大黃酚對(duì)ad模型小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響

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1、大黃酚對(duì)AD模型小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響作者：董曉華張海紅張丹參張力丁杰【摘要】目的觀察大黃酚對(duì)β淀粉樣肽（Aβ2535）致AD小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙及腦組織過氧化氫（H2O2）含量、過氧化氫酶（CAT）、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶活性的影響。方法給小鼠一次性腦室內(nèi)注射凝聚態(tài)Aβ25353μg（1.0mmol/L）造AD模型，造模后腹腔注射藥物或溶劑，連續(xù)注射14d。采用Y迷宮法測試小鼠學(xué)習(xí)記憶能力，每天每鼠訓(xùn)練10次，連續(xù)測試5d，以正確反應(yīng)次數(shù)作為觀測指標(biāo)。用比色法測定小鼠腦組織H2O2含量、CAT、Na+K+ATP酶和Ca2+

2、ATP酶活性。結(jié)果與對(duì)照組相比，模型組正確反應(yīng)次數(shù)降低，腦內(nèi)H2O2含量升高；CAT、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶活性顯著降低；與模型組比較，大黃酚各組小鼠正確反應(yīng)次數(shù)從測試2d起明顯增加，小鼠腦內(nèi)H2O2含量明顯降低，而CAT、Na+K+ATP酶和Ca2+ATP酶活性顯著升高。結(jié)論大黃酚對(duì)Aβ2535致AD小鼠記憶障礙有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與抗氧化、改善能量代謝有關(guān)。【關(guān)鍵詞】大黃酚；β淀粉樣肽；學(xué)習(xí)記憶；過氧化氫；過氧化氫酶；ATP酶【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectsofc

3、hrysophanolonabilitiesoflearningandmemory,contentsofH2O2,activitiesofcatalase(CAT),Na+K+ATPaseandCa2+ATPaseinbraintissueinADmodelmiceinducedbyAβ2535.MethodsTheaggregatedAβ25353μl(1mmol/L)icetomakeADmodel.Thesolventinisteredbyipforcontrolandmodelgroup,g/kg)emoryinmiceazete

4、stfor5days,inouseeseverydayandthenumberofcorrectresponseiceetry.Resultsparedberofcorrectresponseodelgroup.berg/kg)fromthesecondday,thecontentsofH2O2odelgroupsignificantly.ConclusionsChrysophanolshoemoryimpairmentinADmiceinducedbyAβ2535.Possiblemechanismsareinvolvedintheaction

5、sofantioxidationandimprovingenergymetabolism.【Keyyloidpeptide；Learningandmemory；H2O2；catalase；ATPase　　阿爾茨海默病(AD)是一種較常見的神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，其主要臨床特征為記憶減退和認(rèn)知功能障礙，β淀粉樣蛋白在腦內(nèi)沉積形成老年斑是AD的發(fā)病基礎(chǔ)。近年來研究表明大黃酚能改善衰老動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶障礙〔1〕，降低大鼠腦內(nèi)過氧化脂質(zhì)含量〔2〕，提示抗氧化作用可能是其抗衰老作用的機(jī)制之一，但大黃酚抗氧化作用的具體作用環(huán)節(jié)及對(duì)腦組織能量代謝的影響尚未見報(bào)道。本研

6、究采用一次性直接側(cè)腦室注射凝聚態(tài)β淀粉樣肽（Aβ2535）的方法建立AD小鼠模型，進(jìn)一步探討大黃酚改善學(xué)習(xí)記憶作用的機(jī)制。　　1材料與方法　　1.1動(dòng)物　　昆明種小鼠，雄性，體重(20±2)g，由河北北方學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供?！　?.2藥品和試劑　　大黃酚，南京清澤醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司，實(shí)驗(yàn)前用N,N二甲基甲酰胺溶解，吐溫80助溶，再加入生理鹽水混勻(N,N二甲基甲酰胺∶吐溫80∶生理鹽水＝1∶1∶8)，置冰箱中冷藏保存?zhèn)溆茫瑢?shí)驗(yàn)時(shí)用生理鹽水稀釋至所需濃度；Aβ2535，Sigma公司，用滅菌蒸餾水溶解，濃度1.0mmol/L，密封后

7、置37℃培養(yǎng)箱中孵育96h，使其成凝聚狀態(tài)，20℃儲(chǔ)存?zhèn)溆茫贿^氧化氫測試盒（50T，批號(hào)：20081125）過氧化氫酶（CAT）可見光測試盒（100T，批號(hào)：20081210）、ATP酶測試盒(50T，批號(hào)：20081214)，均由南京建成生物工程研究所提供?！　?.3儀器　　Labtech2100型紫外分光光度計(jì)，美國；802B離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；S648恒溫水浴箱，上海醫(yī)療器械廠；FSH2內(nèi)切式組織勻漿機(jī)，江蘇環(huán)保儀器廠；微量進(jìn)樣器，寧波市鎮(zhèn)海玻璃儀器廠?！　?.4造模方法〔3〕　　用手抓住小鼠頭部皮膚并將皮膚拉緊，在距頭部中線

8、2mm處與兩側(cè)耳根前部連線相交叉的點(diǎn)，用微量進(jìn)樣器垂直刺入3.0mm，穿破顱骨，進(jìn)入腦室，緩慢注入Aβ25353μl，并