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《藥學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文 外文翻譯_8》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、本科畢業(yè)論文(設(shè)計)外文翻譯學(xué)院專業(yè)藥學(xué)姓名學(xué)號指導(dǎo)老師職稱合作老師職稱外文題目（原文）High-levelexpressionandpurificationofTat-haFGF19-154譯文：高表達(dá)和純化的Tat-haFGF19-154High-levelexpressionandpurificationofTat-haFGF19-154YadongHuang,YulanRao,ChengliFeng,YanmeiLi,XiaopingWu,ZhijianSu,JianXiao,YechenXiao,WenkeFeng,XiaokunLi摘要：人的酸性成纖維細(xì)胞生長因
2、子在各種組織損傷后能夠刺激修復(fù)和再生中央和周圍神經(jīng),然而，它不能穿過血腦屏障。為了生產(chǎn)具有細(xì)胞滲透性的治療性的酸性成纖維細(xì)胞生長因子，我們用Tat-PTD技術(shù)融合haFGF19-154基因。在這之后用PCR技術(shù)擴(kuò)增編碼序列，使pTathaFGF19-154-His在大腸桿菌BL21中得以表達(dá)。最佳表達(dá)的可溶性融合蛋白超過了總細(xì)胞蛋白的36.7%。Tat-haFGF19-154-His的重組體被具有Ni–NTA活性，葡聚糖凝膠G-25和肝素親和的色譜柱組合體純化95%。這數(shù)據(jù)用十二烷基硫酸鈉—聚丙烯酰胺酰胺凝膠電泳檢測得到，最終產(chǎn)率為171mg/l培養(yǎng)物。純化的Tat-haF
3、GF19-154-His具有在Balb/c3T3細(xì)胞中不同的有絲分裂促進(jìn)活性，用MTT法測量它的半數(shù)有效量為3.931×10?4μmol/l。Tat-haFGF19-154-His的蛋白以每劑量為10mg/kg靜脈注射在大腦皮層和海馬中檢測得到。關(guān)鍵詞：酸性成纖維細(xì)胞生長因子；Tat-PTD表達(dá)；純化；有絲分裂促進(jìn)活性前言人酸性成纖維細(xì)胞生長因子（haFGF）是一個有力的廣譜促細(xì)胞分裂劑。體外研究顯示酸性成纖維細(xì)胞生長因子能刺激細(xì)胞生長過程中對胚層和神經(jīng)外胚層來源（Gimenez-GallegoandCuevas1994）的影響?？咚沟仍?997年到1998年間發(fā)現(xiàn)，酸性
4、成纖維細(xì)胞生長因子具有內(nèi)分泌類的活動，可以作為一個血管擴(kuò)張，內(nèi)臟缺血的保護(hù)者，調(diào)節(jié)神經(jīng)。酸性成纖維細(xì)胞生長因子在神經(jīng)生長和發(fā)展中起著舉足輕重的作用。以往的研究表明，酸性成纖維細(xì)胞生長因子在海馬，紋狀體和下丘腦神經(jīng)細(xì)胞增殖的同時增強(qiáng)生存能力和刺激睫狀視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)以及刺激周邊神經(jīng)元。這是1988年立頓等人和1991維爾科克廝等人所證明的。haFGF能夠促進(jìn)神經(jīng)上皮細(xì)胞遷移和規(guī)范對腦神經(jīng)祖細(xì)胞的分化和促進(jìn)修復(fù)和再生有傷的中樞和外周神經(jīng)，之后還能營養(yǎng)作用神經(jīng)元。這是英杰和博恩在1992年及納曼在1996年所證明的。外源性的haFGF具有以衰減最初的毒物的可創(chuàng)性和持續(xù)時間來減輕海馬細(xì)
5、胞的消亡和神經(jīng)元細(xì)胞的消亡(Cuevasetal.1994;CuevasandGimenez-Gallego1996)。haFGF有效保護(hù)了由腦缺血所引起的損害海馬錐體細(xì)胞的CA1(Sasakietal.1992)。對神經(jīng)系統(tǒng)的這些作用表明在治療如毒物(JankowskyandPatterson2001)、帕金森氏病、腦缺血(Sasakietal.1992)以及大腦皮質(zhì)損傷(Figueiredoetal.1995)等多種疾病時存在一定的潛力(Dateetal.1990;Alexietal.,2000)。事實(shí)表明，上述疾病的動物模型試驗顯示haFGF有良好的治療效果。在跨越血
6、腦屏障（BBB）的治療性蛋白質(zhì)交付限制其規(guī)模和生物化學(xué)特性。具有154個氨基酸的haFGF蛋白質(zhì)，不能直接穿過血腦屏障從循環(huán)，但可以通過腦內(nèi)注射入腦室(Lietal.1998;Mufsonetal.1999)，滲透性開放的血腦屏障(Rapoport2000;Emerichetal.2001)或病毒載體(Federoffetal.1992).不過，腦內(nèi)注射可能會損害大腦組織，引起感染。開放是選擇性滲透，不可能允許進(jìn)入大腦的其他物質(zhì)進(jìn)入?；蛑委熡薪?jīng)驗的低效配置和較低的長期蛋白的表達(dá)。因此，aFGF對中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療在臨床方面還受到嚴(yán)重的限制。近年來，新的戰(zhàn)略已經(jīng)發(fā)展為加
7、強(qiáng)血腦屏障的通透性(Schwarzeetal.1999;Bayley1999;Dietzetal.2006;Yinetal.2006)。一種方法是融合靶蛋白和穿膜肽細(xì)胞(CPPs)，如Tat-PTD，控制觸角基因的蛋白，單一的皰疹病毒-1VP22,卡波西氏的成纖維生長因子信號序列(Bayley1999;Dietzetal.2002)。Tat-PTD，來自艾滋病毒反式轉(zhuǎn)錄激活（TAT）獲得的9或11個氨基酸片段，與各種蛋白質(zhì)進(jìn)行融合后運(yùn)送到大腦(ElliottandO’Hare1997)。到目前為止，幾個TAT融合蛋
