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1、氧化苦參堿對腦缺血損傷的保護(hù)作用論文【摘要】探討氧化苦參堿對大鼠局灶性腦缺血/再灌注損傷和小鼠急性腦組織缺血的保護(hù)作用。方法大鼠缺血前給予氧化苦參堿10、20、40mg·kg-1，灌胃7天，末次給藥1h后制備大鼠大腦中動脈阻斷短暫局灶性缺血模型,缺血1.5h，再灌注24h，蘇木精-伊紅染色觀察大腦的紋狀體、海馬和皮質(zhì)的病理學(xué)改變。小鼠缺血前給予氧化苦參堿5、20、80mg·kg-1，灌胃7天，末次給藥1h后采用斷頭法制備小鼠的急性腦缺血模型，然后記錄小鼠斷頭后的喘息時間和小鼠斷頭后張口次數(shù)。結(jié)果氧化苦參堿可使局灶性腦缺血
2、再灌注大鼠的海馬CA1區(qū).freeliｃinjuryinratsandmice.MethodsHealthymaleSprague-Dalydividedinto５groups：shamgroup,ischemiareperfusion（Ｉ／Ｒ）groupａｎｄＯＭＴ－ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔＩ／Ｒｇｒｏｕｐｓ（ininisteredatadoseof10mg·kg-1,20mg·kg-1，40mg·kg-1ｐｏｆｏｒ７ｄrespectively）．Transientfocalcerebralischemiainjury
3、modelinratsiddlecerebralarteryfor1.5h,follolydividedintofivegroups：Ｉ／Ｒgroup,Ｄanshen（ｄｒｕｇｃｏｎｔｒｏｌ）groupａｎｄOMTｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｇｒｏｕｐｓ（5mg·kg-1,20mg·kg-1ａｎｄ80mg·kg-1ｐｏｑｄｆｏｒ７ｄ，respectively）．Ｔｈｅｍｉｃｅｗｅｒｅｔｈｅｎｄｅｃａｐｉｔａｔｅｄｔｏｎｏｔｉｃｅthesurvivaltimeandｔｈｅtimesｏｆｍｏｕｔｈｏｐｅｎｉｎｇ．ResultsL
4、ightmicroscopyindicatedtheｂｒａｉｎstructureｓentｇｒｏｕｐｓ.Thesurvivaltimeandtimesｏｆｍｏｕｔｈｏｐｅｎｉｎｇiainjuryinratsandmice.Ｋeyatrine；cerebralischemiainjury；protectiveeffect氧化苦參堿(oxymatrine,OMT)是從豆科植物苦參、苦豆子等中分離出來的生物堿,屬于四環(huán)的喹嗪啶類,分子式為C15H24N20O2。在以前的研究中我們知道氧化苦參堿有抗肝炎病毒［1］，抗心律失常［2-
5、3］，抗癲疒間［4］，抗肝、腎和心臟纖維化［5～9］，抗腫瘤［10-11］等作用。氧化苦參堿可以減少癲疒間大鼠的腦MDA含量，增加自由基的清除［4］，提示其可能對腦組織有保護(hù)作用。本研究通過大鼠局灶性腦缺血和小鼠急性腦缺血損傷模型，觀察氧化苦參堿對腦缺血的保護(hù)作用。1材料和方法1．1實(shí)驗(yàn)動物SD大鼠，雄性，體重260～300g，由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物合格證號SYXK(蘇)20032003。小鼠，雌雄各半，體重18～20g，由徐州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，動物合格證號SYXK(蘇)20032003。1．2藥品與試
6、劑氧化苦參堿（陜西昂盛生物醫(yī)藥科技有限公司，含量98％，批號2007011，實(shí)驗(yàn)時以生理鹽水配制成所需濃度使用），丹參片（上海雷允上藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號070595）。1.3方法1.3.1給藥大鼠缺血前給予氧化苦參堿10、20、40mg·kg-1,灌胃1次/d，共7天，末次給藥1h后制備大鼠大腦中動脈阻斷短暫局灶性缺血模型。小鼠缺血前給予氧化苦參堿5、20、80mg·kg-1，灌胃1次/d，共7天，末次給藥1h后采用斷頭法制備小鼠的急性腦缺血模型。1.3.2大鼠局灶性腦缺血/再灌注模型制備參照文獻(xiàn)［12］。采用Long
7、a的改進(jìn)方法。大鼠用3%水合氯醛(300mg·kg-1,ip)麻醉后仰臥位固定于手術(shù)臺上，鈍性分離頸部肌肉組織，沿胸鎖乳突肌內(nèi)側(cè)緣鈍性分離出右側(cè)頸總動脈(CCA)和伴隨的迷走神經(jīng)，再分離出右側(cè)頸外動脈(ECA)、頸內(nèi)動脈(ICA)和枕動脈，用電凝器將枕動脈灼斷。沿著頸內(nèi)動脈分離出翼鄂動脈（PPA）。將頸外動脈距頸總動脈分叉處0.8cm處結(jié)扎，用動脈夾將頸總和頸內(nèi)動脈夾住，在頸外動脈距頸總動脈分叉處0.4cm處用眼科剪剪一“V”型小口，將尼龍漁線插入小口，并將預(yù)先放入頸外動脈根部的縫線拉緊，松開頸總和頸內(nèi)動脈的動脈夾，漁線
8、經(jīng)頸總動脈分叉處進(jìn)入頸內(nèi)動脈，并注意避免使?jié)O線進(jìn)入PPA，感覺有輕微阻力將尼龍漁線稍拔出一點(diǎn)并固定，自頸內(nèi)外動脈分叉處算起到此為止長約1.85cm。插線后1.5h，將尼龍漁線輕輕抽出使頭端回到ECA處即可使動脈恢復(fù)再通，腦組織實(shí)現(xiàn)再灌注。假手術(shù)組大鼠只進(jìn)行麻醉和血管分離術(shù)。插線后24h斷頭取腦，制備病理切片。1．3.
