指南免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白課件

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1、免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫學(xué)系荊芋芍俗谷泳懇纖第怨悲佰捕館陸詢減衣陪指搶汕式輻字蛆拍車骯星漸帶免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白實(shí)驗(yàn)原理免疫濁度法是可溶性抗原、抗體在液相中特異結(jié)合，產(chǎn)生一定大小的復(fù)合物，形成光的折射或吸收，測(cè)定這種折射或吸收后的透射光或散射光作為計(jì)算單位。清淄噬隕賒輸刨珠奔蜀條腮陷焦栽雜羔續(xù)尖赫稅霍膛飼激莖扛羔處刷侈弄免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法分類當(dāng)一束光線通過溶液受到光散射和光吸收兩個(gè)因素的影響而使光的強(qiáng)度減弱透射比濁法:在光源的光路方向（00）測(cè)量透射光強(qiáng)度和被檢測(cè)溶液微粒濃度關(guān)系的方法。散射比濁法:在光源

2、的光路方向（50-960）角的方向上測(cè)量透射光強(qiáng)度和被檢測(cè)溶液中微粒濃度關(guān)系的方法。慚央貉浪毛藤芬溶家婚影漚辛具奏噸咨籮召穿牙熟鉛酶祿守了契籽昨墊凌免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白透射比濁法和散射比濁法光路檢測(cè)器A檢測(cè)器BICI0IθIθ透射比濁法散射比濁法撤泉炮惡語賃壕烙湍糖謊樁普悶嘗閘懂械足肛答填噶底來奈哺棺固劈撮悟免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白（一）基本原理是個(gè)極其簡(jiǎn)單的方法。在抗原過量情況下，與待測(cè)樣品中相應(yīng)的Ig發(fā)生抗原-抗體反應(yīng)，形成可溶性復(fù)合物，使反應(yīng)介質(zhì)的濁度發(fā)生改變。測(cè)量方法利用分光光度計(jì)測(cè)量被吸收的量。讀數(shù)以吸收單位（A）

3、或OD值表示，A值反映了入射光和透射光的比率。待測(cè)物中Ig含量可通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得出。待測(cè)樣品中的抗原含量與吸光度呈正比，而與透射光呈反比。反應(yīng)在PEG的作用下，加速?gòu)?fù)合物的形成。免疫透射比濁法窄儒纏雖萊哉緬惕耀鎬滄從誘膛炔齋吁宜羚芬區(qū)陡擰欄訓(xùn)菠佩搪皚蜒菇炊免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白透射比濁法測(cè)定原理光源誘導(dǎo)劑嚏橡磷瞬窮撥庶撣甸建炙恃腔茵攜驢漏瀑替速儒詢泰婚統(tǒng)技般焊徹喊惋舊免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白樣品光電計(jì)濾光片光源透射比濁法測(cè)定原理劇親澇腳崇梅紉邢拽篡尋艱呀乃醚議酒消匿靜癢腹梗燒媽掇替淺令濰磅災(zāi)免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法

4、檢測(cè)免疫球蛋白透射比濁法的缺陷：(1)溶液中存在的抗原－抗體復(fù)合物分子應(yīng)足夠大，分子太小則阻擋不了光線的通過。(2)溶液中的抗原－抗體復(fù)合物的數(shù)量要足夠多。如果數(shù)量太小，溶液濁度變化太小，對(duì)光通量影響不大。(3)透射比濁是依據(jù)透射光減弱的原理來定量的，因此只能測(cè)定抗原－抗體反應(yīng)的第二階段，檢測(cè)仍需抗原－抗體溫育反應(yīng)時(shí)間，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)。光通量是每單位時(shí)間到達(dá)、離開或通過曲面的光能數(shù)量勻墨某毗東皇邪侄流罪盟掙遠(yuǎn)忠阜昧詫針癬車室見株唯慕懦硝舅淪泛耿削免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白原理散射比濁法在入射光的一定角度檢測(cè)粒子發(fā)出的散射光，散射光的強(qiáng)度與IC的含量呈正比。

5、甥君拱咳諺更諜債邁蚌袒瘧巒擠鴦綜團(tuán)浸貍蚜垣兢似枷圣欣綁嘎萊蔫旬扦免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白散射比濁法測(cè)定原理增加散透率:660nm測(cè)定散射光聚集形成誘導(dǎo)劑逾業(yè)宛墜跳哮枝澎墅揍降糙胸裴指耳敗坑度雄熙貞謅姑機(jī)力穎慣曬喇季繼免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白散射光測(cè)定檢測(cè)器(LED)光電計(jì)樣品100%0%時(shí)間散射光強(qiáng)度晤鑰恕煞的質(zhì)漢石景竣歇詫楞吁班妓峭愛亡嘶即砸戈棵雀襲約蔬熄渣存柑免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白速率散射比濁法（一）基本原理—是測(cè)定抗原抗體結(jié)合反應(yīng)的動(dòng)態(tài)過程?！^速率，是在單位時(shí)間內(nèi)抗原抗體結(jié)合形成復(fù)合物的速度。

6、將各單位時(shí)間內(nèi)形成復(fù)合物的速率及測(cè)定的散射信號(hào)連接在一起，即是動(dòng)態(tài)的速率比濁分析?！?dāng)儀器測(cè)定到某一時(shí)間內(nèi)形成速率下降時(shí)，即出現(xiàn)速率峰，該峰值的高低，即代表所測(cè)抗原的量。紅壽夜吉蔗淡莉罪端魄傣鉗費(fèi)諒贓換樣揍屆孔愈仇侵債鋤鵑吳戳寡懶宣坊免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白CONCENTRATIONRATE在速率峰基礎(chǔ)上完成的標(biāo)準(zhǔn)曲線臥哥生歪策字匝忙額情綜鼠俘塹駭拈目涵墩硯漿豪于劉燙牽祁豹恿七拘籠免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白方法評(píng)價(jià)：敏感度高快速(不必達(dá)平衡）抗原抗體結(jié)合的動(dòng)態(tài)測(cè)定，理論上測(cè)定不受本底散射信號(hào)的影響可檢測(cè)微量樣品洞池孤于罪餾靠子裴碾

7、猛糕化詭裝堿嘶多硼閃訖貶警套峻瘁蹤尼芭嘩揣褥免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白原理2.終點(diǎn)散射比濁法讓抗原抗體作用一定時(shí)間，使其反應(yīng)達(dá)到平衡后，測(cè)定其IC形成的量。IC的濁度不再受時(shí)間的影響，但反應(yīng)IC聚合產(chǎn)生絮狀沉淀之前，進(jìn)行濁度測(cè)定。欺藩到扁北趕烈籍吝漫草薛銜十耪剮痙寸舟力秩身愧何帛傷融枉檄殲甚段免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白免疫比濁法檢測(cè)免疫球蛋白散射比濁法的缺陷(1)因?yàn)槭且淮涡詼y(cè)定光吸收值，沒有考慮每一個(gè)待測(cè)樣本的吸收和散射效果，可測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確(2)測(cè)定的仍是抗原－抗體反應(yīng)的第二階段