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1、紅茶菌調(diào)節(jié)小鼠免疫功能的實(shí)驗(yàn)研究作者：李波清，孟瑋，王志強(qiáng)，于敏，孫旭紅【關(guān)鍵詞】紅茶菌;,,小鼠;,,免疫功能 摘要：目的探討紅茶菌對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用。方法Balb/c小鼠30只，體重18～22g，隨機(jī)分為兩組，用紅茶菌液給小鼠灌胃30d后處死，以MTT法測(cè)定NK細(xì)胞的殺傷活性；以腹腔巨噬細(xì)胞吞噬白色念珠菌的方法評(píng)價(jià)巨噬細(xì)胞吞噬功能；以胸腺細(xì)胞增殖法和脾細(xì)胞增殖法分別測(cè)定IL1和IL2的生物活性。結(jié)果紅茶菌能顯著提高NK細(xì)胞的殺傷活性；巨噬細(xì)胞吞噬功能明顯增強(qiáng)；紅茶菌灌胃組IL1和IL2活性分別為：0.549±0.024，0.405±0.018；對(duì)照組分別為：0.341±
2、0.021，0.361±0.011，實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，IL1，IL2活性得到顯著提高(P＜0.01)。結(jié)論紅茶菌能顯著增強(qiáng)小鼠的免疫功能?！ ￡P(guān)鍵詞：紅茶菌;小鼠;免疫功能 Abstract：ObjectiveToinvestigatetheregulativeeffectofblackteafungusontheimmunologicalfunctionofmice.MethodsThirtyBalb/cmice(lydividedintoticeinistrationforthirtydays.ThekillingactivityofNKcellsethod,andperi
3、tonealmacrophagesousethymocyteorspleniccellproliferationtest.ResultsTheactivitiesofIL-1andIL-2ofmiceentalgrouprespectively;theyentalgroupthanthoseincontrolgroup(P＜0.01).ThekillingactivityofNKcellandthephagocytesfunctionofthemacrophagesinvitroarkedlypromoted(P＜0.01).ConclusionTheblackteafungusc
4、anenhancetheimmunologicalfunctionofmicesignificantly. Keymunologicalfunction 紅茶菌又稱“海寶”或“胃寶”，是在我國(guó)民間廣為流行的一種保健飲品，為我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥的重要組成部分。前期研究中我們發(fā)現(xiàn)紅茶菌對(duì)小鼠具有顯著的抑瘤作用，為進(jìn)一步探討其抑瘤機(jī)制，我們通過(guò)用紅茶菌對(duì)小鼠進(jìn)行胃內(nèi)灌注的方法，觀察紅茶菌對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用?！ ?材料與方法 1.1動(dòng)物Balb/c小鼠，體重18～22g，雌雄兼有，引自北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心?！ ?.2細(xì)胞株K562細(xì)胞由北京大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部免疫系提供?！ ?
5、.3試劑紅茶菌，本室保存菌種，總菌數(shù)為5.5×107CFU/ml，RPMI1640（Gibco公司），LPS（Sigma公司），白色念珠菌（本室保存），ConA（北京醫(yī)藥站），MTT（Sigma公司），DMSO（國(guó)產(chǎn)）?！ ?.4儀器全自動(dòng)酶標(biāo)儀（MultiskanMS），CO2培養(yǎng)箱（Forma公司），低速冷凍離心機(jī)（IEC公司），電子精密天平（METTLERTOLEDO）?！ ?.5動(dòng)物分組隨機(jī)把Balb/c小鼠分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，各組15只。對(duì)照組以自來(lái)水0.5ml/只，實(shí)驗(yàn)組以紅茶菌0.5ml/只，每天胃內(nèi)灌注1次，第30天頸椎脫臼處死小鼠，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀測(cè)?！ ?.6MTT法
6、測(cè)定NK細(xì)胞殺傷活性常規(guī)取脾臟制成細(xì)胞懸液，用不含血清RPMI1640液洗滌2次，以10%BCSRPMI1640配成1×106個(gè)細(xì)胞/ml，作為效應(yīng)細(xì)胞；取連續(xù)傳代培養(yǎng)的K562細(xì)胞懸液各100μl加入96孔平底培養(yǎng)板，再向每孔中加入MTT（5mg/ml）10μl，每組設(shè)3個(gè)平行孔，另設(shè)3個(gè)效應(yīng)細(xì)胞對(duì)照孔（100μl上述脾細(xì)胞加100μl10%BCSRPMI1640及10μlMTT）和靶細(xì)胞對(duì)照孔（100μl上述K562細(xì)胞加100μl10%BCSRPMI1640及10μlMTT），置37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中4h，取出后1000r/min，離心10min，測(cè)560nm處A值，計(jì)算
7、NK細(xì)胞殺傷活性。NK細(xì)胞殺傷活性（%）=實(shí)驗(yàn)孔A值效應(yīng)細(xì)胞對(duì)照孔A值靶細(xì)胞對(duì)照孔A值×100 1.7體外巨噬細(xì)胞吞噬功能測(cè)定各組小鼠于實(shí)驗(yàn)第30d分別腹腔內(nèi)注射冷RPMI1640液5ml，輕柔按摩10s后吸出液體，1000r/min離心10min，棄去大部分上清，留約5ml，加100μl白色念珠菌液（1×105CFU）混勻，置37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)60min后混勻涂片，瑞氏染色，計(jì)算體外巨噬細(xì)胞吞噬百分率［1］?！ ?.8IL1和IL2的誘生與檢測(cè) 1.8.1IL1
