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1、HPLC法測(cè)定獨(dú)子藤中雷公藤紅素的含量：劉慧瓊，李國(guó)成,盧綺雯,王定勇【摘要】目的建立高效液相色譜法測(cè)定獨(dú)子藤中雷公藤紅素的含量，為雷公藤紅素的藥用植物資源開(kāi)發(fā)提供依據(jù)。方法采用SupelcoDiscoveryC18柱(25cm×4.6mm，5μm)，流動(dòng)相為甲醇-5%(體積分?jǐn)?shù))H3PO4水溶液(體積比80∶20)，流速為1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為426nm。結(jié)果雷公藤紅素在40~200μg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積呈良好線性關(guān)系(r=0.9991)。獨(dú)子藤中雷公藤紅素的平均質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.0555%，雷公藤紅素的平均回收率為97.6%，RSD=1.78%(n=6)。結(jié)論該
2、方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、靈敏度高、重現(xiàn)性好，可用于獨(dú)子藤中雷公藤紅素的含量測(cè)定;獨(dú)子藤中雷公藤紅素含量較高，可作為雷公藤紅素的資源植物加以開(kāi)發(fā)利用?！娟P(guān)鍵詞】獨(dú)子藤;雷公藤紅素;高效液相色譜法;成分分析 Abstract:ObjectiveTodeterminethecontentoftripterineinCelastrusmonospermusRoxbbyHPLCfordevelopingthemedicinalresourcesofcelastrol.MethodsAnexternalstandardmethodbyHPLCn(25cm×4.6mm,5μm)ployed.Themo
3、bilephaseethanol-5%(φ)phosphoricacidsolution(80︰20)(ξ)atthefloL·min-1.Thedetection.ResultsItshoL-1(r=0.9991).ThecontentoftripterineinCelastrusmonospermusRoxbethodissimpleandaccurate,sensitiveandreproducibleandcanbeusedinthequalitycontrolofCelastrusmonospermusRoxb.ThecontentoftripterineinCelas
4、trusmonospermusRoxbonospermusRoxb;tripterine;HPLC;assay 獨(dú)子藤(CelastrusmonospermusRoxb.)為衛(wèi)矛科南蛇藤屬植物，分布于我國(guó)福建、廣東、云南、貴州、廣西等省區(qū)及越南和印度等地，主要生長(zhǎng)于海拔1000m以上的林帶中[1]。研究表明獨(dú)子藤的化學(xué)成分主要為生物堿和木栓烷型三萜類化合物，其中木栓烷型三萜類化學(xué)成分對(duì)風(fēng)濕病、白血病和皮膚病均有較好療效[2]。雷公藤紅素為木栓烷型三萜類化合物，是雷公藤片、雷公藤多苷片等治療類風(fēng)濕病制劑的有效成分之一,主要于中藥雷公藤的根皮，具有抗炎、免疫抑制及抗腫瘤等多種藥理活
5、性[3]。中美科學(xué)家于2006年聯(lián)合發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素的抗癌新機(jī)制[4]，引發(fā)了雷公藤紅素抗癌活性研究的熱潮。我們?cè)讵?dú)子藤的化學(xué)成分研究中發(fā)現(xiàn)該植物根中富含雷公藤紅素，是一種潛在的雷公藤紅素植物資源,具有重要開(kāi)發(fā)價(jià)值。但至今尚未見(jiàn)有關(guān)獨(dú)子藤中雷公藤紅素含量測(cè)定的文獻(xiàn)報(bào)道。本文建立了獨(dú)子藤中雷公藤紅素的含量測(cè)定方法，對(duì)合理開(kāi)發(fā)獨(dú)子藤植物資源、促進(jìn)雷公藤紅素的深入研究,均具有重要意義?！ ?儀器與試藥 1.1儀器 ShimadzuLC-10AT型高效液相色譜儀(日本島津公司)，SPD-10AT型紫外-可見(jiàn)檢測(cè)器(日本島津公司)，Hillipore溶液過(guò)濾器;Millipore0.45
6、μm濾膜;AY120電子分析天平(Shimadzu公司);RE-52A旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)?！ ?.2試藥 雷公藤紅素對(duì)照品(自制，經(jīng)HPLC法測(cè)定純度≥98%);獨(dú)子藤于2008年10月采自廣東省陽(yáng)春市，由廣東藥學(xué)院李書淵教授鑒定為獨(dú)子藤CelastrusmonospermusRoxb.;硅膠(柱層析硅膠，青島海洋化工有限公司);甲醇為色譜純;水為超純水;其余試劑均為分析純。 2方法與結(jié)果 2.1色譜條件 色譜柱：SupelcoDiscoveryC18柱(25cm×4.6mm，5μm);流動(dòng)相：甲醇-體積分?jǐn)?shù)5%H3PO4水溶液(體積比80∶20);流速：1
7、.0mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)：426nm;柱溫：25℃;進(jìn)樣量：20μL。色譜圖見(jiàn)圖1?！ ?.2對(duì)照品貯備液的制備 精密稱取雷公藤紅素對(duì)照品5.0mg，置25mL容量瓶中，加適量甲醇溶解并定容，搖勻，得到質(zhì)量濃度為0.20mg·mL-1的雷公藤紅素對(duì)照品貯備液。 2.4線性關(guān)系的考察 分別精密吸取“2.2”項(xiàng)下對(duì)照品貯備液1、2、3、4、5mL置于5mL容量瓶中，分別用甲醇溶解并定容，搖勻，制得系列對(duì)照品溶液。依次取上述溶液各20μL進(jìn)樣，依法測(cè)定。以雷公藤紅素的峰面積
