玉竹對(duì)缺氧模型小鼠抗缺氧作用的實(shí)驗(yàn)研究論文

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1、玉竹對(duì)缺氧模型小鼠抗缺氧作用的實(shí)驗(yàn)研究論文.freelodoratum（MilI.）Druce（PO）為百合科黃精屬植物，又名葳蕤、女萎，味甘平，性微寒，具有滋陰潤(rùn)燥，養(yǎng)胃生津之功?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，玉竹中含有甾體皂甙、黃酮、多糖、生物堿、強(qiáng)心甙等多種成分［1］。玉竹有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、降血糖、降血脂、抗動(dòng)脈硬化、抗腫瘤等作用［2-3］。本文選擇了幾種缺氧模型，給予玉竹水煎濃縮液灌服4周后，觀察小鼠對(duì)缺氧的耐受能力的變化并探討其作用機(jī)制。1材料與方法1.1藥品與試劑玉竹飲片購(gòu)自江蘇省藥材公司，產(chǎn)地河

2、南。經(jīng)本院藥劑科鑒定為百合科黃精屬植物玉竹;取玉竹加適量水煮沸1h，重復(fù)煎煮3次，濾液合并后濃縮成每1ml相當(dāng)于0.5g生藥的液體，將濃縮液置4℃冰箱備用;亞硝酸鈉，上海裕陽(yáng)化工有限公司生產(chǎn);鈉石灰，洛陽(yáng)昊華化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，均為AR級(jí);MAD、SOD、GSH-Px檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自南京建成生物研究所。1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與器材昆明種小鼠，體重18～22g，雌雄各半，由東南大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;RE52-98旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器;JA2003電子天平;250ml磨口瓶;秒表;剪刀等。1.3方法1.3.1小鼠常

3、壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)取昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分成正常對(duì)照組、玉竹高、中、低劑量組、維生素C組，每組10只。玉竹高、中、低劑量組分別按玉竹濃縮液5、2.5、1g.kg（20ml.kg）灌胃給藥，維生素C組按0.05g.kg灌胃，正常對(duì)照組則給予同等容積生理鹽水，每日1次，連續(xù)30d。末次灌胃后1h，將各組小鼠分別放入盛有5g鈉石灰的250ml磨口瓶?jī)?nèi)（用前均盛水校正容量，每瓶放1只小鼠），加蓋密封，立即計(jì)時(shí)，以呼吸停止為指標(biāo)，記錄小鼠的存活時(shí)間及存活時(shí)間延長(zhǎng)率。延長(zhǎng)率=（實(shí)驗(yàn)組存活時(shí)間-對(duì)照組存活時(shí)

4、間）÷對(duì)照組存活時(shí)間×100%。1.3.2亞硝酸鈉中毒存活實(shí)驗(yàn)取昆明種小鼠50只，按1.3.1所示方法進(jìn)行分組及灌胃給藥，連續(xù)30d。末次灌胃后1h，各組小鼠均按230mg.kg劑量一次性腹腔注射亞硝酸鈉水溶液（注射量為0.1ml.10g），立即計(jì)時(shí)，以呼吸停止為指標(biāo)，記錄小鼠存活時(shí)間及存活時(shí)間延長(zhǎng)率。1.3.3急性腦缺血性缺氧實(shí)驗(yàn)及心、腦組織中MDA、SOD、GSH-Px的檢測(cè)取明種小鼠50只，按1.3.1方法進(jìn)行分組及灌胃給藥，連續(xù)30d。末次灌胃后1h，各組小鼠用鋒利剪刀自雙耳根后頸部逐只斷頭

5、，立即按秒表記錄每只小鼠斷頭后張口喘氣的持續(xù)時(shí)間及延長(zhǎng)率;同時(shí)助手迅速取肝和腦組織，制成10%的生理鹽水勻漿液，用于檢測(cè)組織中MDA、SOD、GSH-Px的含量，檢測(cè)方法分別為TBA比色法、黃嘌呤氧化酶法和DTNB直接法。蛋白定量采用考馬司亮蘭法。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析及結(jié)果判定計(jì)量指標(biāo)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示（ˉx±s），組間比較用F檢驗(yàn)，應(yīng)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件做數(shù)據(jù)處理分析。P0.05有顯著性差異，P0.01表示差異有極顯著性。2結(jié)果2.1對(duì)小鼠常壓耐缺氧實(shí)驗(yàn)中存活時(shí)間的影響見表1。表1各組小鼠常壓缺

6、氧狀態(tài)下存活時(shí)間比較（略）注:與正常對(duì)照組相比*P0.05**P0.012.2對(duì)亞硝酸鈉中毒小鼠存活時(shí)間的影響見表2。表2各組小鼠在亞硝酸鈉中毒時(shí)存活時(shí)間比較（略）注:與正常對(duì)照組相比*P0.05**P0.012.3對(duì)急性腦缺血性缺氧實(shí)驗(yàn)斷頭小鼠張口喘氣持續(xù)時(shí)間的影響見表3。表3各組小鼠在斷頭后張口喘氣時(shí)間比較（略）注:與正常對(duì)照組相比*P0.05**P0.012.4對(duì)小鼠心臟和腦組織中MDA、SDO、GSH-Px含量的影響見表4。表4各組小鼠心臟和腦組織中MDA、SOD、GSH-Px含量的比較（略

7、）注:與正常對(duì)照組相比*P0.05**P0.013討論缺氧（hypoxia）是指組織得不到充足的氧，或不能充分利用氧時(shí)，組織的代謝、機(jī)能、甚至形態(tài)結(jié)構(gòu)都可能發(fā)生異常變化的病理過(guò)程。輕度缺氧主要引起機(jī)體代償性反應(yīng)，引起呼吸加深加快，心輸出量增加，血液重新分配，以保證重要器官的血液供應(yīng);嚴(yán)重缺氧機(jī)體代償不全時(shí)，出現(xiàn)的變化以代謝機(jī)能障礙為主;急性缺氧時(shí)由于機(jī)體來(lái)不及代償而發(fā)生嚴(yán)重的缺氧性損傷，器官功能可發(fā)生嚴(yán)重障礙;在缺氧晚期，心臟和腦組織因功能衰竭而導(dǎo)致機(jī)體死亡。本組實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，玉竹中高劑量給藥后能顯

8、著延長(zhǎng)小鼠常壓缺氧和亞硝酸鈉中毒條件下的存活時(shí)間，并且能明顯延長(zhǎng)急性腦缺血性缺氧實(shí)驗(yàn)中斷頭小鼠的張口喘氣持續(xù)時(shí)間，說(shuō)明玉竹可以增加心腦組織在缺氧狀態(tài)下的耐受性，對(duì)小鼠的整體缺氧有保護(hù)作用，即對(duì)缺氧時(shí)心腦的功能產(chǎn)生保護(hù)。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，玉竹給藥組小鼠心臟和腦組織中過(guò)氧化產(chǎn)物MDA含量降低，抗氧化酶SOD的水平升高，與正常對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），作用效應(yīng)與玉竹濃度存在計(jì)量依從關(guān)系，而對(duì)GSH-Px的水平無(wú)明顯影響。維生素C是公認(rèn)的抗氧化劑，實(shí)驗(yàn)顯示，維生素C組具有