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1、柴胡皂苷d對(duì)酒精性肝纖維化大鼠星形細(xì)胞活化的影響作者:李素婷,楊鶴梅,齊潔敏,梅立新【摘要】 目的研究柴胡皂苷d(SSd)對(duì)酒精性肝纖維化大鼠星形細(xì)胞(HSC)活化的影響,以探討SSd抗肝纖維化的作用機(jī)制。方法SD大鼠隨機(jī)分為3組:酒精組、SS-d保護(hù)組、正常對(duì)照組。利用白酒灌胃輔以高脂飼料方法建立大鼠肝纖維化模型,同時(shí)給予SSd保護(hù),12周末處死大鼠。免疫組化檢測(cè)肝組織α平滑肌肌動(dòng)蛋白(αSMA)的表達(dá),H.E染色和VanGieson染色觀察肝組織病理改變和纖維組織增生,常規(guī)生化方法檢測(cè)肝功能。結(jié)果和模型組
2、比較,SSd明顯減少肝組織中αSMA的表達(dá);降低血清ALT,AST活性和肝組織羥脯氨酸(Hyp)含量;肝組織病理改變明顯好轉(zhuǎn),纖維組織增生明顯減少。結(jié)論SSd通過(guò)降低αSAM表達(dá),抑制肝HSC的活化達(dá)到抗肝纖維化作用?!娟P(guān)鍵詞】柴胡皂苷d肝纖維化肝星形細(xì)胞α平滑肌肌動(dòng)蛋白 Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsofsaikosaponin-d(SSd)ontheactivationofHepaticStellateCells(HSC)andtoinvestigatethemainm
3、echanismofSS-dinprotectionofliverfibrosis.MethodsSDratslydividedinto3groups:normalgroup,ethanol-fedgroup,SSdinterventionalgroup.56%distilledalcoholandhighfatdietg·kg-1oncedaily.Ratsoothmuscleactin(αSMA)munohistochemistrymethod.Pathologicalchangeinlivertissueicros
4、copebyH.EandVan-Giesonstaining;thecontentoflivertissuehydroxyproline(Hyp)andliverhistopathologyinedbykivchemistry.Resultsparedodelgroup,SSdcouldreducetheexpressionofαSMAmarkedly,improvethepathologicalchangesoflivertissueanddecreasetheproductionoffiberssignificant
5、ly,decreasethelevelsofserumalaninetransaminase(ALT),aspartatetransaminase(AST)andthecontentsofliverHypsignificantly.ConclusionSSdcaninhibithepaticfibrosisthroughinhibitingtheexpressionofαSMAinHSC. Keypus光學(xué)顯微鏡和攝像顯微鏡,德國(guó)LEica公司產(chǎn)品?! ?方法 2.1動(dòng)物分組及模型的建立 參考 2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
6、 數(shù)據(jù)以±s表示,用SPSS計(jì)算機(jī)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,組間比較采用t檢驗(yàn)?! ?結(jié)果 3.1肝功能及Hyp含量的測(cè)定如表1所示,酒精組血清ALT,AST活性明顯升高,肝組織Hyp含量亦明顯升高;給予SSd保護(hù)后,血清ALT,AST活性和肝組織Hyp含量明顯降低(P<0.01);表明SSd有保護(hù)肝細(xì)胞,拮抗肝纖維化形成的作用。表1SSd對(duì)血清ALT,AST活性和肝臟Hyp含量的影響(略) 3.2肝纖維化病理學(xué)觀察H.E染色:正常組肝組織結(jié)構(gòu)正常,肝細(xì)胞排列整齊,肝小葉結(jié)構(gòu)完整,無(wú)肝細(xì)胞脂肪變性壞死;酒精組大鼠肝組織病
7、理?yè)p傷嚴(yán)重,肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂,肝細(xì)胞呈氣球樣變及脂肪變性,肝細(xì)胞腫脹,胞質(zhì)疏松,可見(jiàn)較大脂滴;匯管區(qū)有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),膠原纖維沿匯管區(qū)及中央靜脈周?chē)蚋涡∪~內(nèi)延伸,肝小葉失去正常的結(jié)構(gòu)特點(diǎn);SS-d保護(hù)組上述癥狀明顯減輕,肝細(xì)胞有輕度空泡樣變性,纖維組織增生明顯減少。V-G染色:正常組無(wú)明顯膠原纖維,酒精組有大量膠原纖維伸入肝小葉,有部分假小葉形成,SS-d組膠原纖維明顯減少,纖維隔較薄,無(wú)假小葉形成。肝纖維化積分:與酒精組相比,SS-d保護(hù)組病理學(xué)分期有明顯改善(P<0.01)。見(jiàn)表2。表2SS-d對(duì)大鼠肝纖維化積分及α-SM
8、A表達(dá)量化結(jié)果的影響(略) 3.3肝組織α-SMA的表達(dá)及量化結(jié)果肝組織切片免疫組化染色顯示:正常組肝組織α-SMA主要表達(dá)于匯管區(qū)動(dòng)、靜脈壁,而酒精組α-SMA在匯管區(qū)、纖維間隔和肝血竇處均呈陽(yáng)性表達(dá);SS-d保護(hù)組α-SMA表達(dá)較模型組有明顯減弱,僅在匯管區(qū)和纖維間隔內(nèi)有少量陽(yáng)性細(xì)胞