赤芍中芍藥苷提取溶劑的選擇

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1、赤芍中芍藥苷提取溶劑的選擇【關(guān)鍵詞】赤芍；,,芍藥苷；,,高效液相色譜　　摘要：目的探討赤芍藥苷提取的最佳溶劑。方法分別用甲醇、75%乙醇、重蒸餾水提取赤藥中芍藥苷，用YethodsPaeoniflorinRadixpaeoniaeRubraethanol,75%ethanolandredistilledm×4.6mm)usingmethanol:0.05mol/LKH2PO4(32:68)asamobilephaseanddeterminedat230nm.ResultsThelinearcurveethanol,75%etha

2、nolandredistilledethanolishighlytoxic,redistilledm×4.6mm，10μm）；流動相為甲醇-磷酸二氫鉀（32：68），流速1ml/min；檢測波長230nm；柱溫25℃；進(jìn)樣量10μl。理論干塔板數(shù)6400?！　?.2對照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對照品10.00mg(120℃干燥恒重)置10ml容量瓶中，加流動相溶解稀釋至刻度搖勻，作為芍藥苷對照品溶液備用。　　2.3供試品溶液的制備精密稱取0.50g赤芍粉末，分別精密加甲醇、75%乙醇、重蒸餾水各50ml，稱定重量，冷浸4h，超聲

3、30min放冷，再稱定重量，用溶劑補(bǔ)足重量，搖勻，過濾，即得。　　2.4線性關(guān)系考察精密吸取上述芍藥苷對照品溶液0.10,0.20,0.50,1.00,2.00ml置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別注入含0.01，0.02，0.05，0.10,0.20μg/μl的對照品溶液10μl進(jìn)行測定。結(jié)果見表1，圖1。以峰面積（A）對濃度（C）作回歸計算，回歸方程為A=3.43×104C-31.8，r=0.9998?！　?.5精密度實驗精密吸取上述對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，芍藥苷對照品峰面積的RSD值為0.93%（n=5），表

4、明本法精密度良好?！　?.6重復(fù)性考察取同一批藥材樣品，按樣品制備方法平行制備5份，依法測定，3種溶劑的芍藥苷含量RSD值分別為1.00%、0.97%、1.30%，表明重現(xiàn)性良好?！　?.7回收率實驗采用加樣回收率法，精密稱取已知含量的赤芍粉末，分別定量加入芍藥苷對照品，按照供試品溶液的制備方法操作，依上次色譜條件下進(jìn)行測定甲醇、乙醇、水作溶劑時芍藥苷平均回收率分別為99.77%，99.87%，99.16%，RSD分別為3.05%，2.47%，1.67%。結(jié)果見表2。表2芍藥苷含量測定的加樣回收率（略）　　2.9樣品測定精密吸取上

5、述供試品溶液，稀釋至合適濃度進(jìn)樣10μl，依上述色譜條件下進(jìn)行測定，代入回歸方程計算所得含量。結(jié)果見表3，圖2~4。表3赤芍樣品中芍藥苷測定結(jié)果(略)　　3討論　　3.1我們采用HPLC法，分別用75%乙醇、重蒸餾水提取，與《中國藥典》2000年版赤芍項下芍藥苷含量測定的甲醇提取法進(jìn)行對照，結(jié)果表明，以甲醇、75%乙醇或重蒸餾水作溶劑提取赤芍中芍藥苷的含量無顯著性差異（P＞0.05）?！　?.2用重蒸餾水作溶劑采用HPLC法直接測定赤芍提取液中芍藥苷含量，具有操作簡單、柱效高、分離度好、譜圖清晰、無干擾、結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)點，因而可作為

6、赤芍內(nèi)質(zhì)量控制的方法?！　?.3在3種溶劑中，相對《中國藥典》2000年版中選用甲醇做溶劑，使用75%乙醇、重蒸餾水具有更好的安全性，可以避免甲醇較強(qiáng)的毒性對檢測操作人員的傷害，還可以降低對環(huán)境的污染；并且重蒸餾水廉價，可以降低檢測成本。所以我們認(rèn)為使用重蒸餾水優(yōu)于甲醇和乙醇。　　3.4該方法還可用于復(fù)方中芍藥苷含量的提取和測定，同時，本研究也為進(jìn)一步探討中藥藥理學(xué)和藥代動力學(xué)提供了實驗基礎(chǔ)，具有重要意義。