土壤速效磷含量測定

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1、實訓十土壤速效磷含量的測定（0.5mol/LNaHCO3浸提-鉬銻抗比色法）一、目的要求土壤速效磷也稱土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是判斷土壤供磷能力的一項重要指標。測定土壤速效磷的含量，可為合理分配和施用磷肥提供理論依據(jù)。實驗要求了解測定土壤速效磷的基本原理，掌握其測定方法。二、方法原理用pH8.5的0.5mol/L的NaHCO3作浸提劑處理土壤，由于碳酸根的存在抑制了土壤中的碳酸鈣的溶解，降低了溶液中Ca2+濃度，鄉(xiāng)音的提高了磷酸鈣的溶解度。由于浸提劑的pH較高，抑制了Fe3+和Al3+的活性，有利于磷酸鐵和磷酸鋁的提取。此外，溶

2、液中存在著OH-、HCO3-、CO32-等陰離子，也有利于吸附態(tài)磷的置換。用NaHCO3作浸提劑提取的有效磷與作物吸收磷有良好的相關性，其適應范圍也廣泛。浸出液中的磷，在一定的酸度下，用硫酸鉬銻抗還原顯色成磷鉬藍，藍色的深淺在一定濃度范圍內與磷的含量成正比，因此，可以用比色法測定其含量。三、主要儀器震蕩機、分光光度計或光電比色計、天平（0.01g）、三角瓶（250ml）、容量瓶（50ml）、漏斗、無磷濾紙、移液管（10ml）。四、試劑配制1.0.5mol/L的NaHCO3（pH8.5）浸提液稱取化學純NaHCO342.0g溶于800ml蒸餾水中，以

3、4mol/LNaOH溶液調節(jié)pH至8.5（用pH計測定），然后稀釋至1000ml，保存在試劑瓶中。如果貯存期超過1個月，是用時應重新調整pH。2.無磷活性炭將會活性炭先用1：1（V/V）的鹽酸浸泡過夜，在布氏漏斗上抽濾，用蒸餾水沖洗多次至無Cl-為止，在用0.5mol/LNaHCO3溶液浸泡過夜，在布氏漏斗上抽濾，用蒸餾水洗盡NaHCO3，檢查至無磷為止，烘干備用。3.7.5mol/L硫酸鉬銻抗貯存液在1000ml燒杯中加入400ml蒸餾水，蔣燒杯浸在冷水中，然后緩慢注入208.3ml濃硫酸（分析純），并不斷攪拌，冷卻至室溫。另稱取分析純鉬酸銨20

4、g溶于60℃的150ml蒸餾水中，冷卻。再將硫酸溶液慢慢倒入鉬酸銨溶液中，不斷攪拌，最后加入1000ml0.5%酒石酸銻鉀溶液，用蒸餾水稀釋至1000ml，搖勻，貯存于棕色試劑瓶中，避光保存。4.鉬銻抗混合顯色劑稱取1.50g抗壞血酸（左旋，旋光度+12～+22，分析純）溶于100ml鉬銻抗貯存液中，混勻。此試劑有效期為24h，宜用前配制，隨配隨用。5.磷標準液準確稱取在105℃烘箱中烘干2h的分析純KH2PO40.2195g，溶于400ml蒸餾水中。加濃硫酸5ml，轉入1000ml容量瓶中，加蒸餾水定容至刻度，搖勻，此溶液為50mg/L磷標準液，

5、此溶液不易久貯。6.磷標準曲線繪制分別吸取50mg/L磷標準液0、1、2、3、4、5（ml）于50ml容量瓶中，各加入0.5mol/L的NaHCO3浸提液1ml和鉬銻抗顯色劑5ml，除盡氣泡后定容，充分搖勻，即為0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L的磷的系列標準液。30min后與待測液同時進行比色，讀取吸光度值。再方格坐標紙上以吸光度值為縱坐標，磷mol/L為橫坐標便繪制成磷標準曲線。五、操作步驟1.待測液的制備稱取通過1mm篩孔的風干土樣5.00g置于250ml三角瓶中，加入一小勺無磷活性炭和0.5mol/L的NaHCO3浸提液1

6、00ml，塞緊瓶塞，在震蕩機上震蕩30min，取出后立即用干燥漏斗和無磷濾紙過濾，濾液用另一只三角瓶盛接。同時作空白試驗。2.測定吸取濾液10ml（對含P2O51%以下的樣品吸取10ml，含磷高的可改為5ml或2ml，但必須用0.5mol/L的NaHCO3補足至10ml），于50ml容量瓶中，加鉬銻抗混合顯色劑5ml，小心搖動。30min后，在721或722型分光光度計上用波長660nm（光電比色計用紅色濾光片）比色，以空白液的吸收值為0，讀出待測的吸光度值。六、結果計算土壤速效磷（mg/L）=式中：待測液mg/L——從標準曲線上查得待測液濃度；待

7、測液體積——50ml；分取倍數(shù)——浸提液總體積（ml）為吸取浸出液體積（ml）的倍數(shù)（100/10）；烘干土重——風干土重乘以水分系數(shù)。七、注意事項（1）鉬銻抗混合顯色劑的加入量要準確。（2）加入混合顯色劑后，即產生大量的CO2氣體，由于容量瓶口小，CO2氣體不易逸出，在混勻的過程中易造成試液外溢，造成測定誤差，因此必須小心慢慢加入，同時充分搖動排出CO2，以避免CO2的存在影響比色結果。（3）活性炭一定要洗至無Cl-反應，否則不能使用。（4）此法溫度影響很大，一般測定應在20~25℃的溫度下進行。如室溫低于20℃，可將容量瓶放在30~40℃的熱水

8、中保溫20min，取出冷卻后進行比色。（5）0.5mol/L的NaHCO3測土壤有效磷分級可參考下列指示土壤速效磷的含量（