九牛膽提取物的抗氧化活性研究

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1、九牛膽提取物的抗氧化活性研宄【摘要】目的：研究九牛膽提取物的體外抗氧化活性。方法：采用紫外分光光度法，以VC為對照品，測定九牛膽不同溶劑提取物對DPPH、羥基自由基和ABTS自由基的清除能力。結(jié)果：九牛膽不同溶劑提取物對三種自由基均具有一定清除作用，九牛膽甲醇提取物對DPPH和羥基自由基的抑制較強(qiáng)，其IC50為別0.61g/L和0.41g/L。結(jié)論：九牛膽甲醇提取物是一種較好的天然抗氧化劑?！娟P(guān)鍵詞】九牛膽；抗氧化活性；紫外分光光度法【中圖分類號】R285.5【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】A【文章編號】1007-8517(2

2、016)12-0035-02Abstract：ObjectiveTheaimofthisstudyistoinvestigatetheantioxidantactivityinvitroofdifferentextractfromtheTinosporasagittata(oliv.)Gagnep..MethodsUVspectrophotometricmethodwasusedtothescavengingcapacitiesofdifferentextractfromtheTinosporasagitta

3、ta(oliv.)Gagnep.onDPPH,?OHandABTS+?wereassayedincontrastwithVC.ResultsTheexperimentalresultsindicatedthatmethanolextracthaseffectofscavengingonDPPHand?OH，theIC50were0.61g/Land0.41g/Lrespectively.ConclusionMethanolextractisagoodnaturalantioxidant.Keywords：Ti

4、nosporasagittata（oliv.）Gagnep.；antioxidantactivity；extract自由基醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的深入研宄，使人們越來越關(guān)注各種自由基對人體的損傷，從自然界中尋找對自由基具有較強(qiáng)清除能力的天然植物具有重要意義［1］。九牛膽為防己科植物青牛膽Tinosporasagittata（Oliv.）Gagnep.或金果欖T.capillipesGagnep.的干燥塊根［2］，具有清熱解毒、利咽止痛之功效，臨床應(yīng)用治療咽喉腫痛、癰疽疔毒、泄瀉、痢疾、脘腹熱痛等，具有重要的經(jīng)濟(jì)價值［3-4

5、］。研宄采用甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿、水為溶劑，對九牛膽進(jìn)行提取，對提取物的體外抗氧化活性進(jìn)行研宄，對開發(fā)利用九牛膽豐富的藥物資源提供參考數(shù)據(jù)。1儀器與材料1.1儀器ABL-224型電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司）；DFD-700型電子恒溫水浴鍋、DZ-2BCII型真空干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；759型紫外可見分光光度計（上海儀電分析儀器有限責(zé)任公司）。1.2材料九牛膽購買于貴陽中藥市場；對氨基苯礦酸、2,2-聯(lián)氮基雙（3-乙基苯并噻哇啉-6-磺酸）二銨鹽

6、（ABTS）、1，1-二苯基苦基笨肼（DPPH）均購于上海晶純生化科技股份有限公司；乙醇、硫酸亞鐵、水楊酸、高硫酸鉀、雙氧水（30%）、鹽酸、L-抗壞血酸（VC）均為分析純。2方法2.1九牛膽提取物的制備稱取lO.Og干燥的九牛膽粉末，按固液比1:10的比例加入100ml蒸餾水，60恒溫水浴回流3h后，過濾。濾液用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾，回收溶劑，殘留物低溫真空干燥，得九牛膽水提取物。同法制備甲醇、乙醇、乙酸乙酯、氯仿提取物。提取物4°C冰箱保存?zhèn)溆谩?.2DPPH自由基清除率的測定[5]分別移取濃度為（0.15

7、、0.3、0.6、1.2、2.4g/L）的樣品溶液和物質(zhì)的量濃度為2X10-4mol/L的DPPH溶液。分別移取2ml不同濃度的樣品溶液與2ml的DPPH溶液于具塞試管中，混勻，在30°C下恒溫30min，在525nm處測定其吸光度，同時以VC為對照品。其清除率的計算公式：清除率=[1-（Ai-Aj）/Ac]X100%。其中，Ai為樣品與DPPH混合溶液的吸光度，Aj為樣品溶液的吸光度，Ac為DPPH溶液的吸光度。2.3羥基自由基清除率的測定［6］分別移取1ml不同濃度（0.15、0.3、0.6、1.2、2.

8、4g/L）的樣品溶液于10ml具塞試管中，向各試管中加入9mmol/L的硫酸亞鐵溶液lml,9mmol/L的水楊酸-乙醇溶液ImL,用蒸饋水定容至5ml,然后分別加入lml6mmol/L的H2O2溶液，啟動反應(yīng)，置于37°C溫度下反應(yīng)lOmin，在510nm下測定其吸光度，以VC為對照品。其清除率的計算公式：清除率=［1-（Ai-Aj）/Ac］XI00%o其中，Ai為加入樣品溶液、硫酸亞鐵、水楊酸-