非小細胞肺癌組織survivin和caspase基因表達及其關(guān)系論文

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1、非小細胞肺癌組織Survivin和Caspase基因表達及其關(guān)系論文【摘要】目的探討Survivin和Caspase3基因在非小細胞肺癌（NSCLC）中的表達及其相互關(guān)系。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)等技術(shù)與方法檢測74例NSCLC組織細胞中Survivin和Caspase3基因的表達。結(jié)果在NSCLC組織細胞中，Survivin基因表達率為64.9%(48/74),其表達與NSCLCTNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和細胞分化程度密切相關(guān)（χ2=5.00～5.20，P0.05）；Caspase3基因表達率為55.4%(41/74),其表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（χ

2、2=5.98，P0.05）；在NSCLC組織細胞中，Survivin基因表達與Caspase3基因表達呈高度負相關(guān)(r=-0.404，P0.01)。結(jié)論在NSCLC組織細胞中，Survivin基因表達上調(diào)，Caspase3基因失活或低表達；Survivin結(jié)合激活的Caspase3.freelallcelllungcancer(NSCLC).MethodsTheexpressionsofSurvivingeneandcaspase3genein74paraffinembeddedNSCLCsamplesmunohistochemically

3、.ResultsSurvivinphnodeinvolvement,andcelldifferentiation(χ2=5.00-5.20,P0.05).Caspase3phnodeinvolvement.TheexpressionofSurvivina,nonsmallcelllung;Immunohistochemistry肺癌是最常見的原發(fā)惡性腫瘤，是一種嚴重威脅人類健康的常見病。有研究認為,Caspase3基因的低表達有助于腫瘤的發(fā)生。Survivin作為新近發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白，在絕大多數(shù)人類腫瘤細胞中都有高表達1，可通過抑制Casp

4、ase3的凋亡作用而致癌。本研究采用免疫組化等技術(shù)與方法研究非小細胞肺癌（NSCLC）組織細胞中Survivin和Caspase3基因的表達及其相互關(guān)系，探討Survivin和Caspase3在肺癌發(fā)生發(fā)展中的作用。現(xiàn)將結(jié)果報告如下。1材料與方法1.1標(biāo)本來源我院胸外科手術(shù)切除的NSCLC組織標(biāo)本74例，其中男54例，女20例；年齡31～76歲，平均56.1歲。所有病人術(shù)前均未接受過化療和放療。經(jīng)病理學(xué)檢查證實為肺癌，其中鱗癌42例，腺癌32例；低分化30例，中分化和高分化癌44例。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟1997年修訂的肺癌分期標(biāo)準：Ⅰ期＋Ⅱ期40例

5、，Ⅲ期＋Ⅳ期34例；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者52例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者22例。1.2主要實驗試劑Survivin多克隆抗體購于北京中山生物技術(shù)有限公司，Caspase3多克隆抗體購于北京博菲康生物技術(shù)有限公司，多聚賴氨酸玻片處理劑購于武漢亞法生物有限公司。1.3方法石蠟標(biāo)本制成3μm厚的切片。常規(guī)脫蠟，梯度乙醇脫水，微波抗原修復(fù)，內(nèi)源性過氧化物酶阻斷15min，分別滴加Survivin多克隆抗體(1∶125)和Caspase3的多克隆抗體(1∶100)，置27℃孵育60min，Ⅱ抗37℃孵育30min，Ⅲ抗37℃孵育30min，DAB顯色4～8min，蘇木精

6、復(fù)染后，脫水、透明、封固后光鏡下觀察。用已知的陽性切片染色作為陽性對照，用PBS代替一抗作為陰性對照。1.4免疫組化陽性細胞的觀察和圖像分析采用半定量方法測定Caspase3、Survivin基因表達2。選取5個高倍鏡視野(200倍)計數(shù)1000個腫瘤細胞中Caspase3、Survivin表達陽性細胞數(shù)，分為以下4個等級:0級≤5%，5%1級≤25%，26%2級60%，3級60%。根據(jù)Caspase3、Survivin免疫組化染色的強度分成以下3個等級：弱陽性(顯色淡黃或僅個別細胞呈黃至棕黃色染色)=1；中等陽性(顯色強度介于弱陽性與強陽性之

7、間)=2；強陽性(多數(shù)細胞呈棕黃至棕褐色染色)=3；以陽性細胞數(shù)分值與染色強度分值的乘積為每一例的積分，積分0～1分為表達陰性(-)，2～3分為表達弱陽性(+)，4～6分為表達中度陽性()，6分為表達強陽性()。弱陽性歸為陰性表達。2結(jié)果2.1Survivin基因在NSCLC組織細胞中的表達及其與臨床病理特征的關(guān)系免疫組化結(jié)果表明，Survivin陽性染色為棕黃色顆粒，主要定位于胞漿中，在胞核中也有少量存在。74例NSCLC中，Survivin基因的表達率為64.9%(48/74)，其表達與NSCLC細胞分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期有關(guān)(χ2

8、=5.00～5.20,.freelphoma［J］.NatMed,1997,3(8):917921.［2］