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1、亞貢葉中總黃酮及總酚酸的含量測定田芳竇德強遲玉新吳陽朱紅丘鷹昆康廷國董鋒【摘要】 目的建立亞貢葉總黃酮、總酚酸的含量測定方法。方法利用分光光度計通過測定吸光度計算總黃酮、總酚酸的含量。結果實驗建立了總黃酮、總酚酸的標準曲線,測得亞貢葉中總黃酮平均含量為3.2%,RSD=1.4%(n=6);總酚酸平均含量為4.5%,RSD=1.6%(n=6)。結論建立了亞貢葉的總黃酮、總酚酸含量測定方法,該法簡單、快捷,重現(xiàn)性好,可用于亞貢葉的質量控制和定量分析?!娟P鍵詞】亞貢總黃酮總酚酸 Abstract:ObjectiveToestablishthedeter
2、minationmethodsoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidfromleafofYacon.MethodsThecontentoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidinedbyspectrophotometry.ResultsCalibrationgraphsethodsarerapid,reliable,accurateandsuitableforanalysisoftotalflavonoidsandtotalphenolicacidandqualitycontrol
3、inSmallanthussonchifolius. Keyallanthussonchifolius(Poepp.etEnd1.)H.Robinson為菊科向日葵屬多年生草本植物,俗稱“雪蓮果”“雅龍果”,英文名為“YACON”。原產(chǎn)于南美洲安第斯山脈,是當?shù)赜〉诎踩说膫鹘y(tǒng)根莖食品〔1〕。在我國云南地區(qū)有大面積種植,貴州、福建、湖南、臺灣等地也均有種植。民間用亞貢葉加工成茶,沖泡飲用,有降血糖、預防動脈粥樣硬化的功效。日本學者研究發(fā)現(xiàn),亞貢能有效地控制膽固醇增加,有減肥、防感冒、防骨質疏松、降低高血壓的功效,對消化道和循環(huán)系統(tǒng)的疾病,以及結腸癌等
4、,均具有一定的療效〔2〕。目前國內對于亞貢的文獻報道較少,本文對亞貢葉中總黃酮及總酚酸含量進行了測定,為其資源合理的開發(fā)利用及質量控制提供理論依據(jù)。 1儀器與試藥 1.1儀器 UV-2100紫外分光光度計(上海UNICO)、FA-1004分析天平(上海精科天平廠)。 1.2試藥蘆丁對照品為自制,經(jīng)HPLC純度檢驗為98.472%、咖啡酸標準品購于中國藥品生物制品檢定所(批號110885-200102)。亞貢葉200509采自遼寧省鞍山市岫巖新甸鎮(zhèn)大山村,經(jīng)遼寧中醫(yī)藥大學藥學院康廷國教授鑒定為菊科亞貢Smallanthussonchifoli
5、us的葉。所用試劑(硝酸鋁、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、三氯化鐵六水合物、鐵氰化鉀、十二烷基磺酸鈉、鹽酸、甲醇)購于各試劑公司。 2方法 2.1供試品的準備精密稱取亞貢葉粉末約2g,加入石油醚100ml,用索氏提取器脫脂6h。脫脂后粉末加入100ml60%甲醇加熱回流兩次,各1.5h。過濾,合并濾液,減壓濃縮并定容至25ml容量瓶。精密吸取1ml再定容至25ml容量瓶中備用?! ?.2總黃酮含量測定〔3〕?! ?.2.1蘆丁對照品的準備精密稱取蘆丁對照品,用60%的甲醇溶解后定容,配成濃度為95μg/ml的蘆丁對照品貯備液。精密吸取1ml蘆丁對照品溶液,
6、定容至10ml,制成濃度為9.5μg/ml的蘆丁對照品溶液?! ?.2.2標準曲線的繪制精密吸取濃度為9.5μg/ml蘆丁對照品溶液0,1.0,4.0ml及95μg/ml的蘆丁對照品溶液1.0,2.0,3.0,4.5ml于7只10ml具塞比色管中,分別加入5%NaNO2溶液0.3ml,搖勻,放置6min后各加入10%Al(NO3)3溶液0.3ml,搖勻放置6min。分別加入4%NaOH溶液4.0ml,用60%甲醇稀釋至刻度,搖勻,放置10min。在波長505nm處測定吸光度?;貧w方程:Y=1.1937X-0.0011,r=0.9997。其中Y為吸光度
7、,X為蘆丁對照品溶液濃度(mg/ml)。結果表明:蘆丁在0.001~0.043mg/ml的范圍內呈良好的線性關系?! ?.2.3方法學考察 精密度實驗:精密吸取95μg/ml蘆丁對照品溶液1.0ml置于10ml具塞比色管中,同“2.2.2”項下實驗方法進行顯色和測定,記錄吸光度A,吸光度A的RSD為0.51%(n=5)?! ≈噩F(xiàn)性實驗:精密稱取2g同一批藥材5份,按“2.1供試品的制備”及含量分析項下進行操作,制得5份供試液,各取適量,同“2.2.2”項下實驗方法進行顯色和測定,記錄吸光度,吸光度A的RSD為1.5%(n=5)。 穩(wěn)定性實驗:精密
8、吸取95μg/ml蘆丁對照品溶液1.0ml,同“2.2.2”項下實驗方法進行顯色,分別在15,20,30,4