分組參照文獻(xiàn)方法造模［1】，取接種Lewis肺癌細(xì)胞10d的瘤源小鼠3只，脫頸椎處死，取新鮮腫瘤組織剪碎，置于勻漿器中研磨，經(jīng)胰蛋白酶消化5min后并以過2000濾膜濾，置于冰上，稀釋成13的瘤竿細(xì)胞懸液。吸取細(xì)胞懸液約20μl置于無菌試管內(nèi)，稀釋100倍后加0.2%臺盼蘭染色，吸取少許置于細(xì)胞計數(shù)板上在顯微鏡下計算活細(xì)胞數(shù)。調(diào)整細(xì)胞懸液濃度為l×107個瘤細(xì)胞/ml。50只C57BL/6小鼠右腋皮下各接種瘤細(xì)胞懸液0.2ml。接種24h后，將小鼠隨機(jī)分成5組，每組10只：模型組、抗肺癌合劑高劑量組、抗肺癌合劑中劑量組、抗肺癌合
5、劑低劑量組、環(huán)磷酰胺組。1.3.2給藥方法次曰給藥，抗肺癌合劑高、中、低劑量組給藥劑量為每天分別予相當(dāng)于生藥120g/kg、60g/kg和30g/kg的抗肺癌合劑灌胃給藥；模型組每天以生理鹽水灌胃，劑量為0.4ml/10g；CTX組每周3次注射CTX,給藥劑量為20mg/kg/天［2］。給藥吋間：均連續(xù)給藥14d。1.3.3抑瘤效應(yīng)的測定第15天各組小鼠處死后，剝?nèi)∫浦擦鰤K，于分析天平稱重。抑瘤率=（1一實驗組瘤重/模型組瘤重）×100%。1.3.4VEGF水平測定用中性甲醛固定腫瘤組織，制作病理切片，按照免疫組化檢測試劑盒方法進(jìn)行兩步法染色。對
6、免疫組化染色切片細(xì)胞漿表達(dá)的VEGF進(jìn)行定量分析，按其染色強(qiáng)度進(jìn)行光密度測定。積分光密度=平均光密度×陽性面積。1.3.5統(tǒng)計學(xué)方法用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析處理，實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)&plUSmn;標(biāo)準(zhǔn)差（x-±s）表示，組間比較用方差分析。2結(jié)果各組小鼠瘤重、抑瘤率、VEGF水平比較見表1。與模型組比較，抗肺癌合劑高劑量組、中劑量組及CTX組腫瘤明顯縮小?？狗伟┖蟿└邉┝拷M抑瘤平均瘤重與模型組間奮顯著差異(P<0.01),VEGF表達(dá)顯著降低(P<0.05),中劑量組平均瘤重、VEGF表達(dá)與模型組間有顯著性差異(P&l
7、t;0.05);低劑量組平均瘤重、VEGF表達(dá)與模型組無顯著性差異(P>0.05)。表1各組小鼠平均瘤重、抑瘤率、VEGF水平比較(x-±s,n=10)注:與模型組相比，△P<0.01，*P<0.05o3討論國外治療肺癌普遍采用四種手段：手術(shù)治療、放射治療、化學(xué)藥物治療以及免疫治療，但對于機(jī)體或多或少造成損害。而中醫(yī)藥既重視機(jī)體整體狀況,又著眼于腫瘤局部表現(xiàn)，能扶正抗癌，又能防復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移，是治療肺癌的新突破。本研究采用的抗肺癌合劑，方中既以清熱解毒治其實，又以益氣養(yǎng)陰治其虛，輔以健脾和胃之功，祛邪而不傷正，標(biāo)本兼顧，體現(xiàn)中醫(yī)辨證
8、論治的原則。研究表明，抗肺癌合劑能抑制腫瘤生長與轉(zhuǎn)移
