百合多糖對小鼠免疫功能的影響論文

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1、百合多糖對小鼠免疫功能的影響論文【摘要】目的：觀察百合多糖（LP）對小鼠免疫功能的影響.方法：環(huán)磷酰胺復(fù)制免疫抑制模型；測定胸腺、脾臟質(zhì)量并計算臟器系數(shù)；雞紅細胞法測定單核巨噬細胞吞噬功能；綿羊紅細胞法測定血清溶血素IgG,.freelg/kg劑量范圍內(nèi)，LP可以提高免疫抑制模型小鼠的免疫器官指數(shù)，促進其吞噬指數(shù)和腹腔巨噬細胞增殖反應(yīng)，提高其血清溶血素IgG，IgM含量；在75～150mg/L劑量范圍內(nèi)能促進小鼠脾細胞的增殖.結(jié)論：百合多糖能增強免疫抑制小鼠的非特異性和特異性免疫功能.【關(guān)鍵詞】百合多糖類免疫/藥物作用0引言多糖是自然界中含量豐

2、富的生物聚合物,它是由醛糖或酮糖通過糖苷鍵連接在一起,是構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)之一，多糖類具有多種顯著的生物活性和藥理作用.近年來，中藥材所含植物多糖的免疫調(diào)理作用備受關(guān)注，已有100余種中藥被用于相關(guān)研究.但是百合多糖免疫調(diào)節(jié)作用的研究報道較少.我們從蘭州百合中提取水溶性多糖［1］,并觀察其對環(huán)磷酰胺免疫抑制模型小鼠免疫功能的影響.1材料和方法1.1材料百合多糖（Lilypolysaccharide.freela公司；MTT，Sigma公司；DMSO(AR)，天津化學試劑一廠；小牛血清，杭州四季青生物工程有限公司；RPMI1640細胞培養(yǎng)

3、基，GIBCO公司.ICR封閉群小鼠，清潔動物（生產(chǎn)合格證號：陜醫(yī)動字08004），18～22g；綿羊紅細胞（SRBC）；均由西安交通大學醫(yī)學院實驗動物中心提供.1.2方法1.2.1百合多糖對小鼠巨噬細胞吞噬活性的影響ICR小鼠60只，隨機分為6組，即正常對照組、CTX模型對照組、LP小劑量組（0.1g/kg）、LP中劑量組（0.2g/kg）、LP大劑量組（0.4g/kg）和陽性藥多抗甲素對照組(0.0125g/kg)，每組10只，雌雄各半.小鼠免疫抑制模型按文獻［2］方法復(fù)制，除正常對照組外，其他各組小鼠右側(cè)前肢腋窩皮下注射4g/L環(huán)磷酰胺

4、溶液（25mg/kg，無菌生理鹽水配制），每隔48h注射1次.各組小鼠于給藥第2，5日分別腹腔注射50g/L無菌可溶性淀粉溶液(25mL/kg).百合多糖實驗組每日用不同劑量的LP灌胃1次（25mL/g），藥物陽性對照組每日用多抗甲素灌胃1次(25mL/g)，正常對照組每日用生理鹽水灌胃1次（25mL/g）,共7d.在末次給藥后，所有小鼠腹腔注射無菌普通肉湯50mL/kg，用注射器吸取腹腔液0.1mL于潔凈載物玻片，加0.1mL（0.1mL/L）雞紅細胞懸液，充分混勻；置于濕盒內(nèi)37℃孵育30min.用生理鹽水漂洗3次，室溫干燥.按文獻［3］方

5、法計算吞噬百分率和吞噬指數(shù).1.2.2免疫器官質(zhì)量的測定上述各組小鼠在吸取腹腔液后斷頸處死，用電子天平精確稱取小鼠體質(zhì)量、胸腺質(zhì)量、脾臟質(zhì)量.按文獻方法計算小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù).1.2.3血清溶血素滴度測定實驗小鼠按1.2.1實驗分組方法分組并給藥，在給藥的第2日腹腔注射500mL/L綿羊紅細胞懸液0.2mL/只進行免疫.每日給藥1次，連續(xù)7d，末次給藥后1h，小鼠眼球后靜脈采血制備血清.按文獻［4］方法測定血清溶血素含量（HCIgG，HCIgM）.1.2.4小鼠脾細胞增殖實驗［4］按常規(guī)方法制成細胞濃度為1×1010個/L脾細胞懸液，混勻

6、后加到96孔培養(yǎng)板中，每孔均加入脾細胞1×106個.淋巴細胞增殖實驗分兩部分：①加ConA組：每孔均加入不同濃度的LP和終濃度為5mg/L的ConA；②無ConA組：每孔均加入不同濃度的LP.以RPMI1640培養(yǎng)液為陰性對照，終濃度為10mg/L的ConA組為陽性對照；每組均設(shè)4個復(fù)孔.置37℃，50mL/LCO2培養(yǎng)箱中靜止培養(yǎng)68h后，MTT法測A值.統(tǒng)計學處理：實驗所得數(shù)據(jù)用x±s表示，采用SPSS統(tǒng)計軟件進行方差分析及Duntt檢驗.2結(jié)果2.1LP對小鼠巨噬細胞吞噬活性的影響CTX免疫抑制模型組吞噬百分率及吞噬指數(shù)低于正常對照組

7、（P0.01）；LP小劑量組、中劑量組和大劑量組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)均高于CTX模型對照組(P0.01)，隨著LP劑量的增加，吞噬百分率和吞噬指數(shù)在逐漸提高（P0.05），呈量效關(guān)系（表1）.2.2LP對小鼠免疫器官發(fā)育的影響CTX免疫抑制模型組胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)比正常對照組低（P0.01），說明造模成功；LP小、中、大三個劑量組胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)均高于CTX模型對照組(P0.01)（表2），但LP各組間無量效關(guān)系（P＞0.05）.表1百合多糖對小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響表2百合多糠對小鼠免疫器官重量的影響2.3LP對小鼠血清溶血素水平的影響

8、CTX免疫抑制模型組血清溶血素滴度比正常對照組低（P0.01）；而LP小、中、大三個劑量組血清溶血素水平均高于模型對照組，且隨著LP劑量的增加，血清溶