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《公豬精液采精及稀釋》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、專業(yè)資料分享公豬采精與稀釋操作規(guī)程1、采精與精液處理流程(講究衛(wèi)生,控制溫度)(1)采精過程流程1、?進入實驗室后清潔雙手2、?準備稀釋液,并將稀釋液放入35℃水浴鍋中升溫3、?打開顯微鏡上的加熱板控制開關(guān),設(shè)定溫度到38℃4、?安裝集精杯(預(yù)熱到37℃),準備其它采精用品,放入壁廚5、?將公豬趕入采精室,關(guān)上柵欄,清潔其體表6、排出包皮液用0.1%KMnO4溶液清洗其腹部及包皮,再用清水洗凈,抹干。7、?戴上雙層手套,誘導(dǎo)公豬爬跨假母豬8、?鎖定并拉出陰莖9、?待排出部分清亮液體后,開始收集精液10、將集精杯放入壁廚11、
2、將公豬趕回圈內(nèi)(2)精液處理操作流程1.將一預(yù)溫后的燒杯或塑料杯放在電子秤上,打開電子秤,當(dāng)顯示為零時,將裝精液的食品袋從集精杯中取出放入杯中,顯示讀數(shù)為精液的重量。2.將放精液的燒杯輕輕搖勻精液后,放入35℃的水浴鍋中與稀釋液等溫。3.立即用取樣器取精液10~25微升左右,滴在載物臺上預(yù)熱的載玻片上,蓋上蓋玻片,估測活力。精子活力大于0.6,則可用于下一步的處理。4.另取1毫升精液放入加有10毫升生理鹽水的精子密度杯中,讀出讀數(shù)后,在查對表上查到精子密度值。5.計算精液可分裝的份數(shù)和最終的精液體積或重量。6.將大燒杯放在電
3、子秤上,除皮,然后再將精液袋放入其中,并將精液袋上口翻在杯沿外,將裝稀釋液的三角瓶從水浴鍋中取出,擦去底部水分,將稀釋液加入大燒杯中,直到達到計算的最終重量,輕輕搖動或用玻璃棒攪拌精液使其混合。7、精液稀釋后,檢查精液活力,若無明顯下降,開始分裝。8.將精液按規(guī)定重量分裝于各個精液瓶(袋)中,排出空氣后封口,進行精液標記,置22℃-25℃的室溫1小時后(或用幾層毛巾包被好后),降溫到20℃左右時直接放置17℃冰箱中。9.清洗各種容器并放于消毒柜中干燥消毒。完美DOC格式整理專業(yè)資料分享2、稀釋液的配制過程?2.1配制過程以1
4、000毫升BTS稀釋液為例,可用任一方法:①經(jīng)過清洗干燥消毒的三角瓶,將一袋BTS稀釋粉(50克)全部加入瓶中,用量筒量取雙蒸餾水1000毫升,加入三角瓶中。蓋上蓋子或用稀釋粉袋套在三角瓶口上,封緊搖動,使稀釋粉完全溶解?;蚍旁诖帕嚢杵魃希瑪嚢杓铀偃芙?。取下蓋子,放入35℃的水浴鍋中預(yù)溫?!∠♂屢河眠^后,三角瓶應(yīng)用蒸餾水沖洗,空干水分,然后將三角瓶、量筒用牛皮紙封口,放入80~120℃的消毒柜或干燥箱中烘干。②將兩個食品袋相套放入大燒杯中或塑料杯中,放在電子秤上,打開電子秤開關(guān),當(dāng)電子秤上讀數(shù)為零時,將連接蒸餾水容器的硅膠
5、管放出少量水后,將管口對準杯口注水,并注意讀數(shù)變化,當(dāng)接近1000克時,應(yīng)放慢流速,改為滴注,直到1000克。之后,應(yīng)將蒸餾水管的龍頭套好,防止污染。在大燒杯中加入一袋稀釋粉(50克)。從盛磁珠的小燒杯中取鑷子并夾取磁珠,在廢液缸上用洗瓶沖洗磁珠2-3次,待磁珠上水分滴凈后,放入燒杯中,然后將燒杯放在磁力攪拌器上,打開電源開關(guān)和加熱開關(guān),調(diào)整磁珠轉(zhuǎn)速旋扭,使磁珠以適當(dāng)速度旋轉(zhuǎn)(水體形成渦流),使稀釋粉全部溶解后,降低磁珠轉(zhuǎn)速,關(guān)閉加熱和電源開關(guān)。將杯子放入35℃的水浴中預(yù)溫。注:不能控溫的加熱磁力攪拌器使用時間不可超過10分
6、鐘,或及早關(guān)閉加熱電源;平時磁珠放在一個清洗干燥過的小燒杯中,注入新鮮蒸餾水半杯,鑷子為不銹鋼材料,也經(jīng)清洗干燥放入杯中,蓋上干凈的培養(yǎng)皿,每3周應(yīng)換掉陳水,沖凈換上新的蒸餾水。稀釋液加入精液中后,應(yīng)用小燒杯中的鑷子將磁珠從大燒杯中夾出,并在廢液缸上沖洗磁珠和鑷子前端3-4遍,待磁珠上水分滴凈后,連同鑷子放入小燒杯中,蓋上培養(yǎng)皿。完美DOC格式整理專業(yè)資料分享這種方法由于稀釋液是在一次性食品袋中配制的,因此,不需要對配制稀釋液的容器進行清洗和消毒,實現(xiàn)了稀釋液配制的免消毒。冬季稀釋粉溶解較慢,可將稀釋粉與水混合后,放入水浴鍋
7、中預(yù)溫10分鐘,再搖勻,可加速稀釋粉溶解。使用加熱磁力攪拌器者不必在水浴鍋中預(yù)溫。注:除大規(guī)模人工授精站外,一般不主張自己配制稀釋粉,推薦使用商業(yè)化稀釋粉,這些產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠。另外,稀釋粉與蒸餾水按什么比例混合是十分嚴格的,應(yīng)按照說明書上的配比進行稀釋粉的溶解,不可改變配比。2.2PH值與滲透壓用1N稀鹽酸或1N氫氧化鈉調(diào)整BTS稀釋液的PH值為7.2(6.8-7.4)左右,滲透壓為330mOsm2.3稀釋液的保存液態(tài)狀稀釋液冰箱4℃保存,不超過24小時,超過有效貯存期的變質(zhì)稀釋液應(yīng)廢棄。3、采精前的準備1.集精杯的準備應(yīng)
8、在實驗室中進行。用保溫杯作集精杯時,不能直接將精液采入杯中。將兩層食品袋裝入保溫杯內(nèi),并用潔凈的玻璃棒使其貼靠在保溫杯壁上,袋口翻向保溫杯外,上蓋一層專用過濾網(wǎng),用橡皮筋固定,并使過濾網(wǎng)中部下陷3厘米,以避免公豬射精過快或精液過濾慢時,精液外溢。安裝好后,將其放恒溫箱在37℃溫度下備用。如