人參皂苷對肝損傷的防治作用

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1、人參皂苷對肝損傷的防治作用人參為五加科植物人參的干燥根，而紅參則是人參經過高溫炮制后得到的加工品。人參具有抗氧化、抗衰老、提高機體免疫力及護心保肝等藥理作用。由于乙醇在體內主要經肝臟代謝，其代謝物乙醛及代謝過程中產生的活性氧會對肝臟造成損害，長期飲酒和過量飲酒，會造成乙醇在體內堆積，對肝臟造成不同程度的損傷。而人參皂苷是紅參的主要活性成分，《中國藥典》和國家標準均以人參皂苷為紅參的考核指標。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)紅參具有保肝功能[2-3],本文旨在研究人參皂苷提取物對小鼠酒精性肝損傷的防治作用，揭示作用

2、機制，為紅參的臨床應用提供依據(jù)。1材料與與儀器1.1儀器InfiniteM200pro酶標儀(瑞士帝肯);Lecia-DM2500微生物顯微鏡，德國Lecia公司。1.2藥物與試劑鮮人參，為5年生，產自吉林省撫松縣，由長春中醫(yī)藥大學王淑敏教授鑒定為五加科人參屬人參PanaxginsengC.A.Meyer干燥根;聯(lián)苯雙酯滴丸(浙江萬邦藥業(yè)有限公司，批號A02130407);56°北京紅星二鍋頭酒(北京紅星二鍋頭酒廠，批號20140224);ALT試劑盒、AST試劑盒、MDA試劑盒、GSH試劑盒(南京

3、建成生物工程研究所，批號20150112);TG試劑盒(浙江東甌生物工程有限公司，批號2015040104)。1.3實驗動物清潔級ICR雄性小鼠，體質量20~22g,由吉林大學基礎醫(yī)學院動物實驗中心提供，動物合格證號：SCXK-(吉)2014-005.2實驗方法2.1紅參炮制稱取鮮人參約300g,用紗布包好，放入蒸參箱，在60min升溫到100℃后蒸制6h,蒸制完畢后置于50℃烘干箱內烘干。將烘干后的紅參研碎成粉，過80目篩。2.2人參皂苷提取物(Ginsengsaponinextracts,GE)

4、制備稱取紅參粉末，加入8倍量80%乙醇，超聲提取(500DA、GSH含量測定。2.7肝組織病理學檢查取小鼠肝臟右葉置于10%中性福爾馬林中進行固定，經一定梯度濃度的乙醇脫水、石蠟包埋、切片進行HE染色，用顯微鏡觀察肝組織病理變化。2.8數(shù)據(jù)處理應用SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，采用單因素方差分析，組間比較采用最小顯著差數(shù)法(LSD)，數(shù)據(jù)均以x±s表示。3結果3.1小鼠狀況觀察試驗期間，GE中劑量組及陽性組死亡小鼠4只，其余各組死亡小鼠2只。對照組小鼠精神狀態(tài)正常，毛色正常，模型組小鼠毛色較

5、差，造模期間，ig給予白酒后20min左右，出現(xiàn)醉酒狀態(tài)，不自主行為增多，爬行不穩(wěn)，有些小鼠呈現(xiàn)昏睡狀態(tài)，給藥組小鼠給予白酒20min后，醉酒狀態(tài)較模型組稍好。3.2體質量及肝臟系數(shù)變化各組小鼠體質量無統(tǒng)計學差異，與對照組相比，模型組小鼠肝質量增大(P0.05)，表明長期飲酒和乙醇的堆積造成小鼠肝臟受損腫大，質量增加可能與肝臟內脂肪堆積或其他物質生成有關。給藥組小鼠肝臟系數(shù)相較模型組有明顯降低(P0.05)，GE高、中、低劑量組均有降低，但組間變化趨勢不明顯，GE對酒精引起的小鼠肝臟受損腫大有一定的

6、緩解作用。3.3對小鼠血清ALT、AST、TG的影響與對照組相比，模型組小鼠血清ALT(P0.05)、AST(P0.05)、TG(P0.01)含量明顯升高;與模型組相比，GE高、中劑量組ALT含量降低(P0.01)，GE各劑量組均能降低AST和TG水平(P0.01)，聯(lián)苯雙酯組可明顯降低ALT、AST水平。但GE高、中、低劑量組組間呈現(xiàn)的量效關系不明顯。長期白酒灌胃會造成小鼠血清ALT、AST、TG含量增高，GE可明顯降低血清TG的含量，對ALT、AST含量降低有一定作用，說明GE對小鼠酒精性肝損傷

7、有一定保護作用。3.4對小鼠肝臟MDA、GSH的影響小鼠肝勻漿MDA含量結果顯示，模型組小鼠MDA含量高于對照組(P0.01)，GE各劑量組MDA含量低于模型組(P0.01)。模型組GSH含量低于對照組(P0.01)，GE各劑量組GSH含量高于模型組(P0.01)，GE可降低MDA含量，增加GSH含量，說明其可在一定程度上抵御肝臟內的氧化作用，從而保護肝臟進一步損傷。3.5病理觀察結果正常組肝細胞結構正常，肝細胞條索排列整齊;模型組肝細胞變性壞死，有炎性細胞浸潤，脂泡小而密集;聯(lián)苯雙酯組炎性細胞浸潤

8、和壞死程度減輕4討論本研究采用長期、固定劑量的酒精灌胃造模方法[4-5]來模擬長期飲酒的狀態(tài)，形成慢性酒精性肝損傷模型。通過實驗觀察，長期灌胃白酒的小鼠，不自主行為增多，會出現(xiàn)嗜睡、四肢無力、食欲減退、呼吸衰竭等狀態(tài)，模型組小鼠的生化指標也表明長期白酒灌胃引起的肝功能的損傷，長期、固定劑量的酒精灌胃引起小鼠慢性酒精性肝損傷是可行的。ALT、AST是檢驗肝臟損傷的一個重要指標，正常血清里ALT、AST含量極少，只有在肝細胞死亡破裂后肝細胞內的ALT、AST才會釋放入血，