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1、常用殺蟲中藥殺蟲效果比較及其配伍的初步研究近年來從植物中尋找殺蟲活性物質(zhì)是目前研究開發(fā)無公害農(nóng)藥的重要途徑之一[1]。中草藥不僅具有醫(yī)療保健作用，而且還具有殺蟲的作用[2]。我國自20世紀(jì)30年代開始，曾對煙草、魚藤、巴豆、百部等殺蟲植物進(jìn)行過比較廣泛的研究[3]。進(jìn)入20世紀(jì)90年代，對有殺蟲活性的植物資源又作了進(jìn)一步的調(diào)查研究。對單味藥的研究較多，尤其是對其有效成分的研究[4]。王氏等[5]分別對蒼耳子用不同溶劑提取，發(fā)現(xiàn)不同溶劑提取物對菜粉蝶的作用各不相同。胡氏等[6]采用活體及盆栽試驗研究水煎液提取的苦楝皮活性成分對蠐螬、金針蟲殺蟲效果，
2、顯示苦楝皮水煮液對地下害蟲有殺滅作用。本實(shí)驗選取10種中藥，采用乙醇回流提取和水提取2種方法，選用標(biāo)準(zhǔn)試蟲在實(shí)驗條件下進(jìn)行嚴(yán)格的生物測定，測定這些中藥的殺蟲作用，為研制新的植物源農(nóng)藥奠定基礎(chǔ)。 1材料與方法 1.1供試?yán)ハx 黏蟲Mythimnaseparate引自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院敏感體系，室內(nèi)自然條件下飼養(yǎng)，實(shí)驗時挑選整齊一致的幼蟲供試。甘藍(lán)蚜Brevicorynebrassicae和朱砂葉螨Teranychuscinnbarinus均采自甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院應(yīng)用昆蟲研究溫室。 1.2供試中藥 百部、蒼耳子、苦參、丁香、甘遂、瑞香狼毒、藜蘆
3、、苦皮藤、苦楝皮、雷公藤，甘肅中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中藥房?！ ?.3主要試劑與儀器 無水乙醇，分析純，天津市得思化學(xué)試劑有限公司。DHP-9272型電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司），QE-10A型高速粉碎機(jī)（武義科技有限公司），R-210型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士BUCHI公司）?！ ?.4中藥活性部位提取 將上述中藥在小型粉碎機(jī)上粉碎，過10目篩制成粗粉，每味中藥分別稱取40g放入圓底燒瓶，分別用純水和80%乙醇電熱套加熱提取2次，第1次加8倍量溶劑，第2次加6倍量溶劑，每次提取時間為1h；提取完畢后，抽濾，將2次濾液合并，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃
4、縮，最后得到較濃油狀或漿狀的原粉粗體物，經(jīng)體積測量，濃縮液1mL相當(dāng)于1g原藥材，即濃度為1g/mL。供生物測定試驗使用?！ ?.5生物測定方法 1.5.1載玻片浸漬法參照聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織推薦的測定螨類抗藥性的標(biāo)準(zhǔn)方法載玻片浸漬法[7]加以改進(jìn)。粘在玻片雙面膠帶上的供試螨在溫度（26±1）℃、濕度60%～80%的室內(nèi)環(huán)境下放置4h，然后用雙目解剖鏡檢查，剔除死亡和不活潑的個體，記載總的活螨數(shù)，將帶螨的一端浸入事先配好的藥液中，6s后取出，迅速用剪好的三角濾紙將周圍多余的水吸干，溫度（26±1）℃、濕度60%～80
5、%，光照明暗交替16h/8h培養(yǎng)48h，每24h檢查1次。用毛筆輕觸其身體，以螨足不動者為死亡。每個濃度5個處理。實(shí)驗重復(fù)3次?！ ?.5.2微量點(diǎn)滴法參照文獻(xiàn)[8]微量點(diǎn)滴法并加以改進(jìn)。在培養(yǎng)皿中墊入濾紙，保濕，剪取新鮮油菜葉放入培養(yǎng)皿中。將每味中藥提取液分別稀釋5個不同系列濃度，由低濃度開始給甘藍(lán)蚜給藥，用虹吸管取1μL點(diǎn)滴在甘藍(lán)蚜背部，分別在24h和48h進(jìn)行觀察，用毛筆輕觸蟲體，不動者視為死亡。實(shí)驗重復(fù)3次?！ ?.5.3蟲體浸漬法在培養(yǎng)皿中墊入濾紙，保濕，剪取新鮮小麥葉子放入培養(yǎng)皿中。將提取液稀釋為5個不同系列濃度，倒入小燒杯中，
6、挑取同日齡同樣大小黏蟲10只（每個濃度各10只），將其蟲體浸漬在藥液中10s，將其表面液體用濾紙吸干，然后用鑷子輕輕夾起，放入培養(yǎng)皿中，將培養(yǎng)皿放入25℃恒溫培養(yǎng)箱中，24h和48h檢查死亡情況，用毛筆輕觸身體，不動者和不能爬行者視為死亡。實(shí)驗重復(fù)3次。 1.6統(tǒng)計學(xué)方法 采用Excel2003和SPSS13.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，以校正死亡率來表示實(shí)驗結(jié)果?！ ?結(jié)果 2.1載玻片浸漬法對朱砂葉螨的觸殺作用 中藥醇提物作用優(yōu)于中藥水提物，中藥水提物幾乎無作用，見表1?？嗥ぬ佟⒖鄥?、蒼耳子、甘遂、百部醇提物分別對朱砂葉螨具有很強(qiáng)的觸殺作用，
7、毒力較強(qiáng)。從校正死亡率分析，在相同濃度下，苦皮藤、苦參、蒼耳子、甘遂、百部對朱砂葉螨觸殺作用較其他5味藥強(qiáng)。當(dāng)這5味藥醇提物按照一定比例配伍后，單味藥稀釋100倍，其校正死亡率明顯高于單味藥醇提物，見表2?！ ?.2微量點(diǎn)滴法對甘藍(lán)蚜的觸殺作用 醇提物作用明顯優(yōu)于水提物，瑞香狼毒、百部、藜蘆、蒼耳子乙醇提取物對甘藍(lán)蚜有較強(qiáng)的殺滅作用，見表3。從校正死亡率分析，瑞香狼毒、百部、藜蘆、蒼耳子醇提物在相同的濃度下校正死亡率明顯高于其他幾味藥和中藥水提物，將這4味藥醇提物按照一定比例配伍后，復(fù)合物校正死亡率明顯高于單味藥，見表4?！ ?.3采用蟲體浸漬
8、法對黏蟲的觸殺作用 10味中藥水和醇提物對黏蟲的觸殺實(shí)驗中，只有百部醇提物對黏蟲具有觸殺作用，且毒力較強(qiáng)，其他幾味中藥水和醇提物均無作
