中藥治療對大鼠坐骨神經損傷后mrnangf表達的影響

中藥治療對大鼠坐骨神經損傷后mrnangf表達的影響

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1、中藥治療對大鼠坐骨神經損傷后mRNANGF表達的影響作者:尹宗生,顧玉東,朱騰芳【摘要】目的研究中藥黨參、丹參、黃芪、生地和復方神肌再生沖劑對大鼠坐骨神經損傷后神經再生的影響。方法將大鼠分為黨參組、丹參組、黃芪組、生地組、復方沖劑組和對照組,每組大鼠18只。麻醉下暴露右側坐骨神經,在坐骨結節(jié)遠側0.8cm處造成坐骨神經擠壓傷,根據分組,術后給予不同的中藥喂養(yǎng)大鼠。術后不同時間,取緊鄰擠壓傷部位遠側神經干,應用原位雜交的方法和圖像分析處理系統(tǒng)定量測定神經組織中神經生長因子mRNA(mRNANGF)的表達。結果丹參組和黃芪組大鼠坐骨神經擠壓傷后第2周起,坐骨神經組織中mRNANGF表達明顯增加

2、,至傷后第4周達到高峰。黨參治療坐骨神經擠壓傷,治療后8周,mRNANGF表達較對照組明顯增加,差異有顯著性。在復方沖劑組,大鼠坐骨神經擠壓傷后8周內,神經組織中mRNANGF表達始終處于高水平。各組大鼠坐骨神經mRNANGF表達與對照組之間的差異具有顯著性(P<0.05)。復方沖劑組大鼠坐骨神經mRNANGF表達與丹參和黃芪組之間的差異也具有顯著性。結論中藥黨參、丹參和黃芪可以促進擠壓傷后大鼠坐骨神經mRNANGF表達;這種作用在組成復方沖劑后,表現得更為明顯?!娟P鍵詞】中藥;坐骨神經損傷;神經生長因子mRNA【Abstract】ObjectiveTodecideprovingthere

3、generationofperipheralnerveafternervelesionandtostudythemechanismofChineseherb.Methods108SDrats(male,220~250g)ixedgroupandcontrolgroup.Theratsdistaltosciaticnotch.AftersurgerytheratseafteroperationtheratpjustdistaltothecrushsiteovedtoevaluatethelevelofmRNANGF.mRNANGFeansofinsituhybridizationandthe

4、levelinedbyimaginganalysis.ResultsInDanshenandHuangqigroupsthelevelsofmRNANGFinsciaticnervemarkedlyincreasedatthesecondRNANGFinthesetixedgroupthemRNANGFareallinhighlevelparedRNANGFinDangshengroupixedherbscanincreasetheexpressionofmRNANGFofratsciaticnerveandimprovetheregenerationofsciaticnerveafter

5、nervecrushed.【KeyRNA復方神肌再生沖劑對神經再生的促進作用已經被實驗研究初步證實[1,2]。為了研究中藥復方神肌再生沖劑及其組成成分對神經再生的影響,我們曾應用免疫組織化學的方法檢測中藥治療后損傷的大鼠坐骨神經組織NGF蛋白表達[3]。隨著分子生物學技術的飛躍發(fā)展,運用先進的實驗手段,檢測神經生長因子mRNA(mRNANGF)在神經組織中的表達來判斷神經再生,其敏感度比檢測NGF的方法要高得多。我們應用原位分子雜交的方法,研究復方神肌再生沖劑治療大鼠坐骨神經損傷后神經生長因子(NGF)mRNA(mRNANGF)的變化,確定中藥復方神肌再生沖劑中對神經再生有促進作用的單味中

6、藥。1材料與方法1.1動物選擇及分組SD大鼠,健康,雄性,體重230~250g,SPF級。由復旦大學醫(yī)學院實驗動物部提供。實驗組90只大鼠分為5個處理組,分別為黨參組、丹參組、黃芪組、生地組和復方沖劑組。每處理組18只大鼠再按術后取材時間分為術后2周、4周和8周3個時間組,每時間組6只。對照組30只大鼠分為5個時間組,分別為術后2天、1周、2周、4周和8周,每時間組6只大鼠。1.2動物模型制作1%硫噴妥鈉腹腔注射麻醉。局部脫毛,消毒。取右側為手術側。沿右側臀大肌纖維方向做右臀及大腿上部皮膚切口,分開臀肌顯露坐骨神經。于坐骨結節(jié)遠側0.8cm,坐骨神經分出支配大腿肌肉的分支之近側,用帶卡扣的

7、無齒顯微持針器夾住坐骨神經,合攏卡扣30s,造成神經擠壓傷(crush)[4]。在損傷部位用11-0的無損傷縫線固定于神經外膜作為標記,傷口內置適量青霉素粉劑,關閉切口。術后將大鼠分籠飼養(yǎng),每籠3只。常規(guī)供給大鼠專用飼料和飲用水,室內20℃恒溫。根據實驗分組,每日給予相應的中藥湯劑2ml灌胃。對照組大鼠術后給等量生理鹽水灌胃。按分組要求,術后取緊鄰擠壓傷部位遠側坐骨神經干0.6cm,迅速置入4%多聚甲醛溶液固定。另取正常

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