何首烏飲對d半乳糖所致衰老大鼠下頜下腺β半乳糖苷酶表達(dá)的影響

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1、何首烏飲對D半乳糖所致衰老大鼠下頜下腺β半乳糖苷酶表達(dá)的影響李俊玫高福祿葛志華李俊穎【摘要】  目的通過觀察何首烏飲干預(yù)的衰老大鼠下頜下腺β半乳糖苷酶(βgal)表達(dá)的改變,探討何首烏飲的抗衰老作用。方法用D半乳糖制造衰老大鼠模型,何首烏飲的干預(yù)作用分治療和預(yù)防兩部分,檢測β半乳糖苷酶活性,觀察下頜下腺衰老細(xì)胞數(shù)目改變。結(jié)果預(yù)防性實(shí)驗(yàn)部分:模型組衰老細(xì)胞數(shù)目多于正常組和各預(yù)防性用藥組;治療性實(shí)驗(yàn)部分:用藥各組與自然恢復(fù)組相比,衰老細(xì)胞數(shù)目明顯減少,其中治療中劑量組最低。結(jié)論何首烏飲具有抗模型大鼠下頜下腺細(xì)胞衰老的作用?!娟P(guān)鍵詞

2、】何首烏;D半乳糖;衰老大鼠;下頜下腺;β半乳糖苷酶  【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheapoptosisofsubmandibularglandularcellsandtheeffectsofHeshouandibularglandsofagingrats.MethodsDgalactosesenescencemodelentexperiment.Theβgalactosidaseactivityentalpartoftheprevention,thenumberoftheagingposi

3、tivecellsinmodelsubmandibularglandsalandpreventinggroups.Partofthetreatmentexperiment,thenumberoftheagingpositivecellsintreatmentgroupsodelrats'submandibulargland.  【Keyandibulargland;βgalactosidase  衰老是在生物發(fā)育成熟后,隨年齡的增加,機(jī)體的器官、組織出現(xiàn)功能、形態(tài)的退變乃至老化的過程。下頜下腺是具有外分泌和內(nèi)分泌雙重功能的腺體,能夠分泌

4、70%的唾液和近50種生物活性物質(zhì),其分泌的某些生物活性物質(zhì)完全達(dá)到激素水平,對機(jī)體多種組織、器官有重要的支持、營養(yǎng)及調(diào)節(jié)作用。近年來,關(guān)于下頜下腺功能的研究逐漸深入,但對其衰老與抗衰老的研究卻少有報道。本實(shí)驗(yàn)采用D半乳糖誘發(fā)的亞急性衰老模型,通過對β半乳糖苷酶活性的檢測,觀察下頜下腺衰老細(xì)胞數(shù)目的改變;探討何首烏飲對衰老大鼠下頜下腺的影響,為何首烏飲在延緩組織退行性改變、增強(qiáng)老年性保健、預(yù)防衰老性涎腺疾病方面奠定研究基礎(chǔ)?! ?材料與方法  1.1材料與儀器  何首烏飲方劑由炙何首烏、懷牛膝、肉蓯蓉、淫羊藿、丹參、茯苓組成,由本院賈

5、春華教授提供;實(shí)驗(yàn)大鼠購自河北省實(shí)驗(yàn)動物中心,合格證編號:605106。  1.2實(shí)驗(yàn)動物的選擇及分組  選用8周齡清潔級SD雌性大鼠90只,體重180~220g,隨機(jī)分為預(yù)防性和治療性兩大實(shí)驗(yàn)部分,每部分5組,每組9只?! ?.3模型的建立及各組動物的處理方法  預(yù)防性用藥部分:正常組(N)大鼠正常喂60d;模型組(M)大鼠腹腔注射D半乳糖(300mg·kg-1·d-1),連續(xù)60d;何首烏飲(HS)、低(Pl)劑量組大鼠腹腔注射D半乳糖的同時分別灌胃何首烏飲(3.872,1.936,0.968g·100g-1·d-1,水煎濃縮成0

6、.6ml·100g-1·d-1),每天1次,連續(xù)60d。治療性用藥部分:陰性對照組(NC)大鼠按0.5ml·100g-1·d-1腹腔注射生理鹽水,連續(xù)60d后灌胃生理鹽水0.6ml·100g-1·d-1,連續(xù)60d。自然恢復(fù)組(SR)大鼠腹腔注射D半乳糖,連續(xù)60d后正常喂養(yǎng)60d。HS)、低(Tl)劑量組大鼠腹腔注射D半乳糖,連續(xù)60d后分別灌胃何首烏飲(劑量同上),每天1次,連續(xù)60d?! ?.4新鮮標(biāo)本的取材  各組大鼠末次給藥后1h,10%水合氯醛(0.3ml/100mg)腹腔注射麻醉,剪開頸部皮膚,分離并摘取下頜下腺,置液

7、氮中保存?zhèn)溆??! ?.5組織衰老特異性β  半乳糖苷酶冰凍切片的制備及染色準(zhǔn)備厚為10μm的冰凍切片,按照試劑說明書的要求,操作完成后封片即刻在光學(xué)顯微鏡下觀察和計數(shù),表達(dá)β半乳糖苷酶活性的地方呈藍(lán)色,每組取3張切片,每張切片隨機(jī)觀察3個視野,計算視野中每100個細(xì)胞中陽性細(xì)胞率。  1.6統(tǒng)計學(xué)方法  資料分析采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件完成。計量資料描述采用x±s,組間比較行單因素方差分析,組間多重比較用SNKq檢驗(yàn)?! ?結(jié)果  β半乳糖苷酶檢測顯示胞漿呈深藍(lán)色者為陽性細(xì)胞(圖1),表明細(xì)胞處于衰老狀態(tài)。方差分析結(jié)果顯示,預(yù)

8、防性實(shí)驗(yàn)部分的組間β半乳糖苷酶表達(dá),M組衰老細(xì)胞數(shù)目多于N組和各預(yù)防性用藥組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01);治療性實(shí)驗(yàn)部分的組間β半乳糖苷酶表達(dá),用藥各組與SR組相比,衰老細(xì)胞數(shù)目明顯

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