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1、KX-21血細(xì)胞分析儀影響因素及復(fù)檢探討賈得志聶梅楊東劉芳(勝利石油管理局濱海醫(yī)院山東東營(yíng)257237)【中圖分類號(hào)】R446.11+3【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1672-5085(2013)1-0117-02【關(guān)鍵詞】血細(xì)胞分析儀影響因素手工復(fù)檢木文重點(diǎn)討論溫度對(duì)血細(xì)胞分析各項(xiàng)參數(shù)的影響；白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定、血小板計(jì)數(shù)等復(fù)檢原因及復(fù)檢率。1材料1.1KX—21血細(xì)胞分析儀，成套試劑由東亞公司提供，質(zhì)控物由四川通廣公司提供。1.2抗凝劑為0.37mol/lEDTA-K2。1.3日木產(chǎn)奧林巴斯顯微鏡
2、。1.4鏡檢用白細(xì)胞稀釋液為2%醋酸。1.5鏡檢用血小板計(jì)數(shù)液為30g鹽酸普魯卡因，2g氯化鈉，加蒸餾水至1L,溶解后加甲醛2.0ml,置棕色瓶中，4°C保存。2方法2.1用塑料注射器抽取靜脈血1ml,立即加入含10ul抗凝劑的塑料試管中，加蓋，輕輕搖勻，復(fù)檢也用此抗凝血。2.2KX—21血細(xì)胞分析儀按操作手冊(cè)操作,所有試驗(yàn)均在3小時(shí)內(nèi)完成。2.3使用質(zhì)控品，每H做室內(nèi)質(zhì)控，以此監(jiān)視儀器工作狀態(tài)。2.4過(guò)程2.4.1試劑準(zhǔn)備:取同批號(hào)的溶血?jiǎng)?、稀釋液分為三份，分別置5°C冰箱、20°C及35°C水浴箱控制
3、溫度。2.4.2標(biāo)木來(lái)源：取門(mén)診體檢正常人的20份靜脈血。2.4.3標(biāo)木測(cè)試：將儀器換上5°C試劑，并導(dǎo)引試劑2次，接著背景計(jì)數(shù)3次，取上述20份標(biāo)木進(jìn)行檢測(cè)其WBC、LY、MO、GR、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、PCT、MPV、PDW數(shù)值及WBC、RBC、PLT三個(gè)直方圖，測(cè)試過(guò)程中對(duì)試劑采取保溫措施，并盡量用空調(diào)使室溫接近試劑溫度。同上法，換上20°C、35°C試劑檢測(cè)上述20份標(biāo)本。2.5白細(xì)胞和血小板復(fù)檢按常規(guī)顯微鏡計(jì)數(shù)。2.6高乳糜及高膽紅素標(biāo)本以1500r
4、/min離心10min,盡可能完全晰出血漿，再加入等量的生理鹽水，混勻后儀器測(cè)定。2.7進(jìn)行冷球蛋白定性試驗(yàn)［1］。3結(jié)果3.1檢測(cè)結(jié)果3.1.120°C與5°C條件下檢測(cè)值比較，兩條件下的RBC、PLT直方圖未見(jiàn)明顯異常，但WBC直方圖差異很大,5°C條件下的WBC直方圖比20°C條件下的WBC直方圖明顯左移。20°C與35°C條件下檢測(cè)值比較，兩條件下的RBC、PLT直方圖未見(jiàn)明顯異常，WBC直方圖差異很大，35°C條件下WBC直方圖比20°C條件下的WBC直方圖明顯右移。3.1.3統(tǒng)計(jì)分析：采用配對(duì)
5、t檢驗(yàn)，用t值和P表示，比較20°C與5°C和20°C與35°C條件下檢測(cè)值差異的顯著性及變化趨勢(shì)。3.2本院門(mén)診及病房病人756例，其中白細(xì)胞復(fù)檢65例，血紅蛋白復(fù)檢41例，血小板復(fù)檢101例，白細(xì)胞分類復(fù)檢165例，復(fù)檢結(jié)果見(jiàn)表1，統(tǒng)計(jì)方法用配對(duì)t檢驗(yàn)。表1KX—21與復(fù)檢結(jié)果比較4討論4.1溫度改變后各參數(shù)出現(xiàn)顯著性差異的原因分析4.1.1溫度的改變對(duì)紅細(xì)胞的體積影響較大。4.1.2溶血?jiǎng)┲械谋砻婊钚詣┮资軠囟鹊挠绊懀?］。4.2溫度改變后各參數(shù)無(wú)顯著性差異的原因分析4.2.1白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板
6、是由阻抗法原理檢測(cè)的，當(dāng)由細(xì)胞和電解質(zhì)組成的混懸液通過(guò)計(jì)數(shù)小孔吋，由于細(xì)胞是不良導(dǎo)體，每經(jīng)過(guò)一個(gè)細(xì)胞就會(huì)產(chǎn)生一個(gè)瞬間的電阻變化，依靠變化次數(shù)表示細(xì)胞的數(shù)量，變化的人小反映細(xì)胞的大小，在所討論的溫度范圍內(nèi)，細(xì)胞的數(shù)量不會(huì)因溫度的變化而變化，因此上述三參數(shù)受溫度的影響較小。4.2.2血紅蛋白是采用氰化高鐵血紅蛋白比色法測(cè)定，該法特點(diǎn)是顯色穩(wěn)定，受溫度影響較小。MCH是由公式HGB/RBC計(jì)算而來(lái)，因而冋樣受溫度影響較小。PCT、MPV、PDW主要與血小板的結(jié)構(gòu)緊密，受溫度影響小有關(guān)。4.3臨床標(biāo)本復(fù)檢討論4.
7、3.1白細(xì)胞計(jì)數(shù)復(fù)檢引起白細(xì)胞計(jì)數(shù)增高的原因很多，如血小板聚集，有核紅細(xì)胞增多，冷球蛋白在室溫的非定形聚集等。4.3.2血紅蛋白的復(fù)檢高乳糜血癥、高膽紅素血癥、球蛋白增多癥及白細(xì)胞大于100×109/L的標(biāo)本都能使血紅蛋白假性增高。我們主要依據(jù)MCHC大于350g/L作為復(fù)檢指征。4.3.3血小板計(jì)數(shù)的復(fù)檢我們發(fā)現(xiàn)標(biāo)本采集對(duì)血小板計(jì)數(shù)有較大影響，采血過(guò)程可促使血小板聚集，如穿刺不順、組織液混入、混勻不均等。某些疾病標(biāo)本影響更大，如糖尿病、腎小球腎腎炎等。4.3.4白細(xì)胞分類的推片復(fù)檢關(guān)于血細(xì)胞
8、分析儀白細(xì)胞分類己奮許多報(bào)道，本文未做深入探討。有人認(rèn)為在各種參數(shù)及直方圖均正常的情況下，結(jié)合臨床表現(xiàn)，儀器分類可做篩選手段。實(shí)際工作中隨著儀器指標(biāo)的大量增加，不少儀器臨床意義不明確或重復(fù)，而與此形成對(duì)照的是許多顯微鏡檢查有明確價(jià)值的指標(biāo)不斷丟失。建議實(shí)驗(yàn)室應(yīng)在重視儀器操作的同時(shí)，組織人力加強(qiáng)手工復(fù)檢，確保為臨床提供更多冇價(jià)值的陽(yáng)性參數(shù)。參考文獻(xiàn)［1】王國(guó)麗，廖廷錫，董向惠，等.冷蕁麻疹患者血清冷球蛋白等的檢驗(yàn)［」］.預(yù)防醫(yī)學(xué)
