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《海藻糖衍生物dmbt抗腫瘤侵襲轉移作用的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、山東人學壩Ij學位論義海藻糖衍生物DMBT抗腫瘤侵襲轉移作用的研究碩士研究生：唐琳琳碩士生導師：韓秀珍中文摘要腫瘤侵襲與轉移是惡性腫瘤最基本的生物學特征，也是臨床腫瘤患者(90％以上)死亡的最主要原因。目前臨床缺乏有效抗腫瘤侵襲和轉移的藥物，研制抗侵襲轉移藥物已經成為腫瘤化療亟待解決的問題。腫瘤侵襲轉移涉及的步驟主要有：腫瘤細胞在原發(fā)灶增殖及血管生成，細胞問粘附性改變而從原發(fā)部位脫落，分泌的蛋白水解酶和膠原酶降解細胞外基質(extracellularmarx，ECM)和基底膜，侵入血管或淋巴管，遷移至靶器官通
2、過增殖和血管生成形成一個新的癌灶。其中，抑制蛋白水解酶的活性和血管生成是抗腫瘤侵襲轉移的重要切入點。近幾十年來，天然產物已成為創(chuàng)新藥物和藥物先導化合物發(fā)現(xiàn)的重要源泉，具有抗腫瘤侵襲轉移活性的天然活性物質的結構優(yōu)化是發(fā)現(xiàn)抗腫瘤轉移創(chuàng)新藥物的重要途徑。海藻糖衍生物Brartemicin是日本科學家Igarashi從放線菌(Actinomyeete)Nonomuraeasp．代謝產物中分離得到的，結構為6，6’一雙-2，4一二羥基-6-甲基苯甲酸酯一a，Ⅱ．D一海藻糖。Brartemicin對結腸癌Colon26一
3、L5細胞具有較強的抗侵襲能力，且毒性低。課題組為獲得活性更優(yōu)的抗腫瘤侵襲轉移的藥物，對Brartemicin的分子進行優(yōu)化設計，構建了結構多樣性的海藻糖衍生物。經篩選和活性比較，發(fā)現(xiàn)化合物6,6’-雙(2，3一二甲氧基苯甲?；?．0【，0l—D．海藻糖(6，6’-bis(2，3-dimethoxybenzoyl)．a，a-D．trehalose，DMBT)具有較強的抗腫瘤侵襲轉移活性。其對結腸癌Colon26．L5細胞的抗侵襲活性比天然產物Brartemicin更高，IC50為o。15址M(0。10lig／m
4、L)。本課題主要通過體內、外實驗，研究DMBT對人乳腺癌細胞和鼠黑色素瘤細胞抗侵襲轉移的作用，在進一步確證化合物DMBT抗腫瘤侵襲轉移活性的基礎上，探討其作用機制，為丌發(fā)高效低毒具有我國自主知識產權的抗腫瘤侵襲轉移藥物奠定基礎。體外實驗：MTT及臺盼藍染色實驗顯示，DMBT在6411M時對MDA—MB一231山東人學碩一卜學位論文細胞的抑制率低于30％，對B16BL6細胞的抑制率也低于30％，說明DMBT對細胞增殖和細胞活力無明顯影響。遷移實驗和劃痕實驗顯示，2-89MDMBT能顯著抑制腫瘤細胞的遷移。Tra
5、nswell侵襲實驗顯示，2、49MDMBT能顯著抑制MDA—MB一231和B16BL6細胞的侵襲。小管形成實驗顯示，4、8pMDMBT能顯著抑制HUVEC細胞的管形成。Westernblotting及明膠酶譜實驗結果顯示，DMBT可抑制MDA．MB．231和B16BL6細胞的MMP．9、VEGF的表達。在MDA．MB．231細胞中，DMBT可降低VEGFR2、P．VEGFR2及p-EGFR的表達，引起下游p-AKT表達降低。在B16BL6細胞中，DMBT可抑制P13Kplloa、p-AKT、p-GSK一36
6、、p-mTOR、roTOR的表達。Real．timePCR實驗結果顯示，DMBT可引起GSK．3BmRNA表達升高、降低VEGFA、AKTl、P13KrlmRNA表達。體內實驗：尾靜脈注射B16BL6細胞至C57BL／6J小鼠體內構建人工肺轉移模型，結果顯示，與對照組相比，給藥14天后，DMBT在lmg／kg、10mg／kg可顯著抑制腫瘤細胞的肺轉移，且無明顯毒副作用。尾靜脈分別注射生物發(fā)光細胞B16．F10．1uc—G5和MDA．MB．231一luc—D2L2HN細胞至Balb／e．nu裸鼠體內構建人工肺轉
7、移模型，結果顯示，與對照組相比，給藥11天后，DMBT在lmg／kg、10mg&g可顯著抑制腫瘤細胞的肺轉移。雞胚尿囊膜血管形成實驗顯示，DMBT在10mg／ml時能顯著抑制雞胚尿囊膜血管生成。結論：海藻糖衍生物DMBT具有抗腫瘤細胞侵襲轉移的活性，且對細胞毒性較低。通過影響MMP．9／VEGF、VEGFR2或EGFR來引起下游AKT／GSK．3B／mTOR通路起到抗侵襲轉移的作用。因此，DMBT以其高效低毒的特點有潛力成為抗侵襲轉移的候選藥物之一。關鍵詞：海藻糖衍生物、DMBT、侵襲轉移、MMP．9、VEG
8、F、肺轉移、血管生成。山東人學壩}j學位論文EffectsofDMBT,atrehalosederivative，ontumoranti．．invasionandanti．．metastasisGraduate：LinlinTangSupervisor：XiuzhenHanABSTRACTTumorinvasionandmetastasisisthebasicbiologicalfeaturesin
