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1、HPV聯(lián)合TCT檢查對不同級別宮頸病變HPV感染狀態(tài)患者的篩查意義研究魏曉芳江蘇省連云港市婦幼保健院江蘇連云港222005【摘要】目的探討HPV聯(lián)合TCT檢查對不同級別宮頸病變HPV感染狀態(tài)患者的篩查意義.方法選擇我科收治的72例CINII?III級患者，在治療前進行HPV感染率、基因亞型檢測，以及TCT細(xì)胞學(xué)檢測.結(jié)果不同級別宮頸病變患者的HPV陽性率、TCT異常率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P〉0.05).所有患者屮共計HPV陽性者67例，檢出HPV亞型12種，所占比例最高者為16型(53.73%),其次為58型(20.90%)、33型(13.43%),其屮67例HP
2、V(+｝者中TCT正常者12例,TCT異常者55例;5例HPV(—)者中TCT正常者2例；TCT異常者3例.兩者比較未見明顯差異(P〉0.05).HPV與TCT檢測均為陽性者的敏感性為76.38%,,高于其他檢測結(jié)果的敏感性.結(jié)論在對于不同級別宮頸病變HPV感染狀態(tài)患者的篩查屮，應(yīng)將年齡擴展至30歲以K,HPV多重感染可能是導(dǎo)致疾病進展的主要因素，故而HPV聯(lián)合TCT檢測可起到較好的篩查作用.【關(guān)鍵詞】宮頸病變;HPV感染;基因分型;TCT檢測;篩查【屮圖分類號】R737.3【文獻標(biāo)識碼】B【文章編號】1008—6315(2015)12—0068—02宮頸病變屬于婦科
3、常見疾患，據(jù)相關(guān)統(tǒng)計學(xué)數(shù)據(jù)分析，全世界每年約有49萬新發(fā)病例，尤以宮頸癌居多，其屮發(fā)展屮國家的發(fā)病率已超過所有病例的80%［1］，且就我國而言，近年來宮頸癌的發(fā)病率不僅呈高發(fā)趨勢，且發(fā)病年齡漸趨年輕化［2］,故而世界衛(wèi)生組織(WHO)指出，至2020年子宮頸癌每年新發(fā)病例可能達到70萬，而約90%會發(fā)生在發(fā)展中國家［1］，可見，對于發(fā)展屮國家而言如何對于宮頸病變尤其是宮頸癌進行預(yù)防與診斷是需要解決的問題.上世界70年代在宮頸癌的性傳播疾病模型屮高危型人乳頭瘤病毒(HPV＞的作用被提出后，越來越多的證據(jù)表明，感染HPV是導(dǎo)致宮頸癌發(fā)病，尤其是浸潤性癌的核心因素[3]，而
4、對于宮頸病變的診斷,臨床多采取細(xì)胞學(xué)、陰道鏡以及組織病理學(xué)檢查的三階段診斷方法，但是由于后兩者屬于冇創(chuàng)性檢査，故而臨床多不作為首選檢測，而細(xì)胞學(xué)檢查既往多應(yīng)用巴氏法，但其假陰性率較高，而TCT作為一種液基細(xì)胞學(xué)檢測產(chǎn)品，以其背景清晰，觀察簡單，漏診率低的特點而漸趨應(yīng)用于宮頸病變的篩査和預(yù)后病情評估[4],但兩者結(jié)合對于不M級別宮頸病變HPV感染狀態(tài)患者的篩查有何意義，未見相關(guān)報道，因此，本研究對此進行探討，以期對于臨床有所裨益.1資料與方法1.1研究對象將2014年1月?2014年12月在我院就診J1經(jīng)病理組織學(xué)確診的72例宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)患者,根據(jù)宮頸上皮細(xì)
5、胞不典型增生程度確定為II?III級并切緣為陰性的病歷資料完整的患者作為研宄對象，納入本項目之中.1.2—般資料所有患者年齡24?76歲，平均(41.9±3.6)歲;孕次:未孕者3例,己育者69例，其中孕育1個者34例,2個者22例,3個及以上者13例;民族:漢族者48例，少數(shù)民族者24例;分級情況:II級者7例,11?III級者22例,111級者43例.1.3研究方法1.3.1HPVDNA檢測標(biāo)本均由我科醫(yī)師經(jīng)陰窺器暴露宮頸采集，采集前3d告知患者陰道內(nèi)禁用藥物及沖洗，前1d禁止性生活，將采集后的標(biāo)本放入保存液小瓶，而后去0.5ml液體,離心棄上清液，
6、采用人乳頭瘤病毒基因分型檢測試劑盒(PCR—反向點雜交法)(中山大學(xué)達安基因股份有限公司)對13種常見高危型HPV進行定量檢測，將樣本DNA分解為核苷酸單鏈，與RNA探針結(jié)合形成RNA—DNA雜交體，并被標(biāo)記冇特異性單克隆抗體的微孔板捕獲，加入結(jié)合冇堿性磷酸酶的多個二抗與RNA-DNA雜交體結(jié)合,使信號放大，將底物進行化學(xué)發(fā)光比色后通過檢測標(biāo)本的相對光單位值(RUJs)和陽性對照值(CO),用RIUs/CO值表不待測的HPVDNA的含量;采用凱普生物化學(xué)科技公司HPV核酸擴增分型檢測試劑盒同吋對21種HPV亞型進行分型檢測，首先利用QIAMini試劑盒(購自德國QIA
7、GEN公司)進行DNA提取,而后依次進行DNA擴增、導(dǎo)流雜交以及滴入NBT/BCIP底物芯片進行顯色,1h內(nèi)依據(jù)“TBS報告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)”進行是否存在癌細(xì)胞核上皮內(nèi)病變細(xì)胞、鱗狀上皮細(xì)胞、腺細(xì)胞異常以及提示病原體感染的結(jié)果判讀[3].1.3.2TCT檢測采集宮頸鱗柱上皮交界部位及宮頸管內(nèi)脫落細(xì)胞，采集過程中需采用新柏氏公司TCT技術(shù)專用毛刷進行取材，同時使用TCT專用制片機制成薄層涂片,經(jīng)巴氏染色后行鏡檢.1.4隨訪觀察在患者出院時告知其定期隨訪，主要采用門診的形式至醫(yī)院行定期檢查，復(fù)查時間為間隔3個月?1年不等，主要進行HPV檢測、宮頸細(xì)胞學(xué)TCT檢
