穴位埋線對氯氮平大鼠下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響

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1、穴位埋線對氯氮平大鼠下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響【摘要】觀察穴位埋線對氯氮平大鼠下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響?！痉椒ā繉D大鼠36只隨機(jī)分為埋線組、氯氮平組和空白對照組。除空白對照組外，其他2組大鼠均灌胃氯氮平，由5mg·kg-1·d-1漸增至30mg·kg-1·d-1，而后遞減至22mg·kg-1·d-1，并維持至實(shí)驗(yàn)結(jié)束。服用氯氮平60d后埋線組選取兩組穴位：①百會、心俞（雙）、曲池（雙）；②大椎、脾俞（雙）、足三里（雙），交替埋線，每5d治療1次，共12次。觀察各組大鼠治療前后體質(zhì)量變化，并檢測下丘腦單胺類神經(jīng)遞質(zhì)多巴胺（DA）和5羥色胺（5HT）的含量?！窘Y(jié)果】長期服用氯

2、氮平可使大鼠體質(zhì)量顯著性增加，DA和5HT含量顯著性降低（均P＜0.05或P＜0.01），而穴位埋線治療可顯著性抑制大鼠體質(zhì)量的增加，升高下丘腦中DA和5HT的含量（P＜0.05）。【結(jié)論】穴位埋線減輕氯氮平副作用的機(jī)制可能與其能升高下丘腦內(nèi)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】穴位埋線/治療應(yīng)用精神障礙/穴位療法單胺類神經(jīng)遞質(zhì)疾病模型動物大鼠氯氮平（clozapine)是非典型的抗精神病藥，其價格低廉、療效確切，是臨床上治療難治性精神科疾病的常用藥。但長期使用易導(dǎo)致肥胖、血糖血脂異常等一系列的副反應(yīng)，有報道認(rèn)為［1］其機(jī)理可能與神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)內(nèi)分泌有關(guān)，抗精神病藥物通過抗腎上腺

3、素、阻斷多巴胺（DA）受體以及拮抗5羥色胺（5HT）等而引起體質(zhì)量增加。在臨床實(shí)驗(yàn)中，我們發(fā)現(xiàn)穴位埋線療法能夠改善患者因服用氯氮平而引起的體質(zhì)量增加，但其具體機(jī)制不清楚，查閱中外文獻(xiàn)亦尚未發(fā)現(xiàn)有學(xué)者報道。我們進(jìn)行了該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)研究，以期發(fā)現(xiàn)穴位埋線療法改善氯氮平副作用的可能機(jī)制。現(xiàn)將結(jié)果報道如下。1材料與方法1.1動物清潔級SD大鼠36只，雄性12只（246±12）g，雌性24只（250±9）g，廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號為SCXK（粵）20060001。所用飼料為普通全價飼料，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供。1.2藥物及試劑氯氮平片劑為徐州恩華藥業(yè)集團(tuán)有限責(zé)任公

4、司生產(chǎn)，批號：20050816；治療用羊腸線為上海蒲東金環(huán)醫(yī)療用品有限公司產(chǎn)品，規(guī)格：40，標(biāo)準(zhǔn)號：YY911161999；腦組織各項(xiàng)指標(biāo)由廣州中醫(yī)藥大學(xué)臨床藥理教研室負(fù)責(zé)檢驗(yàn)。1.3主要儀器和工作條件DIONEXSummit高效液相色譜儀（HPLC，美國DIONEX公司）；Chromeleon色譜工作站（美國DIONEX公司）；HP1049A電化學(xué)檢測器（美國安捷倫公司）；RC5C低溫高速離心機(jī)（美國杜邦公司）；PHS2C精密酸度計（上海理達(dá)儀器廠）。色譜柱：DevelosilC30UG5（150mm×4.6mm，5μm，日本NomuraChemicalCo.,Ltd)

5、；流動相為磷酸二氫鉀（其中磷酸二氫鉀溶液25mmol/L，內(nèi)含乙二胺四乙酸二鈉0.5mmol/L，用磷酸調(diào)pH3.4）：乙腈=97：3（體積比），用前經(jīng)0.45μm濾膜真空抽濾，流速1.5mL/min；玻璃碳工作電極，Ag/AgCl參比電極，檢測電位0.6V；柱溫30℃，自動進(jìn)樣器溫度10℃。1.4動物分組與給藥所有動物隨機(jī)分為3組，每組各12只，即穴位埋線+氯氮平組（簡稱埋線組）、氯氮平組和空白對照組。穴位埋線組和氯氮平組根據(jù)氯氮平的臨床劑量通過體表系數(shù)換算公式［2］計算出大鼠用藥的等效劑量為20～30mg·kg-1·d-1。給藥方案如下：氯氮平灌胃由小劑量（5mg·kg-1·d

6、-1）開始，逐漸以5mg·kg-1·d-1為單位增加，每3d增加1次，至劑量為30mg·kg-1·d-1；而后即以1mg·kg-1·d-1為單位遞減，每2d減少1次至用藥劑量為22mg·kg-1·d-1，并維持劑量用藥直至處死動物并取材檢測，整個實(shí)驗(yàn)周期為4個月。1.5穴位埋線干預(yù)服用氯氮平60d后對埋線組進(jìn)行穴位埋線干預(yù)措施，5d埋線1次，共治療12次，結(jié)束實(shí)驗(yàn)。按文獻(xiàn)［3］選取兩組穴位：①百會、心俞（雙）、曲池（雙）；②大椎、脾俞（雙），足三里（雙）。兩組穴位交替埋線，每5d治療1次。在埋線組每次治療的同時，給予氯氮平組、空白對照組每只大鼠抓取15min的刺激。穴位埋線方法：先

7、將1cm醫(yī)用羊腸線放入2mL注射器的針孔，待穴位局部消毒后繃緊皮膚，將注射器針頭刺入穴位，再用已經(jīng)修剪過的針灸針推入穴位內(nèi)，后按壓針孔止血。1.6樣品采集與指標(biāo)檢測實(shí)驗(yàn)完畢后斷頭處死，將大鼠的頭在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，立即置于生理鹽水的冰盤上取腦組織，迅速分離大鼠的下丘腦，稱質(zhì)量。將下丘腦置玻璃勻漿器中，加入20g/L三氯乙酸溶液（預(yù)冷至4℃）500μL，制成勻漿，勻漿液用吸管小心轉(zhuǎn)移入離心管中，用200μLNaH2PO4溶液（0.33mol/L，