大黃、蟲對藥對雌孕激素負荷大鼠子宮肌瘤模型孕激素及其受體的影響論文

大黃、蟲對藥對雌孕激素負荷大鼠子宮肌瘤模型孕激素及其受體的影響論文

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1、大黃、蟲對藥對雌孕激素負荷大鼠子宮肌瘤模型孕激素及其受體的影響論文朱麗紅,胡婷婷,嚴維娜【摘要】目的研究大黃、蟲對大鼠子宮肌瘤模型孕激素及其受體的影響。方法將70只SD大鼠隨機分為7組:正常對照組、模型組、大黃蟲小劑量組、大黃蟲中劑量組、大黃蟲大劑量組、大黃蟲丸組、桂枝茯苓膠囊組,采用雌孕激素負荷法建立大鼠子宮肌瘤模型,放射免疫法測定大鼠血清孕激素(P)水平,免疫組織化學染色觀察大鼠子宮平滑肌細胞孕激素受體(PR)的表達。結(jié)果模型大鼠血清中P水平,子宮平滑肌細胞PR的表達明顯高于正常大鼠,大黃蟲可降低血清中

2、P水平,抑制平滑肌細胞PR的表達。結(jié)論P及PR在子宮肌瘤生長中起重要作用.freelentalratsyomas.Methods70femaleSprague-Dalydividedinto7groups:controlgroup,modelgroup,loediumdosagegroupofDaHuangandZheChong,higherdosagegroupofDaHuangandZheChong,DaHuangZheChong-2000)全自動計數(shù),按試劑盒要求測定血清孕激素(P)水平。分別在雙側(cè)宮

3、角最大直徑及宮頸處取材3塊,脫水、石蠟包埋、HE染色。按試劑盒說明進行SP法免疫組化染色。讀片參照Forml-1正常對照958.72±24.16模型1082.24±12.73b大黃蟲小劑量974.48±9.87大黃蟲中劑量1066.66±15.42c大黃蟲大劑量1072.91±11.84大黃蟲丸1060.31±22.51d桂枝茯苓膠囊959.46±20.74d與正常對照組比較,aP0.05,bP0.01;與模型組比較,cP0.05,dP0.01圖3不同實驗組對大鼠孕激素水平的影響從表1及圖3可見,與正常大鼠

4、比較,模型組血清孕激素明顯升高。與模型組比較,大黃蟲3個劑量組可不同程度的降低大鼠血清中孕激素水平,以大黃蟲中劑量組有明顯統(tǒng)計學差異(P0.05)。大黃蟲丸、桂枝茯苓膠囊對大鼠血清孕激素水平也有顯著抑制作用(P0.01)。3.4不同實驗組對孕激素受體(PR)的影響見表2及圖4~5。表2不同實驗組對大鼠孕激素受體的影響從表2以及圖4~5中可見,孕激素受體(PR)陽性細胞核內(nèi)呈現(xiàn)棕黃色顆粒。正常組大鼠子宮平滑肌部位PR陽性細胞呈少量、散在分布(圖5a);模型組大鼠子宮平滑肌PR陽性細胞密度明顯增強,其陽性信號表

5、達呈強陽性(圖5b),與正常組比較,二者陽性表達率有極顯著差異(P0.01);大黃蟲3個劑量組(圖5cde)、大黃蟲丸組(圖5f)及桂枝茯苓膠囊組(圖5g)大鼠子宮的PR陽性細胞密度明顯降低,與模型組有極顯著差異(P0.01)。4討論子宮肌瘤是臨床常見病、多發(fā)病,病因及發(fā)病機理十分復雜,涉及機體局部或整體雌、孕激素及其受體的變化、局部多肽生長因子、細胞分裂率的改變及體細胞突變等許多方面,其中卵巢激素依賴性已達成共識。我們采用外源性雌、孕激素負荷法建立子宮肌瘤模型。子宮大體各項指標如子宮濕重、子宮指數(shù)(子宮濕

6、重/大鼠體重)、宮頸及宮體最大直徑等均明顯大于正常大鼠;HE染色顯示其子宮平滑肌層出現(xiàn)局灶性增生,平滑肌排列紊亂,細胞增大,病理改變與子宮肌瘤病理組織學結(jié)構類似,說明造模成功。從20世紀70年代以來,中醫(yī)治療子宮肌瘤的學術探討日趨活躍。經(jīng)方治療是最早使用并得到持續(xù)關注的治療方法。結(jié)合歷代對“癥瘕”的認識,我們認為,子宮肌瘤屬癥積范疇,是實質(zhì)包塊,瘀血內(nèi)阻是其病機關鍵,因此治宜破血消癥。大黃、蟲對藥組合出自《金匱要略》下瘀血湯、大黃蟲丸等名方,大黃破積導滯、瀉火涼血,行瘀通經(jīng);蟲破血逐瘀,通絡理傷。蟲入肝經(jīng),

7、走血分而化瘀血,大黃入血分而逐瘀血。二藥配伍,相互促進,破血逐瘀,消癥散結(jié)之力大增。該對藥組合善治瘀血導致的閉經(jīng)、癥瘕(子宮肌瘤、卵巢囊腫、肝脾腫大等)、產(chǎn)后血瘀腹痛等5。本研究從經(jīng)方對藥入手,探討活血化瘀治則對孕激素及其受體的影響。結(jié)果顯示,大黃蟲中劑量組血清孕激素較模型組顯著降低,小、大劑量組無明顯差異,說明大黃蟲降低雌、孕激素的作用與大黃蟲丸、桂枝茯苓膠囊作用相似。大鼠子宮平滑肌細胞PR的免疫組化染色結(jié)果也顯示,正常組PR陽性表達率顯著低于模型組,大黃蟲用藥組平滑肌細胞與模型組相比,PR蛋白含量明顯下

8、降。表明肌瘤局部PR的含量增高是其局部高激素水平和細胞增殖的主要原因。所以大黃蟲治療子宮肌瘤的機理都可能與降低體內(nèi)孕激素及其平滑肌細胞受體含量有關??傊瑥慕?jīng)方中挖掘關鍵對藥組合研究子宮肌瘤者未見報道,本研究方案作為經(jīng)方研究的新切入點,旨在篩選特效組合,為大黃、蟲的臨床療效提供實驗依據(jù),并為進一步提取有效成分獲得單體奠定基礎?!?/p>

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