降脂復(fù)肝湯對(duì)高脂性脂肪肝模型大鼠肝臟保護(hù)作用及tnfα表達(dá)的影響

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1、降脂復(fù)肝湯對(duì)高脂性脂肪肝模型大鼠肝臟保護(hù)作用及TNFα表達(dá)的影響【摘要】目的觀察降脂復(fù)肝湯對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝大鼠肝組織病理學(xué)、肝功能、血脂及腫瘤壞死因子α(TNFα)的影響。方法建立大鼠非酒精性脂肪肝模型。造模結(jié)束后，將造模組隨機(jī)分為模型組、血脂康組和降脂復(fù)肝湯組，治療12echanism.MethodsTheSDratslydividedintonormal,model,XuezhikangandJiangzhiFugansoupgroups.Exceptthenormalgroup，theotherratsodelinedbyHEstaining,theliverfun

2、ctioneasuredandtheexpressionofTNFαmunohistochemistry.ResultsTheserumlevelsofalaninetransaminase(ALT),aspartictransaminase(AST)，totalcholesterol(TC),triglyceride(TG),loodelgroup.TheexpressionsofTNFαininJiangzhiFugansoupandXuezhikanggroupsodelgroup(P＜0.05),andtheeffectofJiangzhiFugansouporeobvious

3、(P＜0.05).ConclusionsJiangzhiFugansoupcanimprovethechangeofhepaticpathologyandfattydegenerationanddecreastheexpressionofTNFα,aybeoneofmechanismsofantiNAFLDinducedbyhighfattydiet.【Keyornecrosisfactorα非酒精性脂肪肝病(NAFLD)是遺傳、環(huán)境、代謝應(yīng)激等相關(guān)因素所致的以肝細(xì)胞脂肪變性為主的臨床病理綜合征〔1〕。由于NAFLD致病原因和發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前尚缺乏理想的針對(duì)性治療藥物。血脂康膠囊能

4、改善血脂異常，并能在一定程度上逆轉(zhuǎn)肝臟脂肪化進(jìn)程,是目前常用的治療藥物〔2〕。本實(shí)驗(yàn)采用降脂復(fù)肝湯對(duì)NAFLD進(jìn)行干預(yù)，并與血脂康膠囊進(jìn)行對(duì)照研究，探討降脂復(fù)肝湯治療NAFLD的療效和作用機(jī)制，為臨床治療NAFLD新藥的研制和開發(fā)提供理論依據(jù)。1材料與方法1.1動(dòng)物清潔SD大鼠60只，雄性，體重（150±10）g(重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。1.2主要藥品與試劑血脂康(北大維信生物科技有限公司)，降脂復(fù)肝湯由枸杞子、黃精、菟絲子、白術(shù)、茯苓、澤瀉、決明子、制半夏、丹參、郁金、赤芍、三棱、枳殼等十幾味中藥組成，按處方比例濃縮成1g/ml；TNFα抗體(武漢博士德公司)，肝功酶試劑盒(上

5、?？迫A東菱診斷用品公司)，血脂試劑盒(上海景源醫(yī)療器械公司)。1.3造模方法SD大鼠60只，隨機(jī)分為對(duì)照組10只，高脂飲食造模組50只，對(duì)照組大鼠每天予以標(biāo)準(zhǔn)普通大鼠飼料喂養(yǎng)，造模組大鼠每天予以高脂飼料(脂肪10％、膽固醇2％、膽鹽0.5％、蛋黃粉5％，標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料82.5％)喂養(yǎng)，連續(xù)12l/100g腹腔內(nèi)注射麻醉大鼠后心臟采血作血清生化檢測(cè)，然后處死大鼠，迅速取出肝臟稱重（即肝濕重）并計(jì)算肝臟指數(shù)（即肝濕重占體重的百分比）。HE染色光鏡下觀察肝組織病理學(xué)變化。1.5.2血清生化指標(biāo)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）及總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白

6、（HDL）及低密度脂蛋白（LDL）。1.5.3TNFα在肝組織中的表達(dá)采用免疫組化二步法檢測(cè)。TNFα陽性細(xì)胞表現(xiàn)為胞漿或胞核呈棕黃色或深棕黃色顆粒，在高倍顯微鏡下觀察每個(gè)視野內(nèi)陽性細(xì)胞個(gè)數(shù)，并用圖像分析軟件分析陽性面積。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS10.0軟件包，數(shù)據(jù)以x±s表示，組間比較采用方差分析和t檢驗(yàn)。2結(jié)果2.1肝組織肉眼觀察對(duì)照組大鼠肝組織紅潤，肝體積無增大；模型組大鼠腹腔肥大，脂肪組織豐富，肝體積增大明顯，包膜緊張，呈磚紅色，切面油膩感，呈典型脂肪肝外觀；降脂復(fù)肝湯組和血脂康組大鼠腹腔脂肪組織較模型組含量少，肝臟體積稍大、偏黃色，部分肝臟切面有油膩感。2.2肝組織鏡下觀

7、察對(duì)照組大鼠肝組織結(jié)構(gòu)完整、清晰，肝小葉結(jié)構(gòu)正常，中央靜脈大而壁薄，肝細(xì)胞排列成肝索，在中央靜脈周圍呈放射狀分布，細(xì)胞呈多邊形；模型組大鼠肝細(xì)胞普遍發(fā)生脂肪變性，肝細(xì)胞腫大變圓，胞漿疏松，內(nèi)含大的脂肪滴，中央靜脈周圍或匯管區(qū)灶性脂變及成片組織脂變，局部可見散在點(diǎn)狀壞死灶；降脂復(fù)肝湯組和血脂康組的肝脂肪變性程度明顯減輕，脂滴數(shù)量減少，肝細(xì)胞體積變小，肝細(xì)胞內(nèi)可見散在大小不等的圓形脂肪滴，中央靜脈及匯管區(qū)灶性脂肪變性。見圖1