pcr實驗室設(shè)計說明

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1、PCR實驗室設(shè)計說明PCR實驗室分為四個區(qū)域，進入各工作區(qū)域必須嚴格按照單一方向進行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服（例如不同的顏色）。工作人員離開各工作區(qū)域時，不得將工作服帶出，四區(qū)域分別為：1.試劑配制區(qū)n2.樣品處理區(qū)n3.核酸擴增區(qū)n4.產(chǎn)物分析區(qū)n如使用全自動分析儀，區(qū)域可適當合并,三四區(qū)可合并為擴增產(chǎn)物分析。各區(qū)的功能是：????1.1.1試劑準備區(qū)：擴增試劑的配制、分裝和保存。????1.1.2樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。????1.1.3擴增產(chǎn)物分析區(qū)：擴增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報告。????1.2擴增前區(qū)與擴增后區(qū)應嚴格分開，須使用不同的房間，

2、兩區(qū)之間最好有一定的間隔。????1.3使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進行少量試劑配制。???1.4在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準備區(qū)可設(shè)在同一房間內(nèi)：????1.4.1在生物安全柜內(nèi)操作。????1.4.2每個實驗人員、實驗組分別使用各自的試劑及耗材。????1.4.3盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。????1.4.4用有效的方法對操作區(qū)域和共享器具在實驗前后進行清潔及消毒。設(shè)計要求：PCR實驗室可以是分散形式，也可以是組合形式,現(xiàn)要主要是以組合形式為主流。完成一組PCR實驗，通常應經(jīng)過試劑配制、樣品處理、核酸擴增及產(chǎn)物分析四個實驗過程，若實驗工藝需要，還應增

3、加樣品粉碎過程。一、分散形式PCR實驗室???所謂分散形式PCR實驗室，是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室，由于各個實驗之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求。二、組合形式PCR實驗室???所謂組合形式PCR實驗室,是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置，組成獨立實驗區(qū)域的形式。對于組合形式PCR實驗室，由于各個實驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間，以減少室內(nèi)外空氣交換。試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進入，造成污染,可以通過控制進風風量大

4、于排風風量達到正壓效果。核酸擴增室及產(chǎn)物分析室應呈微負壓，以防含核酸的氣溶膠擴散出去污染試劑與樣品，可以通過控制排風風量大于進風風量達到負壓效果。在理想情況下，PCR實驗室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空氣不流向室內(nèi)。PCR實驗室進風由原有中央空調(diào)控制，要求將中央空調(diào)風口安裝到指定定點，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。如果使用熒光PCR儀，擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并。若房間進深允許，可設(shè)PCR內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。???各個區(qū)域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相

5、互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。?實驗室的墻體，包括頂棚，應結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。如果使用熒光PCR儀，擴增室和產(chǎn)物分析室可以合并。若房間進深允許，可設(shè)PCR內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。???各個區(qū)域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護屏障，避免實驗之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對實驗過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。?實驗室的墻體，包括頂棚，應結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓

6、弧形線條過渡；墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。主要設(shè)備試劑準備區(qū)??儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈臺、加樣器、混勻器、天平和離心機等，加樣器、天平除了要專用外，還應有定期校準。???試劑分裝應在超凈臺中進行??擴增反應混合液應使用分子生物學級的，試劑制備好后應有質(zhì)檢：一是否有污染、二是檢測試劑的擴增效果。標本制備區(qū)?儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機、溫育儀、混勻器等擴增區(qū)??擴增區(qū)的主要儀器是核酸擴增儀、超凈臺、微量加樣器、離心機、可移動紫外燈。擴增儀需進行校準。并配備UPS電源，以防止由于電壓的波動，停電對擴增效果的影響。分析

7、區(qū)??本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等潔凈實驗區(qū)的緩沖間部分面積不能超過主實驗室的八分之一,這是有規(guī)定的.1、?主體結(jié)構(gòu)：主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。2、?標準的四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)：將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增，產(chǎn)物分析四個獨立的實驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走