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《青蒿素對小鼠lewis肺癌移植瘤生長和淋巴管生成的影響論文》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、青蒿素對小鼠Lewis肺癌移植瘤生長和淋巴管生成的影響論文郭燕，王俊，章必成，陳正堂，高建飛，趙勇【關(guān)鍵詞】青蒿素；癌,LeisininonmetastatictumorgrophangiogenesisinmicebearingLea【Abstract】AIM：ToexploretheeffectofantimalarialartemisininonLeoma(LLC)groorlymphangiogenesis.METHODS：ThemodelsofLLCinC57BL/6miceouseLLC
2、cells.Aftermiceinisteredisininat50mg/kgbodyorseasuredorcellinjection,andLeorsandlungsorsandlungsmunohistochemicalanalysisforlymphangiogenesisusingVEGFR3andLYVE1stainingorformicrometastasisusingHEstaining.Lymphaticmicrovesseldensity(LMVD)phaticvesselcou
3、nt.Furthermore,miceonitoredforsurvivalstudies.RESULTS：LMVD,beroflungmetastasisinartemisinintreatedgrouporgroisinintreatedmiceandcontrolmice(P0.05).Inaddition,artemisinintreatedmicelivedsignificantlylongerthanthecontrolmicedid(P0.01).CONCLUSION：Antimala
4、rialartemisinineffectivelyinhibitsthelymphangiogenesisandlungmetastasis,andenhancesthesurvivalofmicebearingLLC.【Keyisinin;carcinoma,Lephangiogenesis;vascularendothelialgrouthfactorc【摘要】目的：探討抗瘧藥青蒿素對Leg/kg的青蒿素，1次/2d.freelphangiogenesis），并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞通過新生的淋巴管向區(qū)
5、域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移.目前，多種淋巴管內(nèi)皮特異性標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)促進(jìn)了人們對腫瘤淋巴管功能的認(rèn)識，因此尋找可以抑制淋巴管生成的藥物和方法已經(jīng)成為抗腫瘤轉(zhuǎn)移研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)［1］.青蒿素（artemisinin）是1972年由我國科研人員從中藥青蒿中分離得到的，具有抗瘧作用的單體成分，現(xiàn)在臨床上主要用于治療耐藥的惡性瘧疾.多項(xiàng)研究表明，青蒿素及其衍生物對多種腫瘤的生長具有抑制作用，并顯示出較強(qiáng)的抗血管生成活性［2］.然而，青蒿素是否可以抑制淋巴管生成還不清楚.我們探討了青蒿素對小鼠LeL/L滅活胎牛血清、100U/
6、mL青、鏈霉素）培養(yǎng)基，置于37℃，50mL/LCO2孵箱中培養(yǎng).DMEM、胎牛血清購于美國Hyclone公司.胰蛋白酶，美國BD公司.青蒿素購自重慶市酉陽縣武陵山制藥有限公司，研磨后用5g/L的羧甲基纖維素鈉配成懸浮液.兔抗小鼠VEGFR3,LYVE1多克隆抗體購買自美國SantaCruzBiotechnology公司.免疫組化試劑盒、DAB顯色試劑盒均購自武漢博士德生物工程公司.收集對數(shù)生長期的細(xì)胞，胰酶消化后，1000r/min離心10min，PBS洗滌，無血清的DMEM制成細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度
7、達(dá)到5×106.隨機(jī)選取6周齡的C57BL/6小鼠，在背部皮膚下接種LeL.1.2方法將20只小鼠隨機(jī)分為對照組和青蒿素治療組，每組10只，青蒿素治療組在腫瘤移植后2d即灌胃給予50mg/kg青蒿素0.4mL，1次/2d，連續(xù)給藥2L/LH2O2室溫封閉10min，98℃微波熱修復(fù)抗原10min.SABC染色步驟如下：先用20mL/L正常山羊血清封閉30min，甩去不洗，隨后滴加兔抗小鼠VEGFR3及LYVE1（1∶500），4℃過夜，PBS洗滌，滴加生物素化的羊抗兔IgG（1∶100），37℃孵育
8、30min，PBS洗滌，加入SABC，37℃孵育30min，DAB顯色，梯度乙醇脫水，二甲苯透明，蘇木素襯染，中性樹膠封片.光鏡下觀察微淋巴管密度（lymphaticmicrovesseldensity,LMVD）并計(jì)數(shù)，參考Beasley等的方法［3］，即先在低倍數(shù)下（×100）觀察切片，尋找腫瘤內(nèi)染成棕褐色單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇，作為一個(gè)微淋巴管，含有肌層的細(xì)胞不以計(jì)數(shù)，每個(gè)標(biāo)本在高倍鏡下（×400）隨機(jī)計(jì)數(shù)10個(gè)視野，取平均數(shù)作為該LMVD值.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：計(jì)量
