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《茶黃素對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因的影響》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、茶黃素對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷后細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因的影響作者：蔡飛，李彩蓉，吳基良，閔清，歐陽(yáng)昌漢，余薇【摘要】 目的探討茶黃素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后細(xì)胞凋亡及凋亡相關(guān)基因的影響。方法采用線拴法建立大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞(MCAO)模型。大鼠隨機(jī)分為缺血組，假手術(shù)組，茶黃素小劑量組(10mg/kg)，茶黃素大劑量組(20mg/kg)。缺血2h，再灌注24h后處死動(dòng)物，于再灌注前舌下靜脈給藥。測(cè)定大鼠神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，腦梗塞體積，腦組織MDA，NO含量以及SOD和GSH-Px活性，采用TUNEL法檢測(cè)腦組織細(xì)胞凋亡，采用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)凋亡
2、相關(guān)基因Caspase-3的表達(dá)。結(jié)果茶黃素治療組與模型組相比神經(jīng)系統(tǒng)癥狀減輕，腦梗塞體積縮小，腦組織MDA，NO含量減少，SOD和GSH-Px活性增加。腦組織細(xì)胞凋亡及Caspase-3表達(dá)減少。結(jié)論茶黃素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與抗氧化和抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】茶黃素缺血再灌注細(xì)胞凋亡Caspase-3 Abstract：ObjectiveTostudytheeffectoftheaflavinoncellapoptosisandapoptosisrelatedgeneafterfocalcerebra
3、lischemiainjuryinaratmodelofmiddlecerebralarteryocclusion(MCAO).MethodsMaleSprague-Daeasured.Thecontentsofmalondialdehyde(MDA),andnitricoxide(NO)inbrainsutase(SOD)andglutathioneperoxidase(GSH-Px)munohistochemistrytodetecttheexpressionofcaspase-3protEinicgroup.Theactivitiesof
4、SODandGSH-Pxintheaflavin-treatedgroupsicgroup.Theaflavin-treatmentalsodecreasedneuronalapoptosisandtheexpressionofcaspase-3protEIn.ConclusionTheaflavinhasprotectiveeffectsonfocalcerebralischemicreperfusioninjurythroughinhibitingoxidativestressandlesseningapoptosis. Keyia-re
5、perfusion;Apoptosis;Caspase-3 據(jù)國(guó)內(nèi)外流行病學(xué)調(diào)查表明，腦血管病是一類嚴(yán)重威脅人類健康和壽命的常見病，多發(fā)病，是目前世界上導(dǎo)致人類死亡的三大主要疾病之一。在我國(guó)，腦血管病已經(jīng)上升為第一位致死致殘疾病。腦缺血后能量代謝障礙、細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載及其所引發(fā)的谷氨酸的興奮性毒性反應(yīng)是神經(jīng)元損傷的始動(dòng)環(huán)節(jié)，由此產(chǎn)生一系列生化反應(yīng)。在腦缺血損傷中，細(xì)胞凋亡是由各種凋亡刺激信號(hào)始動(dòng)，受細(xì)胞內(nèi)源性基因、酶類和信號(hào)傳導(dǎo)途徑等調(diào)控的“瀑布式”激活過程。自由基、細(xì)胞內(nèi)鈣超載等均是促進(jìn)凋亡的誘導(dǎo)因素。這些因素都是通過一定的信號(hào)傳導(dǎo)途徑激
6、活凋亡相關(guān)基因，然后將信號(hào)傳遞到核內(nèi)切酶，而執(zhí)行死亡的功能。其中蛋白酶與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，凋亡的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的、由caspase家族成員介導(dǎo)的蛋白酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)過程。進(jìn)一步探討并揭示腦缺血/再灌注時(shí)損傷的機(jī)制，有助于采取相應(yīng)的干預(yù)措施阻斷炎癥的級(jí)聯(lián)反應(yīng),減少神經(jīng)元死亡，對(duì)臨床更有效地防治缺血再灌注性腦損傷具有十分重要的理論和實(shí)際意義。茶黃素（theaflavin,TF1）是紅茶中的多酚類化合物之一，具有很強(qiáng)的抗氧化、抗炎、清除自由基、抗腫瘤等作用［1～4］。我們首次觀察到茶黃素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷有保護(hù)作用，并發(fā)現(xiàn)其保護(hù)機(jī)制可能與抗氧化和
7、抑制細(xì)胞凋亡有關(guān)?！ ?材料與方法 1.1試劑 茶黃素(MicroSourceDiscoverySystem,Inc.Gaylordsville,CT)，純度98％。GSH-Px，MDA，SOD試劑盒（南京建成）。其余試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純?！ ?.2動(dòng)物模型 雄性CAO）模型以Longa［4］法為標(biāo)準(zhǔn)，選用尼龍線栓塞右側(cè)大腦中動(dòng)脈。10%的水合氯醛0.35ml·（100g）-1腹腔注射麻醉，頸部皮膚用碘伏消毒，作正中皮膚切口，分離肌肉，找出右頸總動(dòng)脈（CCA）并游離，穿線備用。沿右側(cè)頸總動(dòng)脈向頭端分離頸內(nèi)、外動(dòng)脈，頸外動(dòng)脈（ECA）及其分支
8、穿線結(jié)扎。沿頸內(nèi)動(dòng)脈（ICA）向顱內(nèi)方向分離，至翼額動(dòng)脈，分離翼額動(dòng)脈并于其根部結(jié)扎。然后結(jié)扎頸總動(dòng)脈。在頸總與頸內(nèi)外動(dòng)脈分叉處剪一小口，用0.2mm
