資源描述：
《白刺總黃酮對血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的研究論文》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、白刺總黃酮對血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用的研究論文張義軍樊蓮蓮張永軍李連疆鄧峰美唐克韓榮【摘要】目的研究白刺總黃酮對血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。方法用過氧化氫（H2O2）誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷,用酶標(biāo)儀檢測細(xì)胞內(nèi)一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）以評價氧化的程度。結(jié)果不同濃度的白刺總黃酮可促進(jìn)受損的內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)，同時提高SOD、NOS、GSH-Px活力和NO水平。結(jié)論白刺總黃酮具有保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的作用，其機(jī)制可能與其抗氧化作用有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】白刺總黃酮內(nèi)皮細(xì)胞過氧化氫抗氧化白刺為我國的特有種，在新疆干
2、旱地區(qū)分布廣泛，其果實中含有豐富的營養(yǎng)成分和活性物質(zhì)，可入藥，具有調(diào)經(jīng)活血，消食健脾等功效。課題組對白刺總黃酮進(jìn)行分離發(fā)現(xiàn)含有槲皮素、山萘酚、異鼠李素等黃酮單體化合物.freeloFormo公司)；雙向磁力攪拌器(79-2江蘇金壇市醫(yī)療儀器廠)；電子分析天平(AE-200上海梅特勒-托利多儀器有限公司)；倒置相差顯微鏡(BDS200-PH奧特光學(xué)OPTEC)；酶標(biāo)儀(SN-3001ThermoFormo公司)；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(DHG-9240上海齊欣科學(xué)儀器有限公司)；立式電熱壓力蒸氣滅菌器(LDZX-30FBS上海申安醫(yī)療器械廠)。2方法2.1白刺總黃酮的制備取白刺果，
3、75%乙醇進(jìn)行連續(xù)回流提取4次，每次加75%乙醇7倍量回流2h，分別過濾濃縮至濃膏無醇味，用2.5％碳酸鈉(pH8)溶解濃膏,過濾；過濾液用50%鹽酸調(diào)至pH為5,過濾得沉淀用水洗至中性，烘干。利用聚酰胺柱層析分離得白刺總黃酮。對其用SephadexLH-20進(jìn)行分離純化得槲皮素［5］。2.2HUVEC的培養(yǎng)及分組HUVEC的原代培養(yǎng):按文獻(xiàn)［6］報道以及在實驗中的摸索對方法行進(jìn)了改進(jìn)。2007-10～2008-04,在我院婦產(chǎn)科產(chǎn)嬰室收集健康胎兒臍帶20～40cm,用0.1%膠原蛋白酶得到人胎兒臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞。培養(yǎng)于ECM培養(yǎng)液中,置于37℃下5%CO2培養(yǎng)箱中。進(jìn)行培養(yǎng)傳
4、到第3代用于試驗。實驗分正常對照組、陽性對照組（加75μmol/LH2O2＋槲皮素80μmol/L）、模型組(僅加75μmol/LH2O2)和白刺總黃酮低、中、高3個劑量組(均加75μmol/LH2O2及分別加20μmol/L白刺總黃酮、40μmol/L白刺總黃酮、80μmol/L白刺總黃酮),每組6例。將2×104個/孔HUVEC接種6孔板,在上述條件下孵育24h，分別加入上述濃度的槲皮素和白刺總黃酮，各組細(xì)胞孵育24h，然后除正常對照組外加入75μmol/LH2O2誘導(dǎo)損傷，繼續(xù)培養(yǎng)4h后終止培養(yǎng)，進(jìn)行有關(guān)指標(biāo)的測定。2.3檢測方法NO，NOS，SOD，GSH-Px的具體
5、測定方法參照試劑盒說明書進(jìn)行。3結(jié)果3.1白刺總黃酮對受損內(nèi)皮細(xì)胞NO含量和總型NOS、結(jié)構(gòu)型NOS活力的影響NO不僅能調(diào)節(jié)血管舒張，還是一種重要的抗炎分子,.freelas-Ecker，AntjeLindecke，ei-pingShen，Zhi-hongYe，etal.Inhibitiveeffectsofanti-oxidativevitaminsonmannitol-inducedapoptosisofvascularendothelialcells［J］.JZhejiangUnivSciB，2006，7(10):825.［5］樊蓮蓮,劉金榮,王航宇，等.白刺果中總黃酮
6、提取工藝的研究［J］.中國藥房，2007，18（3）：186.［6］張敬各，張瑞明，李著華.同型半胱氨酸對人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮合酶基因表達(dá)的影響［J］.四川生理科學(xué)雜志，2006，28(4)：151.［7］LandmesserU,DikalovS,PriceSR,etal.Oxidationoftetrahydrobiopterinleadstouncouplingofendothelialcellnitricoxidesynthaseinhypertension［J］.JClinInvest,2003,111(8):1201.［8］DoraAtanassova,Pana
7、giotisKefalas,ElefteriaPsillakis.Measuringtheantioxidantactivityofoliveoilmilliluminescence［J］.EnvironmentInternational,2005,31:275.［9］SybillThomas-Ecker，AntjeLindecke，iddleton,LaureAmerich,RegisGayon,etal.Endothelialcellphenotypesintherheumatoidsynovium
