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1、生藥學(xué)總論桂林醫(yī)學(xué)院天然藥物教研室生藥學(xué)的主要任務(wù)及意義真實性有效性安全性生藥學(xué)的基本理論與基本方法內(nèi)容生藥質(zhì)量的評價方法生藥學(xué)總論內(nèi)容教學(xué)內(nèi)容一、總論的學(xué)習(xí)內(nèi)容*經(jīng)典理化鑒定方法二、中成藥的鑒定*DNA分子鑒定*養(yǎng)陰清肺丸的鑒定*生藥學(xué)生藥質(zhì)量控制方法原植物形態(tài)特征性狀特征*DNA分子特征顯微特征定性分析定量分析有害物質(zhì)限量(重金屬、農(nóng)殘、毒性成分)真?zhèn)蝺?yōu)劣一、理化鑒定---定性分析理化鑒定(physicalandchemicalidentification):利用某些物理的、化學(xué)的或儀器分析方法,對生藥中所含有效成分或主要成分或特征性成
2、分進行定性分析,以鑒定其真?zhèn)蔚囊环N方法。理化鑒定中藥理化鑒定發(fā)展很快,新的分析手段和方法不斷出現(xiàn)??纱_定中藥的真?zhèn)蝺?yōu)劣;開發(fā)利用新資源;指導(dǎo)中藥材的栽培加工,擴大藥用部分;制訂中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。發(fā)展方向:從宏觀和微觀的形態(tài)學(xué)鑒定向有效成分和藥效鑒定方向發(fā)展。常用的理化鑒定方法化學(xué)定性反應(yīng)微量升華熒光分析色譜法紙色譜與薄層色譜(PC&TLC)氣相色譜(GC)高效液相色譜(HPLC)電泳法光譜法定義方法直接將生藥切片或粉末置載玻片上,滴加試液,加蓋玻片在顯微鏡下觀察產(chǎn)生的結(jié)晶、沉淀或顏色。生藥的提取物置載玻片上,滴加試液,加蓋玻片在顯微鏡下觀察反應(yīng)
3、。顯微化學(xué)定位一、化學(xué)定性反應(yīng)1.顯微化學(xué)反應(yīng)2.沉淀反應(yīng):利用生藥某些化學(xué)成分能與某些試劑產(chǎn)生特殊的沉淀反應(yīng)來鑒別。3.泡沫反應(yīng)和溶血指數(shù)的測定二、微量升華利用中藥中所含的某些化學(xué)成分,在一定溫度下能升華的性質(zhì),獲得升華物,在顯微鏡下觀察其結(jié)晶形狀、顏色及化學(xué)反應(yīng)作為鑒別特征。一、微量升華的原理及方法二、在鑒定中的應(yīng)用三、熒光分析利用生藥中所含的某些化學(xué)成分,在紫外光或自然光下能產(chǎn)生一定顏色的熒光性質(zhì)進行鑒別。例如黃連飲片顯黃色熒光;浙貝母粉末顯亮淡綠色熒光;大黃粉末顯深棕色熒光。熒光效率主要與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)有關(guān),具有π-π共軛結(jié)構(gòu)的物質(zhì)才能
4、產(chǎn)生較強的熒光,共軛結(jié)構(gòu)加長,熒光增強。含有黃酮、恩醌、香豆素、木脂素成分的生藥,一般具有較強的熒光反應(yīng)。熒光分析法在生藥鑒定中的應(yīng)用定性分析紫外分析儀法1、觀察生藥整體2、觀察生藥的新鮮斷面或飲片3、觀察生藥粉末4、直接觀察生藥的某種溶劑浸出液5、將生藥提取液滴于濾紙上,揮干溶劑觀察6、生藥提取液與化學(xué)試劑作用后產(chǎn)生熒光7、多重觀察日光法熒光顯微鏡法熒光光譜法定量分析:熒光分光光度法、薄層熒光掃描法四、色譜法常用以下三種色譜法:薄層色譜法(TLC)氣相色譜法(GC)高效液相色譜法(HPLC)薄層色譜操作:選擇吸附劑制備薄層板點樣定性參數(shù)的
5、選測定顯色展開(比移值Rf、相對比移值Rst)應(yīng)用:定性分析定量分析以Rf做定性的依據(jù),因影響Rf因素多,需用標(biāo)準(zhǔn)對照品作對照。在兩種或兩種以上展開系統(tǒng)種展開,若樣品中斑點的Rf值與標(biāo)準(zhǔn)對照品的Rf值勻相同可基本肯定二者為同一化合物。定性鑒別用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照別標(biāo)準(zhǔn)對照品對照藥材用相對比移值鑒別用文字描述鑒別原點中心至斑點中心的距離Rst=原點中心至參考物質(zhì)斑點中心的距離定量鑒別分兩類:一是將待測物從薄層板洗拖后,選擇適宜的方法測定(洗脫法);二是薄層展開后,用薄層掃描儀在薄層板上測定被分離組分的含量(薄層掃描法)。洗脫法分四步進行:待測組分的
6、分離斑點定位斑點的收集及洗脫測定(多采用UV及可見光分光度法)薄層掃描法:波長的選擇(樣品波長、參比波長)測定方式的確立(透射、反射、熒光)掃描方式(直線式、鋸齒式)標(biāo)準(zhǔn)曲線線性化(與散射參數(shù)有關(guān),硅膠薄層板SX=3,氧化鋁薄層板SX=7)定量前需考察的主要內(nèi)容:工作曲線、精密度、準(zhǔn)確度測定方法:外標(biāo)一點法,外標(biāo)二點法。HPLC可用于定性和定量,色譜圖中各色譜峰的保留時間、色譜峰相對百分峰面積及主要色譜峰的UV吸收光譜,均可作為生藥真實性鑒定的指紋資料。是生藥及制劑質(zhì)量分析常用的方法。GC主要用于含揮發(fā)性成分的定性和定量。用于鑒定的數(shù)據(jù)主要
7、是保留時間、相對百分峰面積。常常和質(zhì)譜聯(lián)用,快速鑒定成分五、電泳法帶電質(zhì)點(分子、離子或膠體顆粒)在電場作用下,向著與其所帶電荷相反的電極移動,稱為電泳。應(yīng)用:生物學(xué)和生物化學(xué)領(lǐng)域。生藥中主要用于氨基酸、多肽、蛋白質(zhì)、核酸等。分光光度法紫外分光光度法可見分光光度法紅外分光光譜法原子吸收分光光度法六、光譜法一切物質(zhì)都會對可見光及不可見光中的某些波長的光線產(chǎn)生吸收。不過其吸收的程度是不同的。即物質(zhì)對不同波長的光線表現(xiàn)出不同的吸收能力,物質(zhì)的這一特性稱為選擇吸收。物質(zhì)對光線的選擇吸收反映了它們分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)的差異。也就是說,通過研究物質(zhì)得分子吸收光
8、譜,就可以鑒別物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)。這是分光光度法對生藥進行定性鑒別的依據(jù)。物質(zhì)吸收光子能量的強度,不僅取決于物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu),而且還與被光子所作用的物質(zhì)的分子數(shù)目,即物質(zhì)的濃度有關(guān)。這