開(kāi)音顆粒對(duì)小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究

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1、開(kāi)音顆粒對(duì)小鼠免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究嚴(yán)道南卞慧敏邢業(yè)強(qiáng)藺莉霞【摘要】目的觀察開(kāi)音顆粒對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能和對(duì)小鼠血清溶菌酶含量的影響。方法參照文獻(xiàn)所載方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果開(kāi)音顆粒高、中劑量均能提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù),并具有提高正常小鼠溶菌酶含量的趨勢(shì)。結(jié)論開(kāi)音顆粒對(duì)機(jī)體非特異性免疫功能有一定的增強(qiáng)作用?!娟P(guān)鍵詞】開(kāi)音顆粒免疫 開(kāi)音顆粒由活血祛淤、化痰散結(jié)的中藥紅花、三棱、浙貝母等組成,治療慢性喉炎、聲帶小結(jié)有良好的臨床效果〔1〕。對(duì)此方進(jìn)一步開(kāi)發(fā)研究,有必要檢驗(yàn)其對(duì)免疫功能的影響,為此我們進(jìn)行了開(kāi)音顆粒對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能和對(duì)小鼠血清溶菌

2、酶含量影響的實(shí)驗(yàn)研究?,F(xiàn)報(bào)道如下:1材料1.1動(dòng)物ICR小鼠50只,雌雄各半,體重18~22g,由南京中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。1.2藥物開(kāi)音顆粒浸膏,由南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥廠提供,4.25g生藥/ml;金嗓散結(jié)丸,西安碑林中藥廠產(chǎn)品。1.3雞紅細(xì)胞懸液的制備在無(wú)菌操作下,自雞翼下靜脈采血,置于三角燒瓶中,加入相當(dāng)于血液量5倍的Aisever’s溶液〔枸櫞酸鈉·2H2O80g,枸櫞酸0.5g,無(wú)水葡萄糖18.7g,NaCl14.2g,蒸餾水加至1000ml后過(guò)濾,在68.9kPa(10磅)蒸氣壓滅菌20min,4℃冰箱保存〕,搖勻,臨用時(shí)用生理鹽水洗滌3次,

3、前2次以1500r/min離心分離紅細(xì)胞,各5min,最后1次以2000r/min離心,直至紅細(xì)胞壓積恒定。然后按此壓積量,用生理鹽水配成1%的濃度。1.4溶菌酶檢測(cè)板購(gòu)自南京大學(xué)生化測(cè)試實(shí)驗(yàn)室。2方法與結(jié)果2.1對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響2.1.1動(dòng)物分組小鼠隨機(jī)分為5組,每組10只,即空白對(duì)照組(等容積生理鹽水)、金嗓散結(jié)丸組(2.08g/kg)及開(kāi)音顆粒高(19.5g生藥/kg)、中(6.5g生藥/kg)、低(2.17g生藥/kg)3個(gè)劑量組。2.1.2方法各組小鼠分別灌胃給藥,連續(xù)5d。第5天給藥后1h于腹腔注入1%的雞紅細(xì)胞0.5ml/只,45mi

4、n后頸椎脫臼處死小鼠,取腹腔液涂片,然后將玻片放在墊有濕紗布的盒中,置于37℃孵箱中溫育30min,取出玻片,放入生理鹽水中漂洗,以除去未貼壁細(xì)胞。晾干后以甲醇液固定5min,再用4%姬姆薩-瑞特氏液染色3min后,用蒸餾水漂洗,晾干后在油鏡下每片計(jì)巨噬細(xì)胞數(shù)200個(gè),按下式計(jì)算其吞噬指數(shù)與吞噬百分率〔2〕:吞噬百分率(%)=吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/200個(gè)巨噬細(xì)胞×100%吞噬指數(shù)=被吞噬的雞紅細(xì)胞總數(shù)/200個(gè)巨噬細(xì)胞2.1.3結(jié)果開(kāi)音顆粒高、中劑量和金嗓散結(jié)丸對(duì)照藥均能提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬率和吞噬指數(shù),與空白對(duì)照組比較有顯著性差異。結(jié)果見(jiàn)表1。表1開(kāi)

5、音顆粒對(duì)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響與空白對(duì)照組比較,*P0.05,**P0.01;n=102.2溶菌酶含量測(cè)定2.2.1動(dòng)物分組同“2.1.1”項(xiàng)。2.2.2方法各組小鼠分別灌胃給藥,連續(xù)5d。第5天給藥后1h小鼠球后靜脈叢取血,離心析出血清,用溶菌酶檢測(cè)板,精確吸取10μl小鼠血清加入檢測(cè)板,水平放置,于36~37℃隔水式恒溫箱,擴(kuò)散反應(yīng)4h,然后用附尺量取各孔檢品的溶菌圈直徑,查標(biāo)準(zhǔn)曲線得出相應(yīng)的溶菌酶含量。2.2.3結(jié)果各給藥組均有提高正常小鼠血清溶菌酶含量的趨勢(shì),但與金嗓散結(jié)丸對(duì)照組比較差異均無(wú)顯著性。結(jié)果見(jiàn)表2。表2開(kāi)音顆粒對(duì)小鼠血清溶菌酶含量的影響

6、3討論開(kāi)音顆粒具有活血祛淤、化痰散結(jié)的功能,是用于治療慢性喉炎和聲帶小結(jié)氣滯血淤痰凝證,在臨床和實(shí)驗(yàn)研究中均發(fā)現(xiàn)此方具有良好活血化淤作用〔3〕,但是考慮到用活血化淤藥物治療炎癥性疾病,必須觀察其是否具備抗炎作用和提高機(jī)體免疫功能的作用,所以我們進(jìn)行了此項(xiàng)實(shí)驗(yàn)。開(kāi)音顆粒19.5,6.5g生藥/kg兩個(gè)劑量有提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的作用,并且有提高正常小鼠血清溶菌酶含量的趨勢(shì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明開(kāi)音顆粒對(duì)機(jī)體非特異性免疫功能有一定的增強(qiáng)作用,可提高機(jī)體的抗感染能力,在一定程度上有助于疾病的治療?!?/p>

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