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《hplc法測(cè)定擬南芥中總黃酮含量的研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、HPLC法測(cè)定擬南芥中總黃酮含量的研究張海軍h2,郭麗王明澤車野李澤宇王殿奎(1洪龍江畨農(nóng)業(yè)科學(xué)院大慶分院,黑龍江大慶163316:2吉林大學(xué)梢物科學(xué)學(xué)院,吉林長(zhǎng)春130062)摘要:建立分析檢測(cè)擬南芥中總黃酮含量的高效液相色譜法。色譜條件:PhenomenexC18色譜柱(150mmx4.6mm,5.0pm);流動(dòng)相:甲醇-0.4%磷酸水(35:65,v/v);流速:10mLmin"1,檢測(cè)波長(zhǎng):256nm;杵溫:35°C,進(jìn)樣量:10PL。試驗(yàn)建立的色譜條件,標(biāo)準(zhǔn)品蘆丁在0.05?1.60范圍內(nèi),R2=0.9997,峰而積與質(zhì)fi濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系;平均回收率為99.90%,R
2、SD小于3%(n=6)。該方法適用于擬南芥中總黃酮的檢測(cè)。關(guān)鍵詞:擬南芥;總黃酮含量;蘆??;高效液相色譜法DeterminationofTotalFlavonoidsContentinArabidopsisThalianabyHigh-PerformanceLiquidChromatographicZHANGHai-jun,GUOLi,WANGMing-ze,CHEYe,LIZe-yu,WANGDian-kui*('DaqingBranchesofHeilongjiangAcademyofAgriculturalSciences,Daqing163316,Heilongjiang,China;
3、^CollegeofPlantScience,JilinUniversity,Changchun130062,Jinlin,China)Abstract:TheobjectiveofthisstudywastoestablishamethodtodeterminetotalflavonoidscontentinArabidopsisThaliana.Themobilephaseconsistedonmethanol(A)/0.4%orthophosphoricacidindistrilledwater(B)andeachsolventwasfilteredthrougha0.45
4、impore
5、sizefilteranddegassedinanultrasonicbathbeforeuse.Theanalysisofrutinwasperformedat35°C(columnoventemperature),withalOmL.min1flowrateandtheinjectionvolumewas10gL.SolventA:Bofrutinwas35:65%,andthechromatogramwasdetectedat256nm.Thepeakareahadagoodlinearitywithacorrelationcoefficientof0.9997,andtherecove
6、riesofstandardspilingwas99.90%withRSDlessthan3%.ThismethodwassuitablefordeterminationoftotalflavonoidsinArabidopsisThalianaandotherplants.Keywords:ArabidopsisThaliana.,Totalflavonoidscontent;Rutin;High-performanceliquidchromatographicmethod(HPLC)黃酮類化合物是植物屮苯丙氨酸代謝途徑產(chǎn)生的重要生理活性物質(zhì),具科預(yù)防和治療乳腺癌、結(jié)腸癌、皮膚癌、骨質(zhì)疏松癥
7、、婦女更年期綜合癥的功效,可提高機(jī)體免疫功能,降低心血管疾病和冠心病的發(fā)生[1"3]。高效的檢測(cè)方法是黃酮類物質(zhì)研發(fā)的基礎(chǔ),n前,關(guān)丁總黃酮的定呈檢測(cè)方法冇紫外分光光度法和高效液相色譜法(HPLCf51等,主要集中于銀杏葉'桑葉[7]、苦蕎麥[8]、苦丁茶[9]、落葉松[1G]、百蕊草[11]、花椒[12]和羅漢果[13]等藥川植物,侃對(duì)模式植物擬南芥的相關(guān)研究較少。目前,利用根瘤農(nóng)樸蔭把DNA轉(zhuǎn)化進(jìn)模式植物擬南芥難因組已是常規(guī)操作,其組織培養(yǎng)和梢株冉生研究也已成熟ll4j。本試驗(yàn)以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品,建立檢測(cè)擬南芥屮總黃酮含景的HPLC法,旨在為深入研究(轉(zhuǎn)基W)擬南芥屮總黃酮及相關(guān)產(chǎn)品的研究提供
8、一種技術(shù)參考,為后續(xù)的綜合利用開發(fā)提供理論依據(jù)?;痦?xiàng)目:教冇部新教師基金資助項(xiàng)目(3M2101936604)o第一作奍簡(jiǎn)介:張海軍,男,1986,山東濟(jì)寧人,研究實(shí)習(xí)員,碩士,主要從事植物分子育種工作,在國(guó)內(nèi)外刊物發(fā)表學(xué)術(shù)論文11篇,乳屮主筆7篇,申請(qǐng)專利1項(xiàng)。通訊地址:大慶島新技術(shù)幵發(fā)區(qū)科技路黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院人慶分院,郵編:163316。Tel:13664663209,E-mail:zhan