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1、益氣補(bǔ)肺方對急性肺損傷大鼠ET作者：楊勇傅曉青董禮文王軍程根苗【摘要】目的探討益氣補(bǔ)肺方對油酸性急性肺損傷大鼠的ET-1和MIF水平及肺組織學(xué)的影響及保護(hù)機(jī)制。方法將動物隨機(jī)分為五組：中藥組、西藥組、中+西藥組、模型組、正常組。用油酸誘發(fā)急性肺損傷，觀察造模后大鼠肺系數(shù)、肺組織勻漿ET-1和MIF水平、肺組織學(xué)改變。結(jié)果與油酸組比較，中藥組與中+西藥組ET-1和MIF水平明顯降低（P<0.05），其中3組用藥組間ET-1水平差異具有顯著性（P<0.05）。結(jié)論益氣補(bǔ)肺方對油酸誘發(fā)的大鼠急性肺損傷有
2、一定的保護(hù)作用，抑制ET-1和MIF生成是其作用機(jī)制之一?！娟P(guān)鍵詞】益氣補(bǔ)肺方急性肺損傷ET-1MIF肺組織學(xué) 【Abstract】ObjectiveTostudyeffectsandmechanismof"YiQiBuFEiFormula(YBF)"onET-1andMIFlevelsandlunghistologyinacuteratslunginjury(ALI)inducedbyolEIcacid.MethodsTheratslydividedintofivegroups:YBF,dexametha
3、sone(DXM),YBF+DXM,positivecontrol,negativecontrol.Themodelinationsongthe3treatinggroupsinET-1level.ConclusionsYBFprotectsthelungfromacuteratslunginjuryinducedbyoleicacidbyinhibitingET-1andMIF. 【Keyacrophagemigrationinhibitoryfactor(MIF)Histologicchange 急性
4、肺損傷(ALI)是心源性以外的各種肺內(nèi)外致病因素導(dǎo)致的急性、進(jìn)行性缺氧性呼吸衰竭，嚴(yán)重者定義為急性呼吸窘迫綜合征（ARDS），是臨床常見的急重癥病變。作者自2005年7月至2007年7月在益氣補(bǔ)肺方臨床應(yīng)用有效的基礎(chǔ)上［１］，觀察油酸性急性肺損傷大鼠血漿內(nèi)皮素1（ET-1）和巨噬細(xì)胞移動抑制因子（MIF）水平，探討益氣補(bǔ)肺方對ALI的保護(hù)機(jī)制?！ ?材料與方法 1.1動物與分組SD雄性大鼠50只，體重190～245g，平均（220±20）g，（上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動物有限責(zé)任公司提供，微生物指標(biāo)符合美國SPF級動
5、物標(biāo)準(zhǔn)），自由飲食，在室溫20～23℃，濕度45％條件下飼養(yǎng)（浙江中醫(yī)藥大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)研究中心提供）。隨機(jī)分為中藥組(A組)、中+西藥組(B組)、西藥組(C組)、模型組(D組)、正常組(E組)，每組各10只?！ ?.2動物處理及模型制作灌胃：A組和B組以益氣補(bǔ)肺方（生黃芪30g，當(dāng)歸、人參、天冬各6g,五味子、甘草各3g；藥物濃度4.5g/ml)，2ml/d灌胃，共3d，其余組灌以生理鹽水2ml/d；尾靜脈注射：B組和C組尾靜脈注射地塞米松1mg/kg（××制藥股份有限公司），共3d，余組以生理鹽水注入。第3天
6、各組相應(yīng)處理1h后尾靜脈注入油酸0.2ml/kg造模（E組注入生理鹽水），造模1h后以2.5%戊巴比妥（2ml/kg）腹腔麻醉后取標(biāo)本?！ ?.3肺系數(shù)取全肺，濾紙吸干表面水分，稱濕重，計(jì)算肺系數(shù)(臟器濕重／體重×100%，重量均以g為單位)，以百分比(％)表示。 1.4肺組織勻漿ET-1和MIF水平（1）肺組織勻漿制備：取大鼠右肺中葉約100mg，吸去血液，生理鹽水沖洗，液氮研磨后加入1ml的細(xì)胞裂解液混勻，4℃12000r/min離心10min，取上清液，-70℃保存待測；（2）采用酶標(biāo)免疫法：嚴(yán)格按照
7、試劑盒（BIOSOURCE公司生產(chǎn)）說明書操作測定ET-1和MIF值?！ ?.5肺組織學(xué)（1）標(biāo)本制作：取大鼠右肺下葉約1mm×1mm×1mm，以10%甲醛固定24h，常規(guī)脫水、浸蠟、石蠟包埋切片，HE染色，封片；（2）分級標(biāo)準(zhǔn)：光鏡下將肺臟組織學(xué)改變程度分為無、輕、中和重4級進(jìn)行比較性研究［２］,比較內(nèi)容包括毛細(xì)血管充血,肺泡腔纖維蛋白滲出,肺泡腔及其間隔中性粒細(xì)胞滲出,肺泡間隔增寬（見表1）?！ ?.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理文中數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s）表示，計(jì)數(shù)資料和量化后的等級資料，采用單因素方差分析；組間比較
8、采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包?！ ”?肺臟病理改變分級標(biāo)準(zhǔn)（略） 2結(jié)果 2.1肺系數(shù)從表2中可以看出D組肺系數(shù)最大，E組最小，其余3組數(shù)據(jù)在兩者之間，5組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。藥物處理組間差異不具有顯著性（P>0.05）?！ ?.2肺組織勻漿ET-1和MIF水平5組肺組織勻漿ET-1和MIF水平均符合正態(tài)分布，方差齊性。D組ET-1和
