兒童紫癜性腎炎腎組織vcam

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1、兒童紫癜性腎炎腎組織VCAM:盧立肖,陳曉英,林瑞霞,楊青,陳敏廣【摘要】目的:探討紫癜性腎炎(HSPN)患兒腎活檢組織血管細胞黏附分子-1(VCAM-1)的表達情況及其意義。方法:應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測8例HSPN和7例薄基底膜病(對照組)通過腎穿刺活檢術(shù)獲得的腎組織VCAM-1表達情況(用IOD值表示),分析其與腎臟病理、主要臨床指標(包括24h尿蛋白、尿紅細胞)的關(guān)系。結(jié)果:對照組的腎組織僅少量表達VCAM-1;HSPN患兒的腎小管、腎間質(zhì)及腎小球中VCAM-1表達均增加,以小管間質(zhì)部位為著,并隨ISKDC腎病理級別的增加而增強;平均腎組織VCAM-1表達的IOD值在Ⅲ-Ⅳ級組為

2、(6.54±2.02)×105,在Ⅰ-Ⅱ級組為(2.45±0.07)×105,對照組為(0.76±0.12)×105,Ⅲ-Ⅳ級組與Ⅰ-Ⅱ級組均明顯高于對照組(均P<0.01),且Ⅲ-Ⅳ級組高于Ⅰ-Ⅱ級組(P<0.05)。HSPN患兒的腎組織VCAM-1表達的IOD值與其ISKDC腎病理分級呈顯著正相關(guān)(r=0.866,P<0.01),與IgA和C3沉積量均無顯著性相關(guān)(r分別為0.339、-0.436,均P>0.05),與24h尿蛋白量呈顯著正相關(guān)(r=0.755,P<0.05),而與尿沉渣紅細胞量無顯著性相關(guān)(r=-0.626,P>0.05)。結(jié)

3、論:VCAM-1參與了HSPN的發(fā)生、發(fā)展過程,其腎組織的VCAM-1表達可反映其病情的嚴重程度?!娟P(guān)鍵詞】紫癜性腎炎;血管細胞黏附分子-1;腎組織;兒童紫癜性腎炎(Henoch-Schonleinpurpuranephritis,HSPN)作為兒科最常見的繼發(fā)性腎小球疾病之一,雖然其大多預(yù)后良好,但約15%的患者會有活動性腎臟病,約3%~20%的患者會發(fā)展到腎衰竭[1-2],然而它的確切病因和發(fā)病機制至今尚未完全清楚。近幾年來血管細胞黏附分子-1(vascularcellularadhesionmolecule-1,VCAM-1)在HSPN發(fā)病中的作用也引起研究者的重視[3-4],

4、但對其腎組織VCAM-1表達的研究甚少,為了探討VCAM-1在兒童HSPN腎組織的表達情況及其可能起的作用,我們對8例HSPN患兒及7例病理學改變?yōu)楸』啄げ〉幕純耗I組織VCAM-1表達進行檢測,現(xiàn)報告如下。  1對象和方法  1.1研究對象病例于2006年1月至2007年4月間住院于我科并行過腎穿刺活檢術(shù)的8例HSPN患兒(HSPN組),年齡7~12歲,其中男5例,女3例;均符合中華醫(yī)學會兒科學分會腎臟病學組于2001年制定的HSPN診斷標準[5]。對照組標本來自我科住院的7例病理學改變?yōu)楸』啄げ〉幕純?,年齡7~13歲,其中男4例,女3例。兩組在性別構(gòu)成及年齡上差異無顯著性(P均

5、>0.05)?! ?.2檢測指標和方法  1.2.1生物學指標:所有HSPN病例均于腎活檢當日送檢24h尿蛋白定量和新鮮尿沉渣紅細胞半定量?! ?.2.2腎組織VCAM-1的檢測:一抗采用武漢博士德公司的兔抗人VCAM-1多克隆抗體,二抗采用北京中杉公司試劑盒,檢測方法按試劑盒說明書進行。封片后,自然晾干,盡快觀察,并使用自動顯微照相裝置在顯微鏡下攝取圖像。腎組織的VCAM-1表達采用Image-ProPlus5.0醫(yī)學圖像分析軟件,400×光鏡下計數(shù)每張切片單位視野內(nèi)的累積光密度(IOD),IOD為經(jīng)標準灰密度校正后,在同等條件下測得的陽性物質(zhì)的平均總分減去平均背景積分。IO

6、D能反映選定區(qū)域的蛋白表達總量,是陽性面積與陽性平均光密度的乘積。圖片放大倍數(shù)表示物鏡倍數(shù)乘目鏡放大倍數(shù)。在統(tǒng)一放大倍數(shù)(40×10)下,每張切片隨機選取4個視野,取其平均值?! ?.2.3腎組織病理檢測:分別行光鏡、免疫熒光及電鏡檢查。光鏡行HE染色,PAS染色,Masson染色,PASM染色;免疫熒光行IgA、IgG、IgM、C3、C4、Clq等檢查。病理診斷分級按中華醫(yī)學會兒科學分會腎臟病學組修訂的國際兒童腎臟病研究中心(ISKDC)分類標準[5],分為6級?! ?.3統(tǒng)計學處理方法多組樣本均數(shù)比較進行方差齊性檢驗,組間比較比較采用單因素方差分析,方差齊者兩兩比較采用LSD法,

7、方差不齊者進行Dunt’sT3檢驗。相關(guān)分析采用Bivariate過程的Spearman等級相關(guān)分析?! ?結(jié)果  2.1HSPN患兒腎組織病理檢查結(jié)果8例HSPN患兒的腎組織病理診斷及ISKDC分級的結(jié)果為:Ⅱ級2例,Ⅲ級5例,Ⅳ級1例。免疫病理分型:單純IgA沉積型5例;IgA+IgG沉積型1例;IgA+IgM沉積型1例;1例免疫病理呈陰性反應(yīng)?! ?.2HSPN患兒腎組織VCAM-1表達特點對照組的腎小球、腎小管和腎間質(zhì)VCAM-1的表達多為陰性,僅

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