ghrelin 對(duì)mptp小鼠帕金森病模型黑質(zhì)t

《ghrelin 對(duì)mptp小鼠帕金森病模型黑質(zhì)t》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、Ghrelin對(duì)MPTP小鼠帕金森病模型黑質(zhì)T【摘要】目的探討Ghrelin對(duì)1甲基4苯基1，2，3，6四氫吡啶（MPTP）造成的黑質(zhì)（SN）多巴胺能神經(jīng)元損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制。方法小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、MPTP組和Ghrelin+MPTP組。腹腔注射MPTP制備帕金森病小鼠模型；Ghrelin+MPTP組于MPTP注射前，側(cè)腦室微量注射Ghrelin200ng，共8d；對(duì)照組以等量生理鹽水取代Ghrelin和MPTP。應(yīng)用半定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)各組小鼠SN內(nèi)酪氨酸羥化酶（TH）、Bcl2和BaxmRNA的表達(dá)情況。結(jié)果M

2、PTP導(dǎo)致小鼠SN內(nèi)THmRNA的表達(dá)明顯低于對(duì)照組(F=34.77，q=11.91，P<0.01)，Ghrelin預(yù)處理小鼠SN內(nèi)THmRNA表達(dá)量較MPTP組明顯增加(q=5.05,P<0.01)。MPTP導(dǎo)致小鼠SN內(nèi)Bcl2/Bax由對(duì)照組的1.13±0.03減少至0.47±0.06(F=111.59，q=17.58,P<0.01)，Ghrelin預(yù)處理小鼠Bcl2/Bax明顯高于MPTP組(q=18.94,P<0.01)，可恢復(fù)至正常水平。結(jié)論Ghrelin預(yù)處理對(duì)于MPTP造成的TH基因表達(dá)量減少有改

3、善作用，該作用可能通過抗凋亡途徑實(shí)現(xiàn)?！娟P(guān)鍵詞】Ghrelin帕金森病1甲基4苯基四氫吡啶酪氨酸單氧化酶細(xì)胞凋亡［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatetheeffectofGhrleinontyrosinehydroxylase(TH),Bcl2andBaxmRNAexpressionofthesubatantianigrain1methy4phenyl1,2,3,6tetrahydropyridine(MPTP)inducedmousemodelofParkinsondisease.Metho

4、dsEighteenhealthymaleC57BL/6mice：Control,MPTPandGhrelin+MPTP.ThemiceinMPTPgroupg/kg,i.p.),oncedailyforfivedays,alsaline.ThetotalmRNAofthesubstantianigra(SN)RNAexpressionofTH,Bcl2andBaxbysemiquantitivereversetranscriptionpolymerasechainreaction.ResultsparedRNAexpression(P

5、<0.01).PretreatedRNAexpressionparedRNAexpressioninducedbyMPTP.Theantiapoptoticpathightbethemechanismofthisneuroprotectiveeffect.［KEYA等[2]于1999年發(fā)現(xiàn)的一種腦腸肽,由28個(gè)氨基酸組成，為生長(zhǎng)激素促分泌素受體(GHSR)的內(nèi)源性配體,有刺激食欲、促進(jìn)攝食、減少能量消耗、增加體質(zhì)量的作用。最近的研究表明，Ghrelin能夠刺激多種細(xì)胞的增殖并能抑制凋亡。ZIGMAN等[3]利用組織原位雜交技術(shù)檢

6、測(cè)Ghrelin功能性受體——GHSR1amRNA在大小鼠腦內(nèi)的分布，發(fā)現(xiàn)在SN的TH免疫陽性神經(jīng)元上有GHSR1a的表達(dá)。為研究Ghrelin是否具有保護(hù)PD動(dòng)物模型SN內(nèi)DA能神經(jīng)元的作用，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RTPCR）技術(shù)，對(duì)1甲基4苯基1，2，3，6四氫吡啶（MPTP）制備的C57BL/6小鼠PD模型SN內(nèi)酪氨酸羥化酶（TH）、Bcl2和BaxmRNA表達(dá)量進(jìn)行了檢測(cè)，對(duì)Ghrelin的神經(jīng)保護(hù)作用及其可能的機(jī)制進(jìn)行了初步探討。1材料與方法1.1材料MPTP、Ghrelin（Sigma公司），TR

7、Izol試劑（Gibico公司），逆轉(zhuǎn)錄試劑盒（Promega公司），TagDNA聚合酶以及DNAMarkerDL2000（TAKARA公司）。1.2動(dòng)物分組選擇健康雄性C57BL/6小鼠18只，8～10周齡，體質(zhì)量（20±2）g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供,其合格證號(hào)為：scxk（京）20020003。置于（19±2）℃室溫下，安靜環(huán)境飼養(yǎng)，晝夜循環(huán)光照，自由飲水、取食。采用完全隨機(jī)分組方法將小鼠分為對(duì)照組、MPTP組和Ghrelin+MPTP組共3組，每組6只。1.3單側(cè)側(cè)腦室埋管術(shù)術(shù)前所有小鼠禁食12h，以80g/L水合氯醛

8、（400mg/kg）腹腔注射麻醉小鼠，充分暴露顱骨，參考GEORGE等編著的《小鼠腦立體定位圖譜》（2001）以三棱針于顱骨表面?zhèn)饶X室代表區(qū)（前囟后0.3mm，矢狀縫右側(cè)1.0m