省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目2

《省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目2》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。

1、省教育編號(hào)理工類(lèi)農(nóng)林醫(yī)類(lèi)一般人文社科類(lèi)項(xiàng)0類(lèi)別省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目申請(qǐng)書(shū)項(xiàng)目名稱(chēng)：SARS冠狀病毒感染免疫學(xué)快速診斷試劑盒的研制串請(qǐng)者：所在單位：電話：傳真：電子信箱(Email):申請(qǐng)日期:2002年制填報(bào)說(shuō)明一、申請(qǐng)書(shū)各項(xiàng)內(nèi)容，要實(shí)事求是，逐條認(rèn)真填寫(xiě)。表達(dá)要明確、嚴(yán)謹(jǐn)。外來(lái)語(yǔ)要同時(shí)用原文和屮文表達(dá)。第一次出現(xiàn)的縮寫(xiě)詞，須注出全稱(chēng)。除簽名外，項(xiàng)A申請(qǐng)書(shū)必須是打印件。二、申請(qǐng)書(shū)一律用A4紙，于左側(cè)裝訂成冊(cè)。第二頁(yè)起各欄空格不夠時(shí)，請(qǐng)自行加頁(yè)。三、封面上“教育廳編號(hào)”由教育廳填寫(xiě)，“項(xiàng)目類(lèi)別”在相應(yīng)的位置填寫(xiě)“重點(diǎn)'“青年

2、'“一般”。（封2）—V簡(jiǎn)表項(xiàng)0名稱(chēng)SARS冠狀病毒感染免疫學(xué)快速診斷試劑盒的類(lèi)別基礎(chǔ)研究應(yīng)用研究一般研制試驗(yàn)發(fā)展研宂年限2003年5月至2004年6月申請(qǐng)經(jīng)費(fèi)14萬(wàn)元項(xiàng)目姓名年齡48技術(shù)職務(wù)教授負(fù)責(zé)人已獲學(xué)位碩士所學(xué)專(zhuān)業(yè)病原生物學(xué)現(xiàn)從事專(zhuān)業(yè)病原生物學(xué)姓名年齡技術(shù)職務(wù)己獲學(xué)位專(zhuān)業(yè)簽名30講師碩士病原生物學(xué)主要30講師碩士病原生物學(xué)研28助教碩士臨床檢臉允*33高級(jí)實(shí)驗(yàn)師碩士衛(wèi)生檢驗(yàn)人員37副教授碩士病原生物學(xué)57教授本科病原生物學(xué)本研究擬通過(guò)生物信息學(xué)軟件分析并尋找我國(guó)分離SARS冠狀病毒株的S蛋白和M蛋白基因共同的保守序

3、列，RT-PCR擴(kuò)增該基因，克隆至真核表達(dá)載體，在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)，用純化蛋白、抗原制備的單克隆抗體來(lái)制備免疫金復(fù)合物，幵發(fā)斑點(diǎn)免疫層析試紙條檢測(cè)病毒的相應(yīng)抗原；同王要時(shí)將純化的抗原包被微孔板，用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)患者血淸中的相應(yīng)抗體，二者互為研'結(jié)合用于SARS冠狀病毒感染的早期診斷。本研究將為基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)診斷SAKS冠狀病毒感染提供ZL內(nèi)準(zhǔn)確、特異、快速、方便、價(jià)廉的診斷試劑，為控制SARS冠狀病毒在地級(jí)以下城市及廣大農(nóng)村的容傳播和感染提供有力的工具。是否我廳在建重點(diǎn)學(xué)科，學(xué)科名稱(chēng)：否二、立論依據(jù)(包括項(xiàng)目的

4、研宄意義、國(guó)內(nèi)外研宄現(xiàn)狀分析)自2002年末在我國(guó)廣東省發(fā)現(xiàn)首例非典型肺炎病例以來(lái)，該疾病至今已經(jīng)廣泛擴(kuò)散到香港、越南、東南亞及加拿大和美國(guó)等近30個(gè)國(guó)家和地區(qū)，至5月2日世界衛(wèi)生組織(WHO)統(tǒng)計(jì)全球患者己多達(dá)6054多例，且發(fā)病人數(shù)仍有不斷增加的趨勢(shì)11］。該病主要通過(guò)近距離空氣飛沫和密切接觸傳播，起病急、傳播快，病死率高込10%，WHO將這種傳染病稱(chēng)為重癥急性呼吸綜合征(SevereAcuteRespiratorySyndrome,SARS)。屮國(guó)香港和大陸、加拿大、美國(guó)等國(guó)家的研宄機(jī)構(gòu)病原學(xué)調(diào)査研宄表明引起該病的病

5、原體是冠狀病毒家族的一個(gè)新的變種，命名為SARS冠狀病毒［2^4’冠狀病毒是引起人類(lèi)上呼吸道感染的病原，其感染在全世界各個(gè)地區(qū)廣泛分布，主要發(fā)生在冬季和早春季節(jié)，通常引起成人的普通感冒，也是成人慢性氣管炎患者急性加重的重要病原。冠狀癇毒分三個(gè)組群，組群1和2包括哺乳動(dòng)物病毒，而組群3僅包括禽類(lèi)癇毒。人冠狀病毒分別屬于組群1和2,有OC43和229E兩個(gè)抗原型，引起約30%中度上呼吸道感染疾病。SARS冠狀病毒也是一種單正鏈RNA病毒，但研究結(jié)果表明該病毒是一個(gè)新的病毒變種：SARS冠狀病毒可在Vero細(xì)胞中生長(zhǎng)；病毒編碼

6、的制酶基因和S、E、M、N蛋白叫基因的聚類(lèi)分析表明該病毒和已知的三個(gè)組群有明顯差別；川己知的冠狀病毒抗原檢測(cè)不到患者恢笈期血清中的抗體121。SARS冠狀病毒感染具有很高的傳染性和較高的死亡率，而且目前尚無(wú)特異性治療和預(yù)防手段，因此迫切需要平期診斷以控制傳染源和切斷傳播途徑，減少對(duì)易感人群的危害。對(duì)SARS冠狀病毒的平期診斷主要包括細(xì)胞培養(yǎng)方法分離病毒、逆轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增病毒的RNA、血液中抗體檢測(cè)等三種［6］。病毒的細(xì)胞培養(yǎng)是診斷該病的金標(biāo)準(zhǔn)，但培養(yǎng)要求高，生長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)，陽(yáng)性率很低，不適于早期診斷。逆轉(zhuǎn)錄PCR具有高敏感性和

7、特異性的優(yōu)點(diǎn)，可以在感染后1到2天檢測(cè)體內(nèi)的病毒，雖然可以輔助臨床診斷，但是病毒RNA提取困難、易降解，容易出現(xiàn)假陰性結(jié)果；II操作易污染，容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果?？贵w檢測(cè)有間接免疫熒光和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)兩種，前者可以檢測(cè)岀病毒感染10天后產(chǎn)生的IgM型抗體，后者nJ以可靠地檢出感染14-21天后SARS病人血清中的病毒抗體(IgM/IgG),但這兩種方法都不能用于早期診斷。細(xì)胞培養(yǎng)、RT-PCR和間接免疫熒光試驗(yàn)均盂要特殊的設(shè)備和條件，且操作人員盂要專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)并具備一定的經(jīng)驗(yàn)，因此在廣大基層很難推廣，這對(duì)于地級(jí)以

8、下的城市和廣大農(nóng)村預(yù)防SARS帶來(lái)很多不便，因此幵發(fā)一種簡(jiǎn)羊、方便、廉價(jià)的診斷試劑有非常重要的實(shí)用價(jià)值并II有很人的市場(chǎng)前景?？焖侔唿c(diǎn)免疫層析試驗(yàn)(dotimmunochromatographicassay,DIBA)是一種免疫膠體金測(cè)定方法［/］，使用硝酸纖維膜作為載體，利用微孔膜的毛細(xì)作用，使滴加在