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1、東北藜蒿提取物體外抗菌作用的初步研究論文喬海霞劉進軍張玉妥田嘉明王愛華張進順【摘要】目的:研究東北藜蒿提取物的體外抗菌作用。方法:采用試管稀釋法測定東北藜蒿提取物水煎劑、醇提物對13種臨床常見病原菌的最低抑菌濃度(MIC),判定抗菌效果。結果:東北藜蒿水煎劑、醇提物對13種臨床常見病原菌均有不同程度的抗菌作用。結論:東北藜蒿提取物在體外有一定抗菌作用?!娟P鍵詞】藜蒿;最低抑菌濃度;微生物敏感性試驗【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheantibacterialfunctionofArtemisiaselengensi
2、sturczextractinnortheastchinainvitro.Methods:Thetubebrothmethodsintheminimalinhibitionconcentration(MIC)for13monbacteriastrains.Results:Itonbacteriastrains.Conclusion:ArtemisiaselengensisTurcz.innortheastchinaholdsantibacterialeffectsonmonpathogensinvitro.【KEYinimalInhibitionCo
3、ncentration,MicrobialSensitivityTests藜蒿為菊科植物,又稱蔞蒿,在我國主要生長在鄱陽湖一帶,東北、華北和中南地區(qū)均有野生分布,含有豐富的人體必需的微量元素[1]。遠在唐代,孫思邈就記載了藜蒿的藥用價值“藜蒿性平,味甘辛”,具有健體補虛、清心解毒、利膽退黃作用,主治肝膽濕熱、脾虛納滯等病癥。近年來研究表明藜蒿提取物具有降壓作用[2],也有少量報道其有不同程度抑菌作用[3]。為了開發(fā)藜蒿的藥用資源,為臨床應用提供科學依據(jù),我們對東北藜蒿的體外抗菌作用進行了初步研究。1材料與方法1.1一般資料1.1.1藥材干燥藜蒿原植物
4、產(chǎn)于東北。1.1.2菌種乙型副傷寒沙門菌,銅綠假單胞菌,大腸埃希菌.freelin后加熱煮沸。開始用強火,沸騰后改用文火,保持微沸30min至1h,攪拌、趁熱過濾。藥渣再加蒸餾水煮沸30min,濾過。合并濾液,濃縮成含生藥2g/mL的藥液,滅菌后備用。1.2.2藜蒿醇提物的制備參照陳奇的方法[4]進行,用60%乙醇提取,濃縮成含生藥2g/mL的藥液,滅菌后備用。1.2.3菌液的制備1.2.3.1標準比濁管配制0.048mol/L(1.175%)氯化鋇0.5mL,.freelol/L(1%)硫酸溶液99.5mL,混勻后用530nm波長比色調整其濁度,使
5、吸收值為0.1。相當于5×(107~108CFU/mL)。其操作參考醫(yī)學微生物學實驗指導[5]。1.2.3.2實驗菌液制備將實驗所用13種菌的培養(yǎng)物(菌落)用無菌生理鹽水制成菌液,濃度相當于0.5麥氏比濁。1.2.4藜蒿提取物(藥液)的稀釋藜蒿提取物采用試管稀釋法[4],每一組實驗取試管5支,分別標記1、2、3、4、5,共13組,用MH肉湯(細菌)、沙氏液體(真菌)倍比稀釋藥液至待測的濃度,依次為1.5g/mL、1.0g/mL、0.5g/mL、0.25g/mL、0.125g/mL。另取3支試管作為對照管,分別標記為“MH肉湯對照”,“藥物原濃度對照”
6、,“測試菌生長對照”。1.2.5實驗方法藥液稀釋好之后將13種實驗菌液分別加入13組含藥液培養(yǎng)基的試管中,除MH肉湯對照管外每管0.1mL菌液。所有試管放置溫箱內37℃,培養(yǎng)24h后觀察結果,在對照管符合要求的情況下,將各實驗管的培養(yǎng)物接種至相應培養(yǎng)基的瓊脂平板上,確定是否有細菌生長。37℃,24h觀察結果,以瓊脂平板上完全無細菌生長的藥物最高稀釋度為最低抑菌濃度(MIC)。2結果2.1東北藜蒿水煎劑對13種病原菌的最低抑菌濃度(MIC)見表1。表1東北藜蒿水煎劑對13種病原菌的最低抑菌濃度注:有病原菌生長“+”無病原菌生長“-”結果顯示:東北藜蒿水
7、煎劑對細菌和真菌均有不同程度的抑菌作用,對鮑曼不動桿菌抑菌作用較強,MIC為0.25g/mL。對真菌中熱帶念珠菌抑菌效果較好,MIC為1.0g/mL,重復性實驗結果一致。2.2東北藜蒿醇提物對13種病原菌的最低抑菌濃度見表2。表3東北藜蒿醇提物對13種病原菌的最低抑菌濃度結果顯示:東北藜蒿醇提物對表皮葡萄球菌、銅綠假單胞菌抑菌作用很強,MIC為0.125g/mL。對真菌中近平滑念珠菌有較強抑菌效果,MIC為0.25g/mL。3討論實驗結果表明東北藜蒿水煎劑及醇提物均有體外抗菌作用。與已報道的藜蒿水煎劑對大腸桿菌,金黃色葡萄球菌,痢疾桿菌的MIC值[4
8、]不完全相同,與我們實驗的其它藜蒿MIC值也不同,可能因為藥材產(chǎn)地不同導致藥材化學成分含量不一致,以致抗菌效