脂聯(lián)素在皖南花豬脂肪中的表達(dá)及對(duì)肌內(nèi)脂肪的影響

脂聯(lián)素在皖南花豬脂肪中的表達(dá)及對(duì)肌內(nèi)脂肪的影響

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1、AnhuiAgriculturalUniversityExpressionofAdiponectinonadiposetissueandeffectsofAdiponectinonIntramuscularfatofWannanhuapigsAnswerer:TianleileiAdvisorProfessor:ZhouJieMajor:BasicVeterinaryScienceResearchDirection:AnimalPhysiologyandBiochemistryInstitute:CollegeofAnimalSci

2、ence&TechnologyAnswerCommitteeChairman:MAY2013本課題是國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目:(30771581)“脂聯(lián)素對(duì)皖南花豬脂肪沉積和脂肪-肌肉相互作用的影響”摘要皖南花豬是優(yōu)良的安徽省地方豬種,其優(yōu)點(diǎn)主要在于肉質(zhì)好和繁育性能強(qiáng)。脂肪組織不僅是一個(gè)儲(chǔ)存脂肪組織。脂聯(lián)素(Adiponectin,Adp)是由脂肪組織分泌的細(xì)胞因子,到目前為止它是唯一伴隨脂肪變多而它的血液濃度卻是降低的細(xì)胞因子。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分析腎周脂肪、皮下脂肪中脂聯(lián)素及其受體基因水平差異,旨在探討脂聯(lián)素和皖南花豬肉質(zhì)的內(nèi)在關(guān)系。研究重

3、組脂聯(lián)素對(duì)肌內(nèi)脂肪細(xì)胞的作用,探討脂聯(lián)素對(duì)豬肉質(zhì)的影響和作用機(jī)制。1皖南花豬脂肪組織中脂聯(lián)素及其受體基因的表達(dá)從皖南花豬繁育中心挑選4頭皖南花豬試驗(yàn),常規(guī)條件下飼養(yǎng)。養(yǎng)至90d屠宰,屠宰前禁食12h,采集皮下脂肪組織和腎周脂肪組織,采用相對(duì)定量實(shí)時(shí)熒光PCR方法檢測(cè)中脂聯(lián)素(Adp)、脂聯(lián)素受體1(AdipoR1)、脂聯(lián)素受體2(AdipoR2)mRNA表達(dá)。結(jié)果顯示:(1)AdpmRNA在皮下脂肪的表達(dá)顯著高于腎周脂肪(P<0.05);AdipoR1、AdipoR2mRNA在皮下脂肪的表達(dá)極顯著(P<0.01)高于腎周脂肪。(2)

4、皖南花豬皮下脂肪Adp與AdipoR1、AdipoR2顯著相關(guān)(r=0.60,P<0.05;r=0.57,P<0.05);皖南花豬腎周脂肪Adp與AdipoR1、AdipoR2顯著相關(guān)(r=0.31,P<0.05;r=0.37,P<0.05)。以上結(jié)果表明:表明脂肪組織表達(dá)Adp及其受體,皮下脂肪可能是Adp的主要來(lái)源;且是Adp調(diào)節(jié)的主要部位。2脂聯(lián)素對(duì)豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞的影響及其機(jī)制挑選5d皖南花豬背最長(zhǎng)肌組織,分離出實(shí)驗(yàn)所需的前體肌內(nèi)脂肪細(xì)胞,到細(xì)胞 融合80%以上,傳代繼續(xù)培養(yǎng),用不同濃度重組脂聯(lián)素(recombinantadi

5、ponectin,rAdp) 處理,通過(guò)油紅O染色法鑒定,MTT方法測(cè)定細(xì)胞活力;利用qRT-PCR方法測(cè)Adp、 AdipoR2、AdipoR1、PPARα和AMPKmRNA的表達(dá)量。顯示,脂肪細(xì)胞活力在添加 rAdp后有降低趨勢(shì),2μg/ml作用24h到達(dá)顯著差異水平(P<0.05);rAdp處理12 h后,脂肪細(xì)胞AdipoR1和AdipoR2mRNA表達(dá)水平顯著升高(P<0.05),AMPK mRNA表達(dá)量顯著下降(P<0.05),沒(méi)有劑量依賴性。用rAdp處理細(xì)胞48h,Adp mRNA表達(dá)量顯著下降(P<0.05),PP

6、ARαmRNA表達(dá)量顯著升高(P<0.05), 劑量效應(yīng)不是很明顯;AMPKmRNA表達(dá)量在10μg/mLrAdp處理組顯著升高(P<0.5)。CoumpoundC處理阻斷rAdp處理后導(dǎo)致的AMPKmRNA表達(dá)量降低。提示: 重組脂聯(lián)素處理豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞有降低細(xì)胞活力作用,能上調(diào)AdipoR1、AdipoR2基 因表達(dá),影響PPARα和AMPK基因的表達(dá),從而對(duì)肌內(nèi)脂肪細(xì)胞起調(diào)節(jié)作用。 關(guān)鍵詞:脂聯(lián)素;肌內(nèi)脂肪細(xì)胞;脂聯(lián)素受體;PPARα;AMPKIAbstractWannanhuapigsweresuperordinaryloc

7、alonesofAnhuiprovince.ThegeneticqualitiesandproductiontraitsofWannanhuapigswerespecialinChineselocalpigs.Adiposetissuewerenotonlythetissueforfatstorage,butalsothetissuewhichplayedanimportantroleinendocrine,metabolism,controllingbody'senergybalance,ets.Uptonow,adiponect

8、inwasasoleadipokineswhosebloodconcentrationdecreasedwiththequantityofadiposeorganization(tissue)increasing.Inthisstud

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