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《皺皮木瓜總黃酮鎮(zhèn)痛作用的機制分析 》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、皺皮木瓜總黃酮鎮(zhèn)痛作用的機制分析【摘要】目的探討皺皮木瓜總黃酮（FLC）的鎮(zhèn)痛作用及其鎮(zhèn)痛機制。方法利用小鼠熱板、扭體法模型和兔耳皮下K+滲透外周致痛模型，觀察FLC的鎮(zhèn)痛作用，并分析與Ca2+的關(guān)系。結(jié)果FLC不僅具有全身鎮(zhèn)痛作用，還具有外周鎮(zhèn)痛作用；其全身及外周鎮(zhèn)痛作用可被CaCl2拮抗，被EGTA所加強。5%，10%和20%FLC呈濃度依賴性抑制50mmol·L-1K+誘導蟾酥坐骨神經(jīng)Ca2+含量增加；10%FLC抑制10-5mmol·L-1NE誘導蟾酥坐骨神經(jīng)Ca2+含量增加。結(jié)論FLC的鎮(zhèn)痛作用機理可能與其抑制神經(jīng)組織鈣通道和
2、非神經(jīng)組織鈣通道，減少致痛介質(zhì)釋放等因素有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】皺皮木瓜總黃酮鈣離子坐骨神經(jīng)鎮(zhèn)痛作用植物中的黃酮類化合物具有多種藥理活性。近年來發(fā)現(xiàn)蘆丁、銀杏葉總黃酮、金絲桃苷和黃芩苷等生物黃酮類化合物均有較強的鎮(zhèn)痛作用〔1～5〕。本實驗室以前的研究發(fā)現(xiàn)皺皮木瓜的乙醇提取物具有鎮(zhèn)痛作用〔6〕。為了進一步尋找其中的有效部位，本文利用皺皮木瓜總黃酮組分，對其鎮(zhèn)痛作用進行了深入的實驗研究?！ ?材料 顱痛定（Rotundine，Rot），山西云鵬制藥有限公司出品，批號20060402；CaCl2，武漢化工試劑有限公司產(chǎn)品；乙二醇雙醚四乙酸（EGTA
3、），華中科技大學提供；硝苯地平（Nifedipine，Nif），湖北華中藥業(yè)有限公司出品，批號20070122;皺皮木瓜總黃酮（FLC）由三峽大學天然產(chǎn)物研究與利用實驗室提供，經(jīng)酒精回流、大孔吸附樹脂分離純化，臨用時配成相應(yīng)濃度備用。其他試劑均為市售產(chǎn)品?！ ?方法 2.1小鼠熱板法取雌性昆明種小鼠50只，普通清潔級，體重18～22g，選擇其基礎(chǔ)痛閾在10～25s之間，隨機分為5組，每組10只，腹腔注射給藥。分組及用藥劑量見表1。調(diào)節(jié)熱板儀溫度至55℃，以雌性小鼠接觸熱板至開始舔后足的潛伏期為基礎(chǔ)痛閾指標，分別測得小鼠給藥后30，60
4、，90min痛閾值?！ ?.2小鼠扭體法取昆明種小鼠50只，普通清潔級，雌雄不拘，體重18～22g，隨機分為5組，每組10只。分組及用藥劑量見表2。各組小鼠給藥40min后，腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只，觀察注射醋酸后30min內(nèi)扭體反應(yīng)（后肢伸直，背部抬高，腹部凹陷）次數(shù)作為致痛的指標。 2.3家兔耳皮下K+滲透外周致痛模型實驗取家兔30只，體重1.5～2.0kg，隨機分5組，分組及用藥劑量見表3。置家兔于兔盒中，在耳根部中央動脈順血流方向用7#針頭刺入后，立即注入0.5ml肝素進行局部抗凝處理并固定；將耳背部內(nèi)、外兩側(cè)耳緣
5、靜脈近心端分別用7#注射針頭沿靜脈血流方向逆向刺入并引流至體外，用蛙心夾夾住靜脈以阻斷其回流。在耳尖部固定一金屬圈，直徑約0.8cm，充以飽和氯化鉀溶液棉球，作為刺激電極正極，在耳根部固定一相同金屬圈，充以生理鹽水棉球，作為參考電極，兩電極連上BL-420E+生物機能實驗系統(tǒng)，逐步加大刺激電流，以引起家兔掙扎時的最小刺激電流為痛閾指標,制成兔耳皮下K+滲透外周致痛模型，分別測定并記錄給藥前后痛閾，按以下公式，求出鎮(zhèn)痛效應(yīng)。 鎮(zhèn)痛效應(yīng)（%）=（給藥后痛閾－給藥前痛閾）/給藥前痛閾×100% 同法測得給藥前后對側(cè)兔耳痛閾值的變化，以排除
6、藥物從側(cè)枝循環(huán)回流至全身產(chǎn)生的全身鎮(zhèn)痛效應(yīng)?！ ?.4坐骨神經(jīng)鈣含量的測定按文獻方法制備蟾蜍坐骨神經(jīng)標本。標本稱重，隨即將神經(jīng)標本浸在4℃的任氏液中1h，分別加入50mmol·L-1KCl和10-5mol·L-1NA，刺激鈣通道開放，以增加鈣離子內(nèi)流，繼續(xù)在4℃任氏液中保存1h后取出標本，用無鈣任氏液沖洗2次，以沖去標本表面上的鈣離子，濾紙吸干，放入去離子水清洗的坩鍋內(nèi)待消化。FLC組則在未使用激動劑前將標本浸在不同濃度的FLC中30min，再分別放入上述相同的激動劑中，后續(xù)處理相同。所有標本分別加入混合酸（硝酸0.9，高氯酸0.1）1
7、.0ml在電熱板上徐徐加熱，消化至無色，待高氯酸冒煙時取下，加入2%HCl溶解，再加入500ppm鑭鹽(促鈣釋放劑)，定溶后待測。采用HITACHIZ-2000型原子吸收分光光度計測定（測定波長42207nm，燈電流10mA，狹縫0.7nm）。見圖1～2。 2.5統(tǒng)計學處理所有數(shù)據(jù)依據(jù)SPSS10.0版統(tǒng)計軟件進行t檢驗分析處理?！ ?結(jié)果 3.1FLC對熱板法致痛實驗小鼠痛閾的影響結(jié)果見表1?！ ”?FLC對實驗小鼠痛閾的影響（略） 與NS比較,＊P0.05；與20%FLC比較，△P0.05；n=10 實驗結(jié)果表明，2.0
8、g·kg-1FLC明顯延長小鼠舔足潛伏期，其延長效應(yīng)能被EGTA增強，被CaCl2所拮抗?！ ?.2FLC對扭體法致痛實驗小鼠扭體次數(shù)的影響結(jié)果見表2?！ ”?FLC對小鼠扭體次數(shù)的影響（略） 與NS比較
