低離子凝膠技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用

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1、低離子凝膠技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用（甘肅省靈臺(tái)縣皇甫謐中醫(yī)院；甘肅平?jīng)?44400）【摘要】目的研究低離子凝膠技術(shù)在臨床輸血中的應(yīng)用價(jià)值。方法將在我院2009年以來(lái)388例受血者及供血者同時(shí)釆用低離子凝膠技術(shù)和鹽水法進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)。結(jié)果采用鹽水法，388例受血者結(jié)果呈陽(yáng)性為3例，陽(yáng)性的檢出率為0.77%;采用低離子凝膠技術(shù)388例受血者結(jié)果陽(yáng)性為9例,檢出率2.32%,況且鹽水法所檢出的三例顯微鏡下紅細(xì)胞可看見3-4個(gè)凝集或呈斷鏈狀排列，而低離子凝膠技術(shù)檢出的9例可以用肉眼觀察到紅細(xì)胞有可見凝集。結(jié)論低離子凝膠技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中有著快速，有效，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果明顯，準(zhǔn)確性高靈敏性好等特

2、點(diǎn)，可有效防止臨床溶血性輸血反應(yīng)，從而確保輸血安全?！娟P(guān)鍵詞】交叉配血低離子凝膠技術(shù)隨著臨床輸血的廣泛應(yīng)用，輸血成為臨床貧血病人一種常見的治療手段，輸血安全是醫(yī)務(wù)工作者面臨的重要課題，而血型鑒定及交叉配血又是安全輸血的最重要的環(huán)節(jié),為確保臨床輸血安全，防止和減少溶血性輸血反應(yīng)和同種免疫引起的非溶血性輸血反應(yīng)的發(fā)生，（1）這也對(duì)輸血科提出嚴(yán)格要求，我院自2009年以來(lái)，388例輸血病人輸血科通過(guò)ABO血型和R（h）血型鑒定、采用鹽水介質(zhì)和低離子凝膠技術(shù)進(jìn)行臨床交叉配血，抗體篩查、以確保臨床輸血安全，木文重點(diǎn)討論低離子凝膠技術(shù)在臨床輸血檢驗(yàn)中的應(yīng)用價(jià)值。1資料和方法1.1一般資料在我院2010

3、年一月至2015年12月份我院住院期間收治的病人388例，其中女279例，男109例，年齡18到82歲，所有受血者和供血者的血樣均采用ABO血型和R（h＞血型鑒定、鹽水介質(zhì)和低離子凝膠技術(shù)法進(jìn)行交叉配血。（1）我院采用國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2009第3400076號(hào)，凝聚胺介質(zhì)試劑115112,（臺(tái)資）珠海災(zāi)索生物有限公司。產(chǎn)品特點(diǎn)：靈敏度高，特異性強(qiáng)，性能穩(wěn)定,保存條件：2-8°C。1.2.2實(shí)驗(yàn)原理低離子凝膠介質(zhì)的檢驗(yàn)原理是紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷，以避免其產(chǎn)生自發(fā)性凝集，當(dāng)紅細(xì)胞懸浮在電解質(zhì)時(shí)，陽(yáng)離子會(huì)被紅胞的負(fù)電荷所吸引，此吋紅細(xì)胞則被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞，而形成Zeta電位，Ze

4、ta電位決定紅細(xì)胞之間的排斥作用。而凝聚胺是一種多價(jià)陽(yáng)離子溴化已二甲胺多聚物、具冇中和肝素的作用，溶解后產(chǎn)生許多正電荷，能中和紅細(xì)胞表面唾液酸所產(chǎn)生的負(fù)電荷。凝聚胺技術(shù)首先利用低離子溶液UM,降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度，減少紅細(xì)胞周圍的陽(yáng)離子云，以促進(jìn)紅細(xì)胞和病人血清中抗體結(jié)合。然后加入凝聚胺(Polybrene)溶液，它是一種高價(jià)離子多聚物，，肝素中和劑溶解后能產(chǎn)生很多正電荷，可以中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷，使紅細(xì)胞Zeta電位降低，縮短紅細(xì)胞之間的距離，使紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的凝聚。最后加入懸浮液(Resuspending),Resuspending)具宵中和Polybrene陽(yáng)離子的作用，是正

5、常的紅細(xì)胞非特異性凝聚散開，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性：如果紅細(xì)胞被相應(yīng)的抗體致敏，則會(huì)被凝聚胺凝結(jié)，凝聚就不會(huì)散開，實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性，維持較長(zhǎng)吋間的凝聚狀態(tài)，由此可以特異性的檢出特異的血型抗原或抗體(IgG、IgM)(3).1.3方法1.3.1低離子凝膠技術(shù)交叉配血低離子凝膠技術(shù)交叉配血：取受血者的血清一滴加入主測(cè)管，再加入一滴3-5%供血者紅細(xì)胞懸液2-3滴:取一滴供血者血清加入次測(cè)管，再加受血者3-5%的紅細(xì)胞懸液2-3滴，然后在主測(cè)，次測(cè)均加入0.7ML低離子介質(zhì)兩滴，混勻，然后放置30秒，加入(Polybrene)溶液兩滴，混勻，置3400轉(zhuǎn)離心機(jī)離心10秒，然后到掉上清液，不要瀝干，讓管底殘

6、留0.1ML液體，輕輕搖動(dòng)管底，目測(cè)管底有無(wú)凝集，如無(wú)凝集則必須S做，最后加入Resuspending試劑兩滴，輕輕搖動(dòng)管底60秒觀察凝集是否散開，如果散開，說(shuō)明Polybrene引起的非特異性凝聚，配血結(jié)果相合，如果凝集不散開，則為紅細(xì)胞抗原結(jié)合的特異性反應(yīng)，配血結(jié)果不和，如反應(yīng)可凝，則進(jìn)一步倒在玻片上觀察。1.3.2篩查不規(guī)則抗體取試管三支，各加入被檢血清或血漿兩滴，分別加入3-5%篩檢紅細(xì)胞懸液各一滴，其他操作方法和凝集胺交叉配血方法相同，1.3.3鹽水法鹽水法配血法和低離子凝膠技術(shù)交叉配血凝集配血法同時(shí)進(jìn)行。取受血者的血清一滴加入主測(cè)管，再加入一滴3-5%供血者紅細(xì)胞懸液2-3滴:

7、取一滴供血者血清加入次測(cè)管，再加受血者3-5°%的紅細(xì)胞懸液2-3,3400轉(zhuǎn)離心10秒，觀察。采用鹽水配血介質(zhì)法只能發(fā)現(xiàn)完全抗體，如結(jié)果為陰性，可將原標(biāo)本接著做凝集胺，木瓜酶，抗人球蛋白配血法，以檢出不完全抗體，2結(jié)果：采用鹽水介質(zhì)交叉配血，388例結(jié)果呈陽(yáng)性為3例，陽(yáng)性的檢出率為0.77%;采用低離子凝膠技術(shù)交叉配血388例結(jié)果陽(yáng)性為9例，檢出率2.32%,況且鹽水法所檢出的三例顯微鏡下紅細(xì)胞可看見3-4個(gè)凝集，而低