仔豬黃痢大腸桿菌的分離鑒定

仔豬黃痢大腸桿菌的分離鑒定

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1、仔豬黃痢大腸桿菌的分離鑒定仔豬黃痢病是出生仔豬常發(fā)的急性、致死性腸道傳染病,多在仔豬出生后兒天內(nèi)發(fā)病,發(fā)病率高、死亡率高。臨床癥狀主耍以腹瀉、排黃色稀糞、急性死亡為主耍特征,剖檢宥腸炎和敗血癥變化,是危害哺乳仔豬的重要傳染病之一,嚴重影響仔豬的生長發(fā)育,對養(yǎng)豬業(yè)危害極大。2015年3只,北京順義某豬場突發(fā)仔豬腹瀉,排黃白色或黃色水樣稀便,根據(jù)流行病學、臨床癥狀和病理剖檢,并結(jié)合細藺病原分離、生化鑒定,致病性試驗,藥敏試驗,確診為仔豬黃痢大腸桿菌摘。對分離的菌株進行了藥敏試驗,篩選出了3種敏感藥物,根據(jù)診

2、斷及藥敏試驗結(jié)采采取了相極的控制措施,效果顯著經(jīng)治療,病情得到了宥效控制?,F(xiàn)報告如下。1發(fā)病情況北京順義某豬場于2015年3月,5日齡仔豬突然發(fā)病,仔豬腹瀉不止,患豬糞便呈黃a色或黃色水樣,仔豬迅速消瘦、全身衰弱,很快死亡。2臨診癥狀患豬腹瀉黃色水樣、順肛門流十*。精神沉郁,停止吃乳,脫水,迅速消瘦。3病理變化心包増厚,心包膜外面覆蓋纖維素性滲出物,心外膜小點出血。肝表面覆蓋一層灰黃色纖維素膜,肝腫大呈土黃色,表面有細小的灰白色壞死點。脾腫大出血。十二指腸出血。4實驗室診斷4.1細菌分離培養(yǎng)將采集的2份

3、肝臟組織分別接種馬丁瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基,37°C培養(yǎng)18?24h,觀察蘭落形態(tài)。挑取可疑菌落涂片、革蘭氏染色、鏡檢、純培養(yǎng)。4.2生化試驗參照BioMerieuxVITEK32全自動細尚鑒定及藥敏儀鑒定操作說明進行。取純化的單菌落接于0.45%NaCL基物安培管,用比濁儀制備浞濁度相當于1個麥氏單位的菌懸液,接種于VFTEK革蘭氏陰性菌鑒定卡(GNI+),放入讀數(shù)器中鑒定讀取結(jié)果。4.3致病性試驗將上述生化試驗鑒定為大腸桿菌陽性的菌株,分別取純化的單尚落接種普通背養(yǎng)肉湯,37°C培養(yǎng)24h,將

4、每個菌株的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物分別經(jīng)腹腔接種小白鼠各2只,每只注射0.2mL,同時用無菌肉湯以同樣途徑接種2只小白鼠作為對照,觀察、記錄試驗結(jié)果。對死亡小白鼠剖檢,并從肝、脾取樣接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基,37°C培養(yǎng)18?2仙,觀察結(jié)果。挑取單個菌落用革蘭氏染色法染色、鏡檢。4.4藥敏試驗采用紙片法進行。15種抗菌藥物紙片:氟苯尼考、慶大霉素、氟哌酸、氧氟沙星、恩諾沙星、強力霉素、卡那霉素、阿莫西林、四環(huán)素、鏈霉索、環(huán)丙沙星、林吋霉索、新霉索、金霉索、紅霉索。5結(jié)果5.1細菌分離培養(yǎng)2份樣品經(jīng)培養(yǎng)后生長良好,馬

5、丁瓊脂培養(yǎng)基上可見灰白色、圓形、光滑、濕潤的菌落,在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上形成紅色、圓形隆起、光滑濕潤、邊緣整齊的小菌落,革蘭氏染色為陰性小桿菌。符合大腸桿菌的培養(yǎng)及形態(tài)特征。5.2生化試驗將從病料屮分離純化的菌落經(jīng)BioMerieuxVITEK32全自動細菌鑒定儀鑒定得到極好鑒定結(jié)果,36株菌株均能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、阿拉伯糖、乳糖、木糖、鼠李糖、甘露醇、山梨醇,產(chǎn)酸產(chǎn)氣;不發(fā)酵棉子糖、肌醇、側(cè)金盞花醇;多數(shù)不能發(fā)酵蔗糖,少數(shù)發(fā)酵產(chǎn)酸;鳥氨酸脫羧酶、氧化酶均為陰性;甲基紅試驗陽性,V.P.試驗陰性。符合大

6、腸桿菌的生化特性。5.3致病性試驗將生化試驗鑒定為大腸桿菌陽性的2株菌株的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)物分別經(jīng)腹腔接種小

7、TJ鼠各2只,24h內(nèi)全部發(fā)病死亡,對照組均健活。對死亡小白鼠剖檢,并從肝、脾取樣接種于麥康凱瓊脂培養(yǎng)基,37°C培養(yǎng)18?24h,結(jié)果在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上形成紅色、闢形隆起、光滑濕潤、邊緣整齊的小菌落。挑取單個菌落用革蘭氏染色法染色、鏡檢,可見革蘭氏陰性小桿菌。結(jié)果表明,分離純化的2株大腸桿菌均為致病性大腸桿菌。5.4藥敏試驗經(jīng)鑒定,15種抗生素中氟苯尼考和新霉素高度敏感,慶大霉素中度敏感,其余1

8、2種均耐藥。6小結(jié)與討論6.1根據(jù)菌株形態(tài)染色鏡檢觀察、培養(yǎng)特性、生化特性等結(jié)果,可以確定所分離的菌株為大腸桿菌。6.2從藥敏試驗結(jié)果來看,從此豬群分離的大腸桿蘭的耐藥性很強,15種抗生素中只宥2種高度敏感,這可能與臨床中不合理使用抗生素宥關(guān)。此豬場采用氟苯尼考、新霉索高敏藥物治療,同吋釆用合理的相應(yīng)綜合防治措施,效果顯著,病情得到Y(jié)有效控制。6.3目前,豬大腸桿茼病仍然是我國規(guī)?;i場的重要多發(fā)病,隨著集約化養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展,由致病性大腸桿菌引起的仔豬腹瀉是目前最嚴重的仔豬傳染病之一,也是引起仔豬死亡的重

9、耍原因,其造成的經(jīng)濟損失日益嚴重。近年來,在我同,由致病性人腸桿菌引起的仔豬黃內(nèi)痢冇明顯上升趨勢,終年發(fā)生,仔豬死亡率培高,成活率降低,斷奶窩重降低,如果仔豬黃白痢與其他豬病混合感染,其死亡率更高。發(fā)病豬場經(jīng)過敏感藥物治療后,雖然能夠一定程度上降低仔豬的死亡率,但耐過豬大多生長發(fā)育遲緩、飼料報酬率降低。因此,采取冇效的措施預防和控制仔豬腹瀉,提高仔豬成活率己成為目前養(yǎng)豬業(yè)生產(chǎn)的一項重耍任務(wù)。6.4仔豬人腸桿菌病的發(fā)生受多種兇素的影響,人腸桿

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