雙料喉風(fēng)散的提取工藝優(yōu)化研究

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1、雙料喉風(fēng)散的提取工藝優(yōu)化研究劉娜，林華慶,鄧紅，張蜀【摘要】　　目的研究雙料喉風(fēng)散中4味藥材的最佳提取條件。方法采用正交設(shè)計(jì)法，以體外抑菌效果和苦參堿、鹽酸小檗堿的含量為指標(biāo)，以醇濃度、提取液倍數(shù)、提取次數(shù)、提取時(shí)間為因子進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果雙料喉風(fēng)散中4味藥材的最佳提取條件是A1B1C2D3：即是用8倍量70%乙醇回流提取3次，第1次1h，第2次1h，第3次30min。結(jié)論優(yōu)選得到的工藝穩(wěn)定可行?！娟P(guān)鍵詞】正交實(shí)驗(yàn)體外抑菌山豆根黃連提取工藝　　Abstract:ObjectiveTostudythebestextractionprocessforfourherbsthatarepose

2、dofShuangliaoHoufengmedicament.MethodsUsinginvitroinhibitoryeffectextractiontimeandthecontentsofmatrineandberberinehydrochlorideintheextractasindexes,orthogonaldesignizetheprocess.Theeffectoffourfactorssuchasalcoholconcentration,theproporationofeandthemumberofextractionumprocessconditionseant8

3、timesamountof70%ethanolbycycleextractionfor3times,thefirsttimeandthesecondtimeizedprocessisfeasiblefortheextraction.　　Keye;Extractiontechnology　　雙料喉風(fēng)散由山豆根、黃連、甘草和青黛等中藥組成，具有清熱解毒、消腫利咽等功效，用于肺胃熱毒熾盛所致的咽喉腫痛、口腔糜爛、齒齦腫痛、鼻竇膿腫、皮膚潰爛等癥；同時(shí)，對(duì)褥瘡、膿皰瘡、腳氣、外耳道炎、新生兒臀部紅斑等病癥的治療，經(jīng)臨床驗(yàn)證，療效顯著，可明顯減輕癥狀〔1〕。但該方為散劑，在口腔中停留時(shí)間短，

4、影響其療效。為將其制成制劑，本實(shí)驗(yàn)對(duì)該方中的部分組分（山豆根、黃連、甘草和青黛）提取工藝進(jìn)行篩選，確定該復(fù)方的最佳提取工藝?！　?儀器與試藥　　Ultimate3000液相色譜儀(美國戴安)，PDA-3000型檢測(cè)器，CHROMELEONVersion數(shù)據(jù)處理機(jī)；SGC-300H智能型人工氣候箱；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)RE52-05，上海亞榮生化儀器廠?！　】鄥A、鹽酸小檗堿對(duì)照品，購自中國藥品生物制品檢定所；含量測(cè)定用水為重蒸餾水，甲醇、乙腈為色譜純，其它試劑均為分析純?！　∩蕉垢?、黃連、甘草、青黛均購自廣州致信中藥飲片有限公司，批號(hào)060901。黃連產(chǎn)地四川、山豆根產(chǎn)地廣西、甘草產(chǎn)地內(nèi)蒙古、

5、青黛產(chǎn)地廣東，經(jīng)檢驗(yàn)符合《中國藥典》規(guī)定?！　【辏航瘘S色葡萄球菌、白色念珠菌、綠膿桿菌（本院微生物實(shí)驗(yàn)室保留菌株）。培養(yǎng)基：普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基?！　?方法與結(jié)果　　2.1正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)在　　2.3.3鹽酸小檗堿的含量測(cè)定方法對(duì)照品溶液的制備：精密稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品，用甲醇溶解，制得每毫升中約含鹽酸小檗堿50μg的對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備：同“2.3.2”項(xiàng)中供試品溶液的制備方法；色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相；乙腈-0.033mol·L-1KH2PO4水溶液（磷酸調(diào)pH至3.70）(28∶72)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為345nm，進(jìn)樣量10μl，理論塔板

6、數(shù)按鹽酸小檗堿峰計(jì)算，應(yīng)不低于2000；測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算，即得?！　?.4指標(biāo)測(cè)評(píng)及處理正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3，方差分析結(jié)果見表4～6。表3L9(34)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果（略）表4體外抑菌方差分析（略）表5苦參堿方差分析（略）表6鹽酸小檗堿方差分析（略）　　從表4～6可以看出，用對(duì)體外抑菌實(shí)驗(yàn)影響最為顯著的是提取次數(shù)，優(yōu)先順序?yàn)椋篋>A>B>C；對(duì)苦參堿的含量影響最為顯著的是醇的濃度，優(yōu)先順序?yàn)椋篈>B>D>C；對(duì)鹽酸小檗堿含量影響最為顯著的是提取次數(shù)，優(yōu)先順序?yàn)椋篋>C

7、>A>B。從表3可以看出，用正交設(shè)計(jì)表得出的最佳工藝，體外抑菌和鹽酸小檗堿的完全相同為A1B3C3D3，苦參堿為A1B1C1D1。結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際，綜合考慮，3個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)確定。該復(fù)方的最佳提取工藝為A1B1C2D3，即是用8倍量70%乙醇回流提取3次，第1次1h，第2次1h，第3次30min?！　?.5驗(yàn)證最佳提取工藝按確定的最佳提取工藝：用8倍量70%乙醇回流提取3次，第1次1h，第2次1h，第3次30min。重復(fù)提取3批，測(cè)的苦參堿含量分別為：1.46%，