資源描述:
《乳酸測定SOP_LA臨床意義_檢驗科生化項目SOP》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、乳酸測定文件編號:版本號:頁碼:第頁共頁1檢測原理乳酸測試方法是對Marbach和Weil方法的改進1,該方法把乳酸鹽氧化生成丙酮酸鹽。兔子肌肉中的乳酸脫氫酶(LDH)能催化L-乳酸鹽的氧化,生成丙酮酸鹽,同時使煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)還原,NADH的吸光度變化率與乳酸鹽的濃度直接成正比。乳酸脫氫酶試劑盒L-乳酸鹽+NAD+丙酮酸鹽+NADH+H+肼被用于捕捉生成的丙酮酸鹽(是一種腙),從而驅(qū)使反應(yīng)完成。2標本采集與處理2.1采血方法靜脈采血2ml,氟化鈉抗凝。2.2標本保存空腹采血后立即冷卻,在15分鐘之內(nèi)分離血細胞,把樣本始終放在冰上并迅速分析。如果不
2、能立即完成測試,應(yīng)把樣本冷藏起來,但最久不得超過24小時,或冷凍起來,但最久不得超過1個月。2.3注意事項抽血應(yīng)在安靜狀態(tài),注意勿使局部血液瘀積,抽血時不用止血帶,也不要讓患者用力握拳。如用止血帶,則應(yīng)在靜脈穿刺后,除去止血帶2min后再抽血。重度溶血的樣本,由于在紅細胞中存在乳酸,會導(dǎo)致乳酸濃度偏高。不推薦使用肝素化血漿,在采血管中如果沒有抗糖分解劑,會得到偏高的測試結(jié)果。3試劑和設(shè)備3.1試劑采用西門子醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品(上海)有限公司提供的試劑盒。3.1.1試劑組成試劑船1~2孔為NAD,濃度為2.0uM,片劑;3~4孔為二腙硫酸鹽,濃度為3.7uM,液體;5~
3、6孔為LDH,濃度為40U,液體;7~8為三羥甲基氨基甲烷緩沖液,濃度為0.24mM,液體。3.1.2試劑準備直接使用。3.1.3試劑保存試劑2~8℃保存,有效期內(nèi)穩(wěn)定。3.2質(zhì)控品乳酸測定文件編號:版本號:頁碼:第頁共頁自制質(zhì)控品。3.3校準品西門子校準品。3.4儀器SIEMENSDIMENSIONXpandPlus/RxLMax全自動生化分析系統(tǒng)。4操作程序4.1檢測過程流程簽收樣品→離心→上機檢測→審核報告→簽發(fā)報告→標本保存。4.2樣品簽收嚴格按照標本接收程序簽收標本。4.3標本處理以2500~3000r/min,離心6~10min,分離血清上機測定。4
4、.4標本檢測4.4.1手工編排測試項目:樣品按編號裝入樣品架,主屏幕按F1:ENTERDATA,在Position處輸入樣品所在樣品架字母及所在位置號,按enter,在PatientName處選擇性輸入病人名字,按enter,在SampleNo處輸入樣品號,按enter,在Tests處使用檢驗鍵或檢驗組合鍵選擇相應(yīng)項目,根據(jù)需要選擇相應(yīng)的按鍵改變Mode(按F7:MEXTMODE選擇樣品管類型)、Priority(按F4:NEXTPRIORITY選擇樣品的處理模式)、Fluid(按F8:NEXTFLUID選擇標本類型)。4.4.2雙向條形碼標本分離血清后直接運行
5、儀器。4.4.3運行:輸入完畢后按F3:LOADLIST,確認樣品已經(jīng)裝載在樣本盤上,按Run鍵,儀器開始進行樣品檢測。4.4.4檢驗后標本保存標本檢驗完成后用采血管原蓋蓋緊,保存于標本冷藏庫內(nèi),按日期放好,保存期為7天。5校準程序5.1校準品準備和儲存每瓶加2.0ml蒸餾水復(fù)融,輕輕旋轉(zhuǎn)搖勻,室溫放置30min,即可使用。5.2校準條件在室內(nèi)質(zhì)控失控、更換試劑批號、更換儀器主要配件或進行大保養(yǎng)后均需校準。無特殊情況校準周期為3個月。5.3校準程序主屏幕按F5:PROCESSCTRL→F1:CALIBRATION,按enter→F2:SET-UP&RUN,按項目
6、鍵選擇所需要校準的項目名稱METHOD,選中相應(yīng)試劑批號LOT,輸入操作者姓名Operator、校準液貨號Calibrator乳酸測定文件編號:版本號:頁碼:第頁共頁Product和批號Lot,以及最低值校準液在樣品架上的位置StartatPosition,最后把校準液各個水平的值按照由低到高的順序輸?shù)綄?yīng)位置,按F4:ASSIGNCUPS指定樣品杯,校準液按順序排列在樣品架上,按F7:LOAD/RUN→F4:RUN或“RUN”運行鍵運行校準程序。6質(zhì)量控制程序6.1質(zhì)控品準備和儲存質(zhì)控品-30℃可保存1年,未開啟-20℃可保存30d,取出融化至室溫后可直接使用
7、。6.2質(zhì)控水平和分析批長度每24小至少進行一批,每批2個濃度水平。6.3質(zhì)控操作程序與4.4標本檢測步驟相同,只需要按F4:NEXTPRIORITY將ROUTINE修改成QC狀態(tài)。7性能參數(shù)本法線性范圍為0.3~15mmol/L,對于超過測定線性范圍的結(jié)果,用凈化水對標本進行稀釋,輸入稀釋因子后再重新檢測。8生物參考區(qū)間靜脈血漿:0.4~2.0mmol/L腦脊液:0.6~2.2mmol/L9臨床意義組織嚴重缺氧可導(dǎo)致三羧酸循環(huán)中丙酮酸需氧氧化的障礙,丙酮酸還原成乳酸的酵解作用增強,血中乳酸與丙酮酸比值增高及乳酸增加,甚至高達25mmol/L。這種極值的出現(xiàn)的出
8、現(xiàn)標志著細胞氧化過程的惡